S6 kinase 信号通路

目的 探讨MST1/2抑制剂对大鼠脊髓损伤后Yes相关蛋白YAP、神经生长相关蛋白43、神经胶质纤维蛋白GFAP、细胞凋亡因子Caspase3表达及运动功能恢复的影响。方法 选取105只体重180～200 g成年雌性SD大Lysates And Extracts鼠，对35只仅做椎板切除手术且不注射药物为假手术组，对70只大鼠建立脊髓顿挫损伤模型，分为生理盐水组、MST1/2抑制剂组，腹腔注射生理盐水、1 mg/kg XMU-MP-1。在手术后第1、3、7、14、21、28天，进行斜板实验及BBB运动功能评分，然后处死大鼠收集脊髓损伤区周围组织，进行免疫荧光染色和免疫印迹检测，观察各组大鼠脊髓组织中YAP、GABlebbistatin临床试验P43、Caspase3、GFAP表达变化情况。结果 斜板实验与BBB运动功能评分结果显示，从术后第7天起，MST1/2抑制剂组评分明显高于生理盐水组，一直持续到术后第28天，差异有统计学意义(P<0.05)。免疫印记结果显示，术后第14天MST1/2抑制剂组的YAP表达明显高于生理盐水组，差异有统计学意义(P<0.05);术后第14天MST1/2抑制https://www.selleck.cn/products/BafilomycinA1.html剂组GFAP、Caspase3表达明显低于生理盐水组，同时发现GAP43出现表达，差异有统计学意义(P<0.05)。荧光染色显示，MST1/2抑制剂组较少炎症细胞浸润、形成神经组织结构框架，生理盐水组明显炎症细胞浸润、形成大量神经胶质瘢痕。免疫荧光染色结果显示，假手术组YAP在神经细胞中出现表达，生理盐水组和MST1/2抑制剂组YAP在神经胶质细胞出现表达，且MST1/2抑制剂组YAP、GAP43阳性细胞数量明显高于其他两组，MST1/2抑制剂组成熟肥大的星形胶质细胞数量明显少于生理盐水组；免疫荧光双标结果显示，YAP与GFAP出现共同表达。结论 脊髓损伤后大剂量应用MST1/2抑制剂能明显促进YAP表达，减轻炎症损伤反应，抑制神经细胞凋亡，改善脊髓损伤区微环境，促进星形胶质细胞形成原始神经组织结构框架，有利于神经突起再生修复，促进运动功能恢复。

[目的]本文旨在分析旋毛虫胶质瘤致病相关蛋白1样蛋白2（GLIPR1L2）对宿主免疫功能的影响。[方法]用反转录PCR（RT-PCR）方法克隆旋毛虫GLIPR1L2基因，构建表达载体，获得重组蛋白（rGLIPR1L2），用Western blot分析rGLIPR1L2的反应原性。将大鼠外周血单个核细胞（PBMC）与rGLIPR1L2共孵育，用免疫荧光技术观察rGLIPR1L2与大鼠PBMC的结合，分析rGLIPR1L2对细胞增殖、迁移、NO分泌、吞噬功能和细胞凋亡的影响。www.selleck.cn/products/pf-06463922大鼠腹腔注射rGLIPR1L2后，测定血清中IL-4、IL-9、IL-17、TGF-β、IFN-γ等细胞因子的变化。背部皮下多点注射对小鼠进行免疫后，ELISA检测特异性IgG、IgG1和IgG2a抗体的变化，收集旋毛虫成虫和肌肉幼虫并计数，分析rGLIPR1L2的免疫保护作用。[结果]体外试验表明，rGLIPR1L2能够促进大鼠PBMC的增殖与迁移，增强细胞NO分泌和吞噬功能，一定浓度下可提高细胞凋亡比例。体内试验SB431542研究购买显示rGLIPR1L2能促进大鼠IL-4分泌，但对细胞因子Non-aqueous bioreactorIFN-γ、IL-9、IL-17和TGF-β的分泌无显著影响。rGLIPR1L2免疫小鼠可引起其体内特异性IgG抗体显著升高，且可显著降低受感染小鼠的肌肉幼虫数量。[结论]旋毛虫胶质瘤致病相关蛋白1样蛋白2能通过多种途径影响宿主免疫功能。

