S6 kinase 信号通路

目的 探讨阿托伐他汀钙联合氨氯地平治疗高血压合并冠心病患者对其血压、血脂、心功能的影响。方法 按照随机数字表法将句容市人民医院2020IACS-010759年1月至2022年5月收治的150例高血压合并冠心病患者分为对照组（单一口服苯磺酸氨氯地平片治疗）和观察组（应用阿托伐他汀钙片与苯磺酸氨氯地平片联合治疗），各75例。两组患者均治疗2个月后进行疗效评价。比较两组患者治疗前后血压指标、血脂指标、心功能指标，以及治疗期间不良反应[胃肠道反应（恶心呕吐）、头痛、心悸]发生情况。结果 与治疗前比，治点击此处疗后两组患者收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、左室收缩末期内imaging biomarker径（LVESD）、左室舒张末期内径（LVEDD）水平均显著降低，且观察组显著低于对照组；血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、左室射血分数（LVEF）水平均显著升高，且观察组显著高于对照组（均P<0.05）；两组患者不良反应总发生率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 相比于氨氯地平单独治疗高血压合并冠心病，阿托伐他汀钙联合氨氯地平治疗的效果更显著，可更有效地降低患者的血压水平、调节血脂，改善其心功能状态，且用药安全性好。

目的 观察小分子化学抑制剂KYA1797K对毛发生长影响并初步探索其机制。方法 拔除6～8周龄C57BL/6小鼠触须垫特定部位触须,皮selleck NMR内注射KYA1797K后测量再生触须的长度。测量结束后收集标本进行石蜡切片免疫组化检测毛囊的Ki67表达。使用梯度浓度(5μM、15μM、25μM)的KYA1797K干扰人真皮乳头细胞(HHDPC)后检测细胞的增殖和迁移能力;并用Western blot法检测β-Autoimmune kidney diseasecatenin的表达情况。结果 (1)与空白对照组及注射DMSO比较,KYA1797K注射后小鼠触须生长速度受到了抑制(P均<0.01)。(selleck NMR2)与注射DMSO比较,注射KYA1797K后毛囊Ki67的表达明显下调(P<0.01)。(3)与对照组相比,15μM和25μM的KYA1797K处理组HHDPCs增殖率明显受到了抑制,差异均有统计学意义(P<0.01)。(4)与空白对照组相比,梯度浓度(5μM、15μM、25μM)KYA1797K处理后的HHDPC迁移能力均明显受到抑制(P<0.01)。(5)与空白对照组相比,KYA1797K组细胞内β-catenin蛋白相对表达水平均降低(P<0.01)。结论 KYA1797K通过抑制Wnt/β-catenin信号通路影响HHDPC的增殖和迁移从而抑制毛发的生长。

