背景:跨膜蛋白(TMEM)是一种跨生Pediatric medical device物膜的完整膜蛋白,目前已知跨膜蛋白家族成员与众多肿瘤的进展有关。但是关于TMEM44基因在肾透明细胞癌(kidney renal clear cell carcinoma,KIRC)中的机制尚无研究,因Dolutegravir分子量此,本研究旨在分析TMEM44基因对KIRC的细胞增殖、凋亡及迁移的影响,并探讨其具体的分子机制。方法:1、我们首先利用生物信息学分析TMEM44基因在KIRC中的表达差异selleckchem与患者的生存预后;采用单、多因素COX回归分析TMEM44基因与患者预后的相关性,并分析TMEM44在KIRC中的预后价值;通过ss GSEA算法预测TMEM44基因对KIRC细胞生物学活性影响的分子机制。2、通过PCR实验、免疫组化方法和Western blot实验证实TMEM44基因在KIRC组织中的表达差异;再次通过PCR实验和Western blot实验证实TMEM44基因在KIRC细胞系中的表达差异;随后敲低TMEM44表达通过CCK8实验和Ed U实验观察786-O细胞增殖能力变化,通过伤口愈合试验和细胞迁移实验观察786-O细胞迁移能力变化,通过流式细胞术观察TMEM44对786-O细胞周期和凋亡的变化;最后运用敲低TMEM44表达的稳转786-O细胞构建裸鼠皮下存瘤模型分析TMEM44对786-O细胞在体内移植瘤生长能力的影响。3、敲低TMEM44表达后,探讨786-O细胞中PI3K/AKT/m TOR信号通路相关蛋白变化及增殖、凋亡相关蛋白变化。结果:1、生物信息学分析TMEM44基因在KIRC中的高表达且与患者不良预后有关;通过ss GSEA算法预测在KIRC中TMEM44基因与PI3K/AKT/m TOR信号通路的密切相关;PCR实验、免疫组化方法和Western blot实验也证实了TMEM44基因在KIRC组织、细胞系中显著高表达(P<0.05)。2、敲低TMEM44表达后,CCK8实验和Ed U实验证实能显著抑制786-O细胞的增殖能力;伤口愈合试验和细胞迁移实验证实能显著抑制786-O细胞的迁移能力;流式细胞术证实786-O细胞周期阻滞于G1期,细胞凋亡率明显增高;裸鼠皮下存瘤实验也证明敲低TMEM44表达后瘤体生长能力明显抑制(P<0.001)。3、敲低TMEM44表达后,相比于正常组786-O细胞中的p PI3K、p AKT、pm TOR蛋白表达水平明显降低,增殖蛋白MMP2、MMP9、MMP13表达水平明显降低,凋亡蛋白Caspase3、BAX表达显著上升,抗凋亡蛋白BCL2表达显著抑制(P<0.001)。结论:1、生物信息学分析和临床样本实验证实了TMEM44基因在KIRC中高表达且与患者不良预后有关,可能是KIRC的独立预后的危险因素。2、TMEM44在KIRC中是促癌基因,通过体内、体外实验证实其促进KIRC细胞的增殖,同时体外实验也证实其促进KIRC的细胞迁移和抑制KIRC细胞的凋亡。3、TMEM44通过PI3K/AKT/m TOR信号通路影响KIRC细胞的增殖、凋亡及迁移。