S6 kinase 信号通路

相较于零维和一维金属纳米材料,二维金属纳米材料因其多功能性、比表面积大、稳定性高等,在生物检测、生物成像和生物治疗方面均有广泛应用。二维金属纳米片由于拥有良好的光热转换效率、优异的类酶活性在生物光热治疗、化学动力学治疗等方面具有巨大的应用潜力。本文合成了两种二维金属纳米材料——超薄PdRu纳米片和超小PtCu纳米片,基于两种材料的不同特性分别探讨了PdRu纳米片对三阴性乳腺癌的NIR-Ⅱ区光热增强催化治疗和PtCu纳米片对脑损伤的消耗自由基治疗,具体内容分为以下两部分:第一部分:采用溶剂热法制备了超薄PdRu纳米片,对其形貌、结构和组成进行表征,研究了其NIR-Ⅱ区光热性能以及光热增强催化性能,并进一步探讨了PdRu纳米片对三阴性乳腺癌的NIR-Ⅱ光热增强催化治疗效果。实验结果表明,PdRu纳米片的尺寸约为10 nm,在NIR-Ⅱ拥有良好的光热转换效率(37.2%),能够通过O_2和H_2O_2双途径产生~1O_2,并且其光热性能能够进一步增强~1O_2产生;细胞和活体实验结果证明,PdRu纳米片拥有良好的生物相容性和NIR-Ⅱ光热增强催化治疗效果。第二部分:通过水热法合成了PtCuSulfonamide antibiotic超小纳米片,对其形貌、结构和组成进行表征,研究其多种类酶活性以及清除活性氮和活性氧的能力,并在其表面进一步修饰Angiopep-2多肽用于递送PtCu纳米片跨越血脑屏障,探究其在细胞水平清除活性氮和活性氧的效果。实验结果表明,PtCuLorlatinib体外纳米片具有类过氧化氢酶、类超氧化物歧化酶活性,较低浓度的PtCu纳米片就能够有效清除H_2O_2、O_2~(·-)、·OH和·NO自由基;细胞实验结果表明PtCu纳米片能够通过清除活性氮和活性氧进行高效治疗脑损伤。综上所述,我们合成了两种性能各异的PdRu和PtCu纳米片,PdRu超薄纳米片在三阴性乳腺癌治疗方面展现出优异的NIR-Ⅱ光热增强催化治疗效果;PtCu超小纳米片表现出超高清除活性氧和活性氮效率的性能,在脑损伤治疗方面具有显著的应用潜力。PdRu和PtCu纳米片展现出优异的不同生物治疗性能,对推动二维金属纳米材料在生物治疗方面的应用具有重要意MK-1775 NMR义。

目的：探究分析乳腺癌术前乳酸脱氢酶/白蛋白比值(LAR)与预后的相关性分析。方法：选取80例行根治术治疗的乳腺癌患者为研究对象，术前检测乳酸脱氢酶、血清白蛋白水平，计算LAR。随访记录患者5年生存情况，采用ROC曲线分析LAR评估乳腺癌预后的最佳截点值，分为PFS<3.389组(38例)、LAR≥3.389组(42例)。采用单因素与多因素Cox回归探讨乳腺癌患者术后预后影响因素。结果：LAR<3.389组与LAR≥3.389组年龄、T分期确认细节、N分期、分子亚型比较，差异有统计学意义(P<0.05);LAR≥3.389组患者术后无疾病生存期低于LAR<3.389组，差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析结果显示，年龄、T分期、N分期、分子分型、LAR为乳腺癌患者预后的危险因素，差异有统计学意义(P<0.05);多因素Cox回归分析显示，年龄≥50岁，T分期、N分期越高，LAR≥botanical medicine3.389为乳腺癌患者预后危险因素，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：LAR升高与乳腺癌患者T分期、N分期、分子分型存在相关性，年龄≥50岁、LAR≥寻找更多3.389是乳腺癌患者术后预后的危险因素，临床上将乳腺癌术前乳酸脱氢酶/白蛋白比值纳入乳腺癌患者预后的预测指标。