噬菌体展示是一种多功能淘选技术,可选择结合特定靶标的多肽或抗体。各领域研究者使用各种各样的靶标淘选噬菌体展示随机多肽文库,通常能得到与靶标结合的多肽。抗体是最为常用的靶标之一。与抗体可变区结合的多肽不仅有助于确定该抗体识别的表位,还能用于相关疾病诊断与治疗。然而,在以抗体作为多肽噬菌体展示淘选靶标时,通常的目的是筛选得到与抗体可变区结合的多肽。但在实验结果中,有很多可能是与抗体可变区之外区域结合的多肽,如与抗体Fc段结合的多肽。此时,Fc结合肽就是一种靶标无关肽(target-unrelated peptides,TUP)。当然,倘若研究的目的就是解析Fc段与Fc受体相互作用或获得Fc结合肽用于开发抗体的亲和纯化配体,在这种情况下Fc结合肽就是我们想要的信号。无论上述何种情况,确定Fc结合肽都是非常有意义的。目前,还没有预测Fc段结合肽的生物信息学研究。本研究首先从已发表的文献中收集此前未录入的噬菌体随机多肽淘选数据,更新BDB数据库。然后从BDB数据库中收集了46条Fc结合肽、232条Fab结合肽以及9063条抗体结合肽。将232条Fab结合肽随机分为46、46、46、46和48五组,46条Fc段结合肽和前四组Fab结合肽分别作为训练集的阳性和阴性样本,构建四个子模型。采用i Featuimmune-related adrenal insufficiencyre提供的17种特征提取方法将序列转化为数值特征信息,进一步使用MRMD2.0工具对特征矩阵进行降维。使用支持向量机算法(SVM)对降维后特征进行建模,构建四个子模型,使用五折交叉检验对子模型进行评估,采用均值集成策略集成子模型,构建集成模型Fc Binder。此外还使用了朴素贝叶斯、logistic、决策树、KNN以及随机森林等其它机器学习算法建立预测模型与Fc Binder进行系统比较。使用生物淘选来源的9063条抗体结合肽与48条Fab结合肽组成作为测试集对模型可靠性进行评估;再使用非生物淘选来源的可与Fc段结合的多肽序列对模型泛化能力进行评估。最终SVM构建的FCobimetinib细胞培养c Binder集成预测模型效果最优。FcBinder预测准确度为84.8%,AUC达到了0.988。此外,使用不同的阴性样本构建了集成模型Fc Binder,并通过其它机器学习方法构建了五个集成模型。使用MRTX1133体外生物淘选来源的多肽数据以及Sp A结构域序列分别对所有模型进行性能评估。Fc Binder的预测结果最佳,因此,为了方便使用,提供Fc Binder的在线预测服务:http://i.uestc.edu.cn/Fc Binder/。

目的 基于网络药理学及分子对接技术，探究白花蛇舌草和半枝莲药对治疗卵巢癌的作用机制。并对药对活性成分槲皮素进行体外细胞实验验证，验证其对卵巢癌的作用。方法 从TCMSP(TraditionalChineseMedicineSystemspharmacology)数据库筛选白花蛇舌草和半枝莲的活性成分并找出对应的靶点；在GeneCards数据库中检索出卵巢癌相关靶点；用jvenn在线作图工具得到药对和疾病相同的靶点交集；将交集靶点导入STRING平台，构建蛋白质-蛋白质相互作用（protein-proteininteractionnetwork，PPI）关系，用Cytoscape做出白花蛇舌草和半枝莲药对治疗卵巢癌的主要靶点图，用Metascape数据库对主要靶点进行GO富集分析和KEGG通路富集分析。用分子对接对结果进行验证。并对白花蛇舌草-半枝莲活性成分槲皮素进行cck-8细胞增殖实验和流式细胞术检测细胞凋亡实验。结果 与卵巢癌相关的白花蛇舌草-半枝莲药对成分-靶点网络中包含30种成分、109个靶点。其相关性前3的候选化合物分子Genetic instability为槲皮素、木犀草素、β-谷甾醇。这些成分通过AKT1，BCL2L1，CASP3，CASP7等信号蛋白来抑制卵巢癌细胞的生长和转移，涉及信号通路有癌症的途径，乙型肝炎，脂质和动脉粥样硬化，AGE-RAGE信号通路在糖尿病并发症中的应用，PI3K-Akt信号通路等。分子对接结果显示核心成分与核心靶点均有较好的结合能力。不同浓度槲皮素可明显抑制卵巢癌细胞增殖，且浓度越高细胞抑制率越高，细胞凋亡率也随PR-171试剂浓度增高，数据结果有统计学意义(P<0.01)。结论 从网络药理学和分子对接技术得出白花蛇舌草和半枝莲药对可Colforsin通过多成分、多靶点、多通路治疗卵巢癌的作用机制。槲皮素能有效抑制卵巢癌细胞并促进其凋亡。