近年来,癌症患者越来越多,并且癌症的死亡率也在不断增加。对于大多数癌症患者来说,传统的物理和化学治疗方法不仅昂贵而且效率不高。此外,一些抗癌药物在杀死癌细胞的同时也会损害正常细胞,患者长时间服用这些药物会使癌细胞产生耐药性。因此,迫切的需要开发新的更加有效的药物。而多肽作为一种高特异性、选择性和对人体伤害小的安全可靠的治疗候选药物,近年来备受研究者的青睐。随着多肽药物数据的增加以及机器学习算法的快速发展,挖掘多肽药物特征以进行新药设计成为一个科研研究热点。尽管研究者基于机器学习算法在多肽的识别和预测等问题上取得了颇为丰富的成果,但在特征提取、分类方法以及多肽设计方面仍可进一步研究。基于机器学习的理论,本学位论文研究了氨基酸-氨基酸之间的特征关系、多肽药物的识别以及生成多肽药物相关问题,具体研究工作概述如下:1.抗癌多肽药物中氨基酸-氨基酸的特征研究。在研究多肽中氨基酸-氨基酸之间的特征关系时,仅考虑序列的信息是远远不够的。鉴于此,本文除了考虑相邻二肽和带有间隔的二肽之间的关系,还考虑了二级结构的信息,即判断氨基酸和氨基酸之间是否处于相同的二级结构,并设计了不同的打分规则,比较了网格搜索和随机搜索两种方法的预测精度和搜索时间,结果表明牺牲了少许预测准确性后,随机搜索比网格搜索的搜索时间将近减少了2000倍,因此将打分规则和随机搜索结合确定最佳的参数组合。为进一步探索多肽序列之间的关系,通过多序列比对寻找Protein Gel Electrophoresis序列间的相似性,对于发现生物序列中的功能、结构和进化的信息具有非常重要的意义。为辅助实验,本论文还提出了一种计算概率的方法来确定保守位置。2.基于机器学习识别抗癌多肽药物。在这个过程特征提取是至关重要的步骤,目前对于多肽序列表示方法的研究已经取得了一些研究成果,但是对多肽结构方面的研究相对较少。本研究以抗癌多肽和抗高血压多肽为研究对象,分别考虑了多肽的一级、二级、三级结构的信息,并且提出了一种新的描述多肽类药物的方法,使用复杂网络中的拓扑属性值(度、接近中心性、介数中心性)从各个层次方面描述多肽类药物。接着构建了支持向量机、K近邻、随机森林三种算法模型,为验证方法的有效性,将所提出的方法与其他两种方法进行比较。结果表明,与现有方法相比,该模型能够很好的预测抗癌多肽药物和抗高血压多肽药物。此外,模型的泛化能力通过构建3个独立的测试数据集得到了很好的验证。为了得到区分抗癌多肽药物和抗高血压多肽药物的显著特征,本文基于支持向量机递归特征消除的特征选择算法,根据权重排名,得到的重要特征为Trp、Ala、Asn、Val、Glu、Ile、Lys、Leu、Arg、Tyr;二级结构中三种类型为α-螺旋、转角以及卷曲;三级结构中得到的重要作用力为氢键和范德华力。为了验证所选特征的合理性,分别从两类多肽类药物的长度、一级序列中氨基酸的含量、氨基酸与八类二级结构的结合紧密度、三级结构中的强作用力和弱作用力的分布情况四个方面进行分析和讨论,发现它们与所选重要的特征是一致的。为了方便其他学者的研究,本文基于Django框架提供了一个免费的在线预测平台。3.基于长短期记忆网络生成抗癌多肽药物。抗癌多肽药物是一种抗击癌症的新型药物,因其毒性低、副作用小已被众多研究者当成治疗疾病的有效药物。然而,随着抗癌药物的耐药性不断上升,迫切需要生成新的抗癌多肽药物。本文首先分析了生成新的多肽序列方法的研究现状,着重介绍了基于长短期记忆网络算法生成新的多肽药物的原理,并指出了考虑函数分析和理化性质(疏水性、氨基酸频率以及电荷)来判断生成多肽药物的性能是不全面的。因此,加入双语评价研究等相关评价指标来计算生成序列和原始序列之间的相似性,以此来更好的评估生成多肽序列的性能。与此同时,将采样的新序列和原始序列输入到随机森林算法中进行预测,结果表明生成的序列是可靠的。综上,本论文首先以二肽为研究对象,分别基于一级结构和二级结构进行特征研究,基于多序列比对算法深入了解物种的序列保守性,从而可以识别PCI-32765说明书对多肽功能最关键的序列部分;接着提出了一种新的描述多肽类药物特征的方法,结合多肽的一级结构、二级结构和三级结构信息,并将其用于多肽药物的识别,实验结果表明本论文提出的方法能够更好的识别多肽药物,特征选择算法有助于挖掘多肽药物的关键特征,辅助后续学者的研究;最后基于长短期记忆网络算法生成新的多肽药物,并将采样的样本在函数分析、理化性质以及双语评价研究等相关评价指标上评估其性能。本论文的创新性主要体现在ABT-199临床试验从系统角度,用网络科学理论提取多肽特征,对两类药物进行准确识别,进一步挖掘两类多肽药物的关键特征,为分析和设计多肽类新药提供理论基础。