目的：探讨扶正抗癌方(fuzheng kangai formula, FZKA)对小鼠M2型巨噬细胞RAW264.7极化的影响及其作用机制。方法：采用白细胞介素-4(interleukin-4, IL-4)作用RAW264.7细胞48 h建立巨噬细胞M2型极化模型，利用流式细胞术、实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法检测M2型标志物巨噬细胞甘露糖受体(CD)206、CD163和转化生长因子-β(transforming growth factor-β, TGF-β)以及M1型标志物一氧化氮合成酶(inductible nitric oxide synthase, iNOS)的表达，将扶正抗癌方作用于M2型巨噬细胞后，检测M1及M2型巨噬细胞标志物、转录因子CCAAT增强子结合蛋白β(CCAAT enhancer-binding proteinβ, C/EBP-β)和miR155的表达，利用瞬时转染法将miRNA模拟物(mimics)和抑制剂(inhibitors)转入细胞后检测C/EBP-β及巨噬细胞极性的变化。结果：在IL-4(20 ng·mL~(-1))作用下，CD20寻找更多6、CD163、TGF-β的表达增加(P<0.01),iNOS表AY-22989使用方法达降低(P<0.01),IL-4成功诱导巨噬细胞向M2型极化；加入扶正抗癌方后CD206、CD163和TGF-β的表达降低(P<0.01),iNOS表达增加(P<0.01),扶正抗癌方可逆转M2型巨噬细胞的极化，同时C/EBP-βmRNA和蛋白的表达降低(P<0.01),miR155的表达增加(P<0.01);将miRNA的mimics和inhibitors转染至M2型巨噬细胞后miR155的表达分别增加和降低(P<0.01),miR155 mimics和inhibitors转染成功；在M2型巨噬细胞中转入miR155 inhibitors后，C/EBP-βmRNA的表达增加(P<0.01),miR155可靶向抑制C/EBP-βmRNA的表达；M2型巨噬细胞中转入miR155 inhibitors后加入扶正抗癌方，CD206和CD163表达增加(P<0.01,P<0.05),miR155 inhibitors抑制了扶正抗癌方对M2型巨噬细胞极化的逆转。结论：扶thylakoid biogenesis正抗癌方可通过上调miR155的表达，进而靶向抑制C/EBP-β基因的表达，并进一步通过下调M2型巨噬细胞标志物CD206、CD163和TGF-β,上调M1型巨噬细胞标志物iNOS的表达，逆转M2型巨噬细胞的极化。

目的：探讨EGFR和HER-2在不同分子类型乳腺癌组织中的表达及其相关性。方法：回顾性分析2015年1月—2020年3月在邯郸市中心医院行手术治疗的乳腺癌患者资料650例(其中浸润性导管癌600例，浸润性小叶癌50例)及乳腺纤维腺瘤30例，应用免疫组织化学(IHC)方法对手术切除标本进行EGFR和HER-2蛋白表达检测，采用χ2检验及Spearman相关分析对数据进行统计学分析。结果：EGFR在乳腺浸润性导管癌中表达阳性率为48.7%，显著高于浸润性小叶癌(24.0%)及Stirred tank bioreactor纤EPZ-6438化学结构维腺瘤(16.7%)(P<0.01)。HER-2在乳腺浸润性导管癌中表达阳性率为27.8%，显著高于浸润性小叶癌(8.0%)及纤维腺瘤(6.7%)(P=0.002)。乳腺浸润性导管癌与浸润性小叶癌中，EGFR阳性率与HER-2评分等级呈正相关(r=1.000,P<0.05)，且EGFR阳性率与HER-2阳性表达呈正相关(r=1.000,P<0.05)。EGFR阳性率在HER-2过表达型与三阴型乳腺癌组织中显著高于Luminal A型和Luminal B型，且Luminal B中HER-2阳性显著高于HER-2阴性亚型(P<0.001)。结论：EGFR、HER-2阳性率在乳腺浸润性导管癌显著升高，且EGFR阳性率与HER-2的评分等级及阳性表达率均呈正相关，EGFR在HER-2过表达型与三阴型乳腺癌组织中显著升高，VX-765 IC50为进一步研究HER-2阳性乳腺癌及三阴型乳腺癌的靶向药物治疗提供线索及理论依据。