研究背景和目的Barrett食管(Barrett’s esophagus,BE)定义为食管下段黏膜层单层柱状上皮取代复层鳞状上皮的病理状态。BE在发生、发展过程中,由肠上皮化生过渡到异型增生,再发展到食管腺癌(esophageal adenocarcinoma,EAC)的病理生理演变过程已达成共识,并把BE作为EAC的癌前病变。我国BE的发病率逐年增加,但其发病机理尚不明确,也无治疗BE的特效药物。研究证实环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在BE及EAC组织中高表达,且与BE的临床病理分型及异型性密切相关,表明COX-2可能参与了BE细胞发生、BE相关EAC的发生、发展过程。目前的研究尚缺乏COX-2表达在细胞水平、分子水平对BE的影响以及COX-2在BE发生、发展中作用的研究。通过研究COX-2对人鳞状上皮细胞和BE细胞增殖、凋亡和细胞形态的影响及分子机制,并模拟人体微环境,研究COX-2表达对酸和胆盐混合物诱导的Medial prefrontal人食管鳞状细胞和BE细胞增殖、凋亡和细胞形态的影响以及分子机制,以探讨COX-2在BE细胞发生、异型性转化过程中的作用及可能分子机制。研究方法1.培养人食管鳞状上皮细胞株HET-1A和人BE细胞株BAR-T,瞬时转染COX-2表达载体及COX-2 SiRNA表达载体,检测转染前及点击此处转染24-48小时后细胞增殖、凋亡,蛋白印迹检测转染前后COX-2、NF-κB、CDX-2、MUC2、BMP-4等因子的表达。透射电镜观察细胞的形态和微结构。2.先予酸、胆盐及二者混合物预处理HET-1A及BAR-T细胞株,在刺激物干预不同的时间后分别瞬时转染COX-2 SiRNA载体,48小时后检测细胞增殖、凋亡,蛋白印迹检测COX-2、NF-κB、CDX-2、MUC2、BMP-4表达,电镜观察细胞形态、微结构。研究结果两株细胞的COX-2过表达组增殖速度明显高于对照((P<0.05),SiCOX-2组增殖速度明显低于对照((P<0.05)。COX-2在HET-1A细胞内过表达可见到细胞肠化的表现;COX-2在BAR-T细胞内过表达可见异型性的改变。酸、胆盐及二者混合物均抑制两株细胞增殖,但胆盐和酸混合组对细胞增殖的抑制作用强于单独胆盐或盐酸组。SiRNA COX-2可以增强酸和胆盐混合物对HET-1A和BAR-T细胞增殖的抑制作用。以上过程中NF-κB、CDX-2、BMP-4均与COX-2表达呈正相关。酸、胆盐及二者混合物均可以使两株细胞凋亡增加,但在这三种干预中酸和胆盐的混合物作用最强,基因沉默降低COX-2表达后均增加了细胞凋亡率,同时降低了 NF-κB、CDX-2及BMP-4的表达。在酸、胆盐的混合物干预后,在HET-1A细胞可见线粒体肿胀、空化,在BAR-T细胞可见细胞异型性改变,而SiRNA COX-2作用细胞后则未见上述改变。LY2157299核磁研究结论COX-2表达在BE细胞发生和其异型性转化过程中发挥了重要作用,其机制可能是通过增强COX-2表达激活NF-κB、CDX-2及BMP-4等信号通路实现的。