目的:评价血浆EBVDNA在鼻咽癌筛查和早期诊断价值,探讨不同患者血浆EBVDNA含量与肿瘤疗效的关系。方法:以2017年1月至2017年12月来福建省肿瘤医院就诊的鼻咽癌首诊患者为研究对象,按入组标准分为鼻咽癌首诊组485例和治疗组238例。用磁珠提取法结合实时荧光定量PCR测定研究对象的EBVDNA含量。建立EBVDNA检测数据库并分析首诊组患者治疗前血浆EBVDNA的诊断效能以及与TNM分期、临床分期的关系,治疗组患者在治疗过程中不同首诊血浆EBVDNA的下降速率和治疗后不同血浆EBVDNA与疗效的关系以及复发时的患者血浆EBVDNA变化趋势。结果:485例首诊患者的ENDNA扩增检出率为93.6%,与健康体检者相比(5.2%),差异有统计学意义。EBDNA诊断鼻咽癌的ROC曲线下面积为0.964(0.951-0.977),敏感E-616452采购性为93.6%,特异性为94.8%,准确性为88.4%,阳性预测值94.8%,阴性预测值为93.Immune composition6%。患者治疗前血浆EBVDNA含量与TNM分期和临床分期正相关,TNM及临床分期早期的患者EBDNA含量显著低于中晚期,首诊血浆EBVDNA含量>10000cop确认细节ies/ml的患者通过三次放化疗的下降为0的病例百分比显著低于血浆EBVDNA≤10000copies/ml患者,差异有统计学意义。复发患者血浆EBVDNA呈上涨趋势。EBDNA的复发检出率为90%。首诊EBVDNA含量为0～200copies/ml的复发患者甚至在治疗过程中可持续检测到低含量的EBDNA。结论:血浆EBVDNA含量检测有助于鼻咽癌的筛查和早期诊断,首诊患者血浆EBVDNA含量越高,分期越晚。治疗过程中EBVDNA含量变化可反映治疗效果,治疗后EBVDNA含量持续复制或上升患者有较高的复发风险。

对某发病的规模化猪场进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reprod寻找更多uctive and respiratory syndrome virus, PRRSV)毒株的分离并通过PCR及IFA确定PRRSV分离成功。用SeqMan、Editseq等软件对分离毒株进行基因组特性分析，选择具有代表性的PRRSV阳性血清免疫健康猪制备大量血清。通过RT-qPCR摸索血清稀释比，小规模动物试验验证该血清稀释比能引起母猪产生高水平抗体又避免其发病。对后备母猪群中如上进行血清驯化，评估受驯化母猪的PRRSV抗体水平及生产性能。结果显示，病原检测确定该场暴发了猪hand disinfectant繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS),在MARC-145和PAM细胞上对该PRRSV毒株进行分离，IFA鉴定该毒株仅在PAM上分离成功；测定该毒株全基因组，基因组特性分析表明其与NADC30毒株位于同一进化分支，享有最高的核苷酸同源性，属于NADC30-like PRRSV流行株。利用该PRRSV流行株阳性血清注射健康猪制备大量血清，按1∶250稀释后在后备母猪群中进行血清驯化，结果显示，约有56.7%的母猪能在血清驯化后1个月产生PRRSV抗体，驯化后3个月PRRSV抗体阳性率达94.2%,平均每月流产数、母猪死亡头数、窝均断奶仔猪数、断奶仔猪头数、每头母猪每年所能提供的断奶仔猪头数(PSY)等生产指标均未受血清驯化影响，且窝均木乃伊胎数显著降低。结果表明，血清驯化能诱导猪群在短时间内产生高水平的PRRSV抗体，且并未对受驯化母猪的生产性能产生不利影响，是规模化猪场防控PRRSBLZ945供应商V,特别是NADC30-like PRRSV的可行性方案。

目的 探讨半枝莲提取物对肝癌HuH-7细胞自噬的影响，并分析自噬在半枝莲提取物调节HuH-7细胞生长抑制中的作用机制。方法 分别用100、Arbuscular mycorrhizal symbiosis200、500、1 000和1 500μg/mL浓度的半枝莲提取物以及500μg/mL半枝莲提取物+5 mol/L 3-Methyladenine(3-MA)处理HuH-7细胞24 h，设不加半枝莲提取物对照组。CCK-8试验检测各组细胞活力，确定最适半枝莲提取物处理浓度，并检测半枝莲提取物及3-MA逆转半枝莲提取物对HuH-7细胞活力的影响；激光共聚焦试验和Western blot法检测半枝莲提取物及3-MNirmatrelvir浓度A逆转半枝莲提取物对HuH-7细胞自噬的影响；流式细胞术检测半枝莲提取物及3-MA逆转半枝莲提取物对HuH-7细胞凋亡的影响；Western blot法检测半枝莲提取物对PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响。结果 500μg/mL半枝莲提取物抑制HuH-7细胞活性40%左右，作用浓度适中，选择该浓度处理HuH-7细胞。与对照组相比，500μg/mL半枝莲提取物可明显诱导LC3B斑点的形成（F=2.597,P <0.01）;LC3B-Ⅱ蛋白表达明显升高（F=2.127,P <0.01），而P62蛋白表达明显降低（F=0.589,P <0.01）。与500μg/mL半枝莲提取物组相比，500μg/mL半枝莲提取物+5 mol/L 3-MA细胞LC3B斑点形成明显降低（F=1.180,P <0.01）;LC3B-Ⅱ蛋白表达明显降低（F=2Gefitinib-based PROTAC 3分子量.315,P <0.01），而P62蛋白表达明显升高（F=0.153,P <0.01）；细胞活性明显恢复（F=1.462,P <0.01），且细胞凋亡率明显降低（F=0.119,P <0.01）。与对照组相比，500μg/mL半枝莲提取物可明显抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路的活性。结论 半枝莲提取物可通过激活自噬抑制肝癌HuH-7细胞生长，其机制可能与对PI3K/AKT/mTOR信号通路的抑制相关。