急性髓系白血病(Acute myeloid leukemia,AML)是一种以不成熟克隆髓系细胞增殖和异常分化为特征的高异质性血液恶性肿瘤。AML患者的发病中位年龄为67岁,5年生存率只有29.5%。其中60岁以上老年患者的无病生存率(Disease-free survival,DFS)不足10%,生存期(Overall survival,OS)小于1年。AML的治疗主要以化疗(核苷类阿糖胞苷与蒽环类药物联合)和造血干细胞移植为主。虽然化疗可使AML患者达到临床缓解,但易产生耐药性、复发率高、预后不良等问题。因此,亟需新的治疗方案以改善AML患者,尤其复发和耐药患者的预后。细胞凋亡的失调在癌症发生、发展和化疗耐药中起关键作用。抗凋亡蛋白Mcl-1在细胞生存中起关键作用,并在AML中高表达。而且高水平Mcl-1与AML复发相关,显示Mcl-1是一个潜在的AML治疗靶点。AZD5991是高亲和力的Mcl-1选择性抑制剂,在临床前研究中显示出较好的抗血液肿瘤效果,然而单药治疗常常因内源性或获得性耐药而失败。因此,确定潜在靶点以增强AZD5991的抗AML活性至关重要。转录因子c-Myc被认为与Mcl-1共同调控AML细胞的存活与增殖。c-Myc是原癌基因Myc家族蛋白成员之一,在细胞生长、增殖、凋亡、代谢等多个过程中发挥关键作用。c-Myc表达异常会促进肿瘤的发生、发展以及化疗耐药。而且,c-Myc在AML中过度表达,并被证明是AML发病的一个关键因素。由此,我们推测c-Myc在Mcl-1抑制剂AZD5991的抗AML活性中起关键作用。为验证该假说,我们首先应用流式细胞术、Bax、Bak沉默和Co-IP实验证明AZD5991通过释放Bim诱导AML细胞发生内源性凋亡。接下来,我们通过流式细胞术检测不同AML细胞系和患者临床样本对AZD5991的敏感性,Western Blotting实验检测c-Myc、Mcl-1、Bcl-2和Bcl-x L本底蛋白水平。结果显示,不同细胞系和临床样本对AZD5991的敏感程度相差较大,本底c-Myc蛋白水平与AZD5991 EC_(50)s成负相关。我们用另一种Mcl-1抑制剂S63845得到相似结果。这预示c-Myc在Mcl-1抑制剂的抗AML活性中起关键作用。随后,在构建的AZD5991耐药细胞系中,我们发现c-Myc抑制剂10058-F4能够克服细胞对AZD5991的获得性耐药,显示c-Myc蛋白水平是Mcl-1抑制剂抗AML活性的潜在生物标志物。进一步,我们发现10058-F4可在AML母本细胞系、临床样本细胞和AZD5991获得性耐药细胞系中下调Mcl-1,并协同增加AZD5991诱导的AML细胞凋亡。接下来,我们分别从转录、蛋白质翻译和蛋白稳定性方面入手探索10058-F4下调Mcl-1的作用机制,通过RT-PCR、加入综合应激反应抑制剂ISRIB和蛋白质稳定性实验最终确定10058-F4通过增加e IF2的磷酸化抑制蛋白质翻译下调Mcselleckl-1。上述结果预示,同时靶向c-Myc和Mcl-1预示可能产生更好的杀伤digital pathologyAML效果。我们通过流式细胞术检测细胞凋亡以及集落形成实验检测对祖细胞的影响。结果表明,AZD5991与10058-F4联合应用在AML细胞系和临床样本中具有较好协同杀伤AML效果,并对AML祖细胞集落形成产生更强抑制作用。在用药安全性方面,AZD5991与10058-F4联用对健康人外周血细胞凋亡以及正常造血祖细胞集落形成能力影响有限,预示两药联合具有很好的肿瘤选择性和安全性。耐药是限制AML化疗效果的主要障碍。c-Myc和Mcl-1均在化疗耐药中起重要作用,预示对二者的抑制会对化疗耐药细胞产生有效杀伤。于是,我们构建4株对一线AML化疗药物阿糖胞苷(Cytarabine,Ara此网站 C)耐药的细胞系,并证明AZD5991与10058-F4在Ara C获得性耐药细胞中同样具有良好的协同抗AML活性。同时,两药在化疗复发的AML临床样本细胞中也展示出良好的联合效果。上述数据预示,同时靶向Mcl-1和c-Myc具有治疗复发和化疗耐药AML的潜力。综上所述,c-Myc蛋白水平与AZD5991的抗AML活性呈正相关;抑制c-Myc可通过抑制蛋白质合成方式下调Mcl-1,并使AZD5991获得性耐药AML细胞重新敏感;同时抑制c-Myc和Mcl-1在AML细胞系、临床样本、Ara C获得性耐药细胞系和化疗后复发临床样本细胞中均显示出良好的协同抗AML活性,并且具有很好的肿瘤选择性。我们的结果为同时抑制c-Myc和Mcl-1治疗AML提供了数据与理论基础,为化疗耐药或复发的AML患者提供了新的治疗思路。