目的探讨Acsl4、Topo Ⅱα在浸润性乳腺癌组织中的表达与HER2、PR、ER的关系。方法收集本院2019年4月至2021年5月期间行乳腺癌改PR-171作用良根治术患者的病理标本126例作为观察组,另选同期因良性病变手术切除的乳腺组织标本42例作为对照组,免疫组化法检测Acsl4、Topo Ⅱα的表达,并分析其表达与HER2、PR、ER的关系。结果观察组的Acsl4、Topo Ⅱα两者阳性表达显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。HER2阳性的Acsl4、Topo Ⅱα阳ICI 46474供应商性表达均高于HER2阴性,而PR、ER阴性的Acsl4、Topo Ⅱα表达均高于PR、ER阳性,差异均有统计学意义(P<0.05)。高分化肿瘤的Acsl4、Topo Ⅱα阳性表达高于中分化、低medicinal leech分化,差异有统计学意义(P<0.05);TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期的Acsl4、Topo Ⅱα阳性表达高于Ⅰ～Ⅱ期;肿瘤直径>5 cm的Acsl4、Topo Ⅱα阳性表达高于肿瘤直径<2cm、肿瘤直径2～5 cm;淋巴结转移的Acsl4、Topo Ⅱα阳性表达高于未转移;差异均有统计学意义(P<0.05)。Acsl4、Topo Ⅱα表达与年龄、是否绝经比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Acsl4、Topo Ⅱα在乳腺癌组织中存在异常表达,两者的阳性表达与乳腺癌患者组织学分级、淋巴结转移、肿瘤直径、及ER阴性、PR阴性、HER2阳性的表达密切相关。

目的 探讨红花逍遥片联合左甲状腺素钠片对良性甲状腺结节气滞血瘀证患者临床效果及甲状腺功能的影MLN4924使用方法响。方法 选择2020年1—12月就诊的良性甲状腺结节气滞血瘀证80例，据治疗方法分为研究组和对照组各40例。对照组予左甲状腺素钠片治疗，研究组在对照组基础上加用红花逍遥片治疗。2组均连续治疗3个月。比较2组临床疗效，治疗前后甲状腺结节最大横截面直径变化、甲状腺功能及自身抗体水平，以及治疗期间不良反应情况。结果 研究组medial oblique axis治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后，2组甲状腺结节最大横截面直径小于治疗前，且研究组小于对照MK-2206组(P<0.05,P<0.01)。治疗后，2组血清促甲状腺素、甲状腺球蛋白抗体、甲状腺过氧化物酶抗体水平较治疗前降低，且研究组低于对照组(P<0.01)。治疗期间2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 红花逍遥片联合左甲状腺素钠片治疗良性甲状腺结节气滞血瘀证效果显著，可改善甲状腺功能、甲状腺自身抗体水平，且安全性良好。