目的：观察电针透刺法对大鼠滑膜Toll样受体4/骨髓样分化因子88/核转录因子-κB（TLR4/MyD88/NF-κB）信号通路及血清相关炎性因子的影响，探讨电针透刺法对膝关节骨关节炎（KOA）大鼠滑膜炎性反应的影响机制。方法：SD雄性大鼠随机分为假手术组、Polymer bioregeneration模型组、电针透刺组、普通电针组，每组16只。除假手术组外，各组大鼠均采用前LGX818采购交叉韧带离断术造模，术后迫使大鼠运动8周。造模后，电针透刺组于右侧“犊鼻”“内膝眼”予相互透刺5～8 mm，“血海”“梁丘”予相互透刺5～8 mm；普通电针组于右侧“犊鼻”“内膝眼”予向上与皮肤呈30°角斜刺3～5 mm，“血海”“梁丘”予直刺3～5 mm。两组均同样连接电针，疏密波，频率为2 Hz/10 Hz，强度为0.5～1.5 mA，1次/d，每次20 min，10 d为1个疗程，每疗程间休息2 d，共2个疗程。干预后用肌骨超声观察大鼠膝关节积液情况；ELISA法检测大鼠血清中IL-1β、IL-6及TNF-α的含量；HE染色法观察大鼠滑膜形态学变化；免疫组织化学法检测大鼠滑膜组织中NF-κB p65的阳性表达；Western blot法检测大鼠滑膜组织中Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88）、肿瘤坏死因子受体相关因子-6（TRAF-6）及核因子κB p65（NF-κB p65）蛋白表达水平。结果：与假手术组比较，模型组膝关节积液明显增多，滑膜内衬层细胞分布不规则，细胞排列紊乱，生成大量血管翳，可见大量炎性细胞浸润，血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量及滑膜组织中NF-κB p65阳性表达增加（P<0.05），TLR4、MyD88、TRAF-6、NF-κB p65蛋白表达水平升高（P<0.05）；与模型组比较，电针透刺组和普通电针组膝关节积液明显减少，可见滑膜内衬层细胞增生、少量的炎性细胞浸润和血管翳生成，血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量及滑膜组织NF-κB p65阳性表达减少（P<0.05），TLR4、MyD88、TRAF-6、NF-κB p65蛋白表达水平降低（P<0.05）；与电针透刺组比较，普通电针组膝关节积液增多，血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量及滑膜Barasertib IC50组织TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平均升高（P<0.05）。结论：电针透刺法可显著改善KOA大鼠膝关节滑膜炎性反应状态，减少膝关节积液，其作用机制可能是通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的转导而抑制其下游炎性级联反应。