目的 探讨蛋白酶体抑制剂Marizomib(Mzb)联合顺铂对人子宫颈癌细胞的抗肿瘤效应及其机制。方法 应用人子宫颈癌细胞系SiHa、C33A和子宫颈上皮永生化细胞H8,通过CCK-8、克隆形成实验、Western blot法和流式细胞术，分析Mzb联合顺铂对子宫颈癌细胞的细胞毒性和凋亡的影响。结果 CCK-8结果显示，Mzb浓度在0、0.001～0.5μmol/L时，H8细胞的增殖活性分别为100%、101.92%～28.73%,SiHa细胞的增殖活性分别为100%、100.48%～3.54%,C33A细胞增殖活性分别为100%、83.7%～17.08%。顺铂(0、0.3～40μmol/L)与Mzb(0.01μmol/L)联用后，SiHa细胞增殖活性分别为98.41%、88.06%～55.04%,C33A细胞增殖活性分别为65.58%、61.04%～44.49获悉更多%。克隆形成实验结果显示，medical mobile appsMzb浓度分别为0、0.01、0.025μmol/L时，SiHa细胞克隆数分别为535、391、318,C33A细胞克隆数分别为472、293、172。与子宫颈上皮永生化细胞H8相比，Mzb显著抑制子宫颈癌细胞增殖并呈剂量依赖性(P<0.05),与顺铂联用后效果更显著(P<0.05)。Western blot结果显示，Mzb促进SiHa和C33A细胞内多聚ADP-核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase, PARP)和Caspase 3裂解(P<0.05),与顺铂联用后效果更显著。流式细胞术结果显示，顺铂组SiHa和C33A细胞凋亡率分别为5.8%、21.5%;Mzb组细胞凋亡率分别为6.8%、28%,两药联合组细胞凋亡率分别为8.8%、33.7%。说明Mzb促进子宫颈癌细胞凋亡，与顺铂联用后凋亡更显著(P<0.05)。结论 Mzb对体外子宫颈癌细胞有较强Gefitinib-based PROTAC 3化学结构的抗肿瘤效应，能够敏感化子宫颈癌细胞对顺铂的治疗。在治疗子宫颈癌的临床试验中，顺铂联合Mzb可能是可行且有效的治疗选择。

目的 分析乳腺钼靶检查对乳腺癌的诊断价值。方法 选择本院收治60例疑似乳腺癌患者为研究对象，均行乳腺钼靶检查，将临床病理诊断结果与乳腺钼靶检查结果进行对比，分析乳腺钼靶在乳腺癌诊断价值。结果 疑似乳腺癌患者60例经过病理诊断确诊54例，检出率为90.00%，乳腺钼靶检出51例，其检出率为85.00%，对比差异无统计学意义（P>0.05）；乳腺钼靶检查诊断乳腺癌阳性预测值94.11%、阴性预测值77.77%、敏感度96.00%、特异度70.00%、准确度91.66%；乳腺钼靶X线有特征性影像表现，经乳腺钼靶检查检出乳腺癌患者51例，诊断病灶152个，其中有病灶56个表现为单纯结节和肿块；表现单纯钙化38个；病灶存在有结节、肿RP56976作用块GSK J4分子量伴钙化31个；病灶有局限性浸润小斑片影27个。结论 临床采用乳National Ambulatory Medical Care Survey腺钼靶检查诊断乳腺癌，其诊断准确率高，能够为临床制定治疗方案提供可靠有效依据，临床上值得推广使用。