【目的】细胞凋亡是真核生物中保守的细胞程序化死亡，由蛋白酶caspase介导。Strica是果蝇Drosophila中一个特殊的caspase,至今未有其商品化抗体且生化功能未知。本研究旨在通过克隆、原核表达纯化果蝇Strica蛋白并制备其多克隆抗体来初步研究其功能。【方法】根据果蝇Strica的基因序列构建原核表达载体并转化至大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)感受态细胞，表达Strica蛋白；将表达纯化后的Strica蛋白免疫家兔制备多克隆抗体；通过间接ELISA和Western blot分别测定抗体效价和灵敏度；利用前期构建的过表达载体pAc5-V5-Strica进行转染果蝇S2细胞，设计合成siRNA进行RNAi验证该抗体的特异性；利用该抗体通过免疫荧光实验检测Strica在果蝇S2细胞中的亚细胞定位；利用该抗体通过Western blot实验探究放线菌酮(10μg/mL)处理caveolae mediated transcytosis后果蝇S2细胞中Strica蛋白的激活状态。【结果】获得了果蝇Strica重组蛋白；ELISA检测Strica抗体的效价大于1∶25 600;Western blot鉴定该抗体在1∶10 000的稀释度下能与重组蛋白反应；该抗体可以检测到S2细胞中过表达以及内源性Strica蛋白；Strica蛋白在S2细胞质中呈现散点分布；放线菌酮介导Strica蛋白的切割激活。【结论】成功制备了兔抗果蝇StrJNJ-42756493分子式ica多克隆抗体。Strica响应凋亡selleck RAD001刺激物放线菌酮激活，推测Strica参与果蝇的细胞凋亡过程。本研究为进一步深入研究Strica的功能奠定了实验基础。

目的 比较超声引导下微波消融（MWA）与保留乳头乳晕复合体改良根治术（NSM）治疗早期乳腺癌（T_(0/1/2)N_(0/1)M_0）的可行性和有效性。方法 回顾性分析本院2014年1月～2020年1月进行MWA或NSM治疗的83例早期乳腺癌患者，其中MWA组30例，NSM组53例。通过倾向性评分匹配按1∶1平衡两组基线特征。主要评价指标为肿瘤进展，次要评价指标包括总生存、美容满意度和并发症。结果 倾向性评HCV infection分匹配前平均肿瘤大小2.3 cm(0.3～5.0 cm)；倾向性评分匹配后两组患者各19例，基线特征平衡。中位随访时间34.1（四分位数23.1～41.1）月。所有肿瘤均取得技术成功。转移性淋巴结处理，两组各消融/切除腋窝淋巴结4例（4/19,2Vorinostat1.0%）。Liproxstatin-1研究购买MWA组术后辅助全身性治疗比NSM组少（36.8%vs 73.7%,P=0.02）。共有6例发生肿瘤进展，其中MWA组3例，NSM组3例。MWA组术后42月发生1例局部肿瘤进展，28月发生1例同侧乳房转移，32.8月发生1例脑转移；NSM术后10.2月、31.2月各发生1例同侧乳房转移，34月发生1例骨转移，两组肿瘤进展差异无统计学意义（P=0.68）。两组均无乳腺癌相关死亡和严重并发症（P>0.05）。但MWA组手术时间短（32 min vs 133 min,P<0.001）、术后住院时间短（3 d vs 5 d,P<0.001）、美容满意度更好（P<0.001）。结论 在早期乳腺癌患者中，中位随访期间MWA取得了与NSM相似的治疗效果及更好的美容满意度，MWA为不愿或不耐受手术患者提供了微创安全可耐受的局部治疗选择。

目的 探讨钼靶、多层螺旋CT(MSCT)对乳腺癌根治术患者预后评估的价值MRTX849化学结构。方法 收集2016年2月至2019年2月于本院行乳腺癌根治术的患者351例的临床病理资料,进行回顾性分genetic clinic efficiency析,根据患者乳腺钼靶、MSCT中是否伴有倾向恶性钙化分为钙化组(75例)和对照组(276例)。根据年龄大小分为年轻组(年龄≤35岁),中年组(36～55岁),老年组(年龄>55岁)3个亚组,记录各组局部无复发生存及总生存情况,分析PLX4032溶解度局部无复发生存率及总生存率的影响因素。结果 年轻组及中年组患者中钙化组患者局部无复发生存率及总生存率明显高于对照组(P<0.05),老年组患者中钙化组患者局部无复发生存率及总生存率与对照组无明显差异(P>0.05)。伴有倾向恶性钙化、腋窝淋巴结转移是影响乳腺癌根治术患者局部无复发生存率及总生存率的独立危险因素(P<0.05)。结论 乳腺钼靶、MSCT显示伴有倾向恶性钙化是乳腺癌根治术患者的局部无复发生存及总生存的独立危险因素,钼靶、MSCT对于乳腺癌根治术患者预后具有评估价值。