目的 基于腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AMPK/mTOR)介导的自噬途径研究齐墩果酸(OA)预处理大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用。方法 bone biopsy56只大鼠随机分为假手术组、模型组、OA组、OA联合AMPK抑制剂组，每组14只，除假手术组外，其余各组左冠状动脉前降支结扎45 min再灌注2 h建立MIRI大鼠模型，实验前3 d用100 mg/kg OA灌胃预处理OA组、OA联合AMPK抑制剂组，OA联合AMPK抑制剂组同时腹腔注射20 mg/kg Compound C。再灌注2 h后，检测室性期前收缩(PVCs)及室性心动过速/心室颤动(VT/VF)发生次数；2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测心肌梗死体积，计算梗死百分比；苏木精-伊红(HE)染色检测心肌组织形态情况；电镜观察大鼠心肌细胞超微结构情况；免疫印迹法VX-445试剂检测心肌组织中微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ(LC3-Ⅰ)、p62、Beclin1、AMPK、磷酸化(p)-AMPK、mTOR、p-mTOR蛋白等表达情况。结果 与假手术组相比，模型组PVCs、VT/VF、心肌梗死百分比、心肌组织中LC3-Ⅱ/Ⅰ、Beselleck NSC 127716clin1、p-AMPK/AMPK蛋白表达升高，p62、p-mTOR/mTOR蛋白水平降低(P<0.05)，心肌细胞产生明显的自噬性损伤。与模型组相比，OA组PVCs、VT/VF、心肌梗死百分比、心肌组织中p62、p-mTOR/mTOR蛋白水平降低(P<0.05)，心肌组织中LC3-Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、p-AMPK/AMPK蛋白表达升高(P<0.05)，心肌细胞自噬性损伤减轻。与OA组相比，OA联合AMPK抑制剂组PVCs、VT/VF、心肌梗死百分比、心肌组织中p62、p-mTOR/mTOR蛋白水平升高(P<0.05)，心肌组织中LC3-Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、p-AMPK/AMPK蛋白表达降低(P<0.05)，心肌细胞自噬性损伤加重。结论 OA预处理可能通过激活AMPK/mTOR介导的自噬途径从而实现对MIRI大鼠的保护。

研究目的:紫杉醇和蒽环类新辅助化疗广泛用于乳腺癌的治疗,但临床上仍然难以对治疗的敏感性进行预测。材料与方法:在本研究中,我们应用LASSO逻辑回归方法开发了一个基因标签分类器,用于预测乳腺癌新辅助化疗的病理完全缓解(pCR)。进一步使用另外四个独立的测试集进一步评估分类器的预测准确率。同时对基因标签中的基因进行功能Community infection富集分析,并探讨分类器预测得分与免疫特征之间的相关性。结果:我们通过建模找到了一个由25个基因组成的签名分类器,可以有效预测乳腺癌新辅助化疗的pCR。对于基于T/FAC的训练集和测试集,分类期预测评分的AUC可以达到0.9以上,对于T/AC的测试集,AUC也可以达到0.7以上,因此该签名分类器对T/FAC和T/AC方案都具有良好的预测能力。多变量模型显示分类器预GSK1120212纯度测分值作为独立预测因子远优于其他Compound C研究购买临床参数。生物学功能富集分析表明,分类器所包含的基因标签主要富集于免疫相关的生物学过程。分类器预测评分与免疫评分呈显著正相关。pCR和RD样本的免疫细胞类型也有显著差异。结论:总之,我们构建了一个基于25个基因表达值的分类器,可以有效预测乳腺癌紫杉醇和蒽环类新辅助化疗的pCR。同时,我们也发现免疫生态系统积极参与调节新辅助化疗的临床反应,有利于患者的预后。

目的 明确骨桥蛋白(OPN)介导细胞自噬在小鼠低氧性肺动脉高压形成中的作用及机制。方法 将C57BL/6小鼠分为常氧对照组、常氧合并OPN-/-组、低氧对照组、低氧合并OPN-/-组。检测各组小鼠的平均肺动脉压(mPAP)、右心室肥厚指数(RVHI),观察肺组织形态学改变、肺动脉形态学变化情况，检测肺组织中OPN、p38MAPK、PI3K、NF-κB表达量以及自噬相关蛋白LC3B和Beclin-1的表达水平，并对上述结果做分析性研究。结果 与常氧组相比，低氧组小鼠的mPAP及RVHI呈现增高趋势(P<0.05),且低氧下OPN、p38MAPK、PI3K、NF-κB表达量以及自噬相关蛋白LC3B、Beclin-1的表达水平均高于常氧组(P<0.05);与对照组相比，合并OPN-/-组测得的mPAP和RVHI降低(P<0.05),Beclin-1、LC3B的表达水平增高(P<Biometal chelation0.05),而p3selleck8MAPK、PI3K、NF-κB的表达水平降低(P<0.05)。结论 低氧可以促进肺组织中OPN和自噬相关蛋白的表达。敲除OPN基因后自噬相关蛋白的表达水平显著增高，提示OPN对自噬具更多有抑制作用；OPN对低氧性肺动脉高压形成的调控可能是通过激活p38MAPK、PI3K、NF-κB信号通路来实现的。