目的：研究半枝莲乙醇提取物对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)细胞生长、迁移和侵袭的影响及其机制。PCI-32765体内实验剂量方法：实验选用高、低转移WPB biogenesis性HCC细胞系MHCC-97H和MHCC-97L,采用不同浓度(0.25 g·L~(-1)、0.5 g·L~(-1)、1.0 g·L~(-1)、2.0 g·L~(-1)和3.0 g·L~(-1))的半枝莲乙醇提取物进行干预，筛选出50%最大抑制浓度(half maximal inhibitory concentration, IC50)作为后续实验浓度，CCK-8实验和平板克隆实验测定细胞增殖情况；流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡及EpCAM~+和CD133~+细胞比例；细胞划痕实验评估细胞迁移率；Transwell小室迁移和侵袭实验评估细胞迁移抑制率和侵袭抑制率；细胞成球实验测定肿瘤细胞的干细胞特性；Western Blot检测CyclinD1、P27、Bcl-2、Vimentin、Ki-67、Bax、E-cadherin蛋白表达水平。将16只SPF级4周龄雄性BALB/c裸鼠分为半枝莲乙醇提取物组(0.97 g·kg~(-1))和对照组，每组8只，于裸Emricasan分子量鼠左侧腋窝皮下注射100μL(2×10~6个)MHCC-97H细胞，待移植瘤直径>0.5 cm开始给药治疗，对照组给予0.9%生理盐水灌胃，隔5天评估移植瘤体积变化；给药35 d后HE染色检测移植瘤的形态变化及移植瘤肝、肺转移情况；免疫组织化学染色检测Ki-67蛋白表达水平。结果：2.0 g·L~(-1)为半枝莲乙醇提取物的最佳干预浓度。与对照组比较，半枝莲乙醇提取物可明显抑制MHCC-97H和MHCC-97L细胞增殖，明显减少MHCC-97H和MHCC-97L细胞克隆数目，G0/G1期细胞比例显著增加，S期和G2/M期细胞比例显著减少，细胞凋亡率显著升高，细胞划痕愈合进程明显减缓、细胞迁移和侵袭数目明显减少，细胞成球体积明显变小，细胞成球数目、球体形成率及EpCAM~+与CD133~+细胞比例明显降低，Cyclin D1、Bcl-2、Ki-67、Vimentin蛋白表达水平明显降低，P27、Bax、E-cadherin蛋白表达水平明显升高，差异均具有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较，半枝莲乙醇提取物组裸鼠MHCC-97H细胞移植瘤体积明显缩小，瘤质量及Ki-67蛋白表达水平明显降低；肝、肺组织形态学检查显示，半枝莲乙醇提取物组大鼠的癌转移灶大小和数目明显降低，差异均具有统计学意义(P<0.05)。移植瘤组织形态学检查显示，对照组肿瘤细胞呈弥散致密排列、有不同程度有丝分裂活性；半枝莲乙醇提取物组肿瘤组织可见明显的细胞坏死和凋亡。结论：半枝莲乙醇提取物可通过抑制细胞增殖、阻滞细胞周期进程、促进肝癌细胞凋亡、调控上皮间质转化和干细胞特性相关基因表达抑制肝癌细胞生长和侵袭。

目的 观察辛伐Microalgal biofuels他汀联合温针灸配伍中药茶饮治疗冠心病合并高脂血症的临床疗效。方法 选取福建中医药大学附属康复医院接受诊治的冠心病合并高脂血症患者96例，选取时间为2019年3月—2020年12月，随机分为西医组和中西医组，各48PS-341半抑制浓度例。西医组予以辛伐他汀，中西医组在西医组基础上予以温针灸配伍中药茶饮。2组均用药4个月。比较2组治疗前后高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室射血分数(LVEF)、左心室收缩分数(LVSF)、中医证候积分，不良反应KD025。结果 治疗4个月后，西医组和中西医组LDL-C、TC、TG较同组治疗前降低，HDL-C较同组治疗前升高，且中西医组LDL-C、TC、TG较西医组低，HDL-C较西医组高(P<0.05)。治疗后，西医组和中西医组LVESD、LVEDD较同组治疗前缩小，LVEF、LVSF较同组治疗前升高，中医证候积分较同组治疗前降低，且中西医组LVESD、LVEDD较西医组小，LVEF、LVSF较西医组高，中医证候积分较西医组低(P<0.05)。中西医组不良反应总发生率低于西医组(P<0.05)。结论 辛伐他汀联合温针灸配伍中药茶饮治疗冠心病合并高脂血症的临床疗效优于单一辛伐他汀治疗，其可更有效地降低血脂水平，改善心功能和临床症状，且安全性较高。

目的：探讨葛根芩连汤加味联合阿托伐他汀对老年冠心病合并高脂血症病人血脂水平的影响。方法：借助前瞻性Imidazole ketone erastin数字双盲法将2020年1月至2020年12月期间在本院接受治疗的100例老年冠心病合并高脂血症病人分为两组，两组均接受西医药物治疗，对照组另使用阿托伐他丁治疗，研究组加用葛根芩连汤加味治疗，Regorafenib采购患者对比临床疗效、血脂水平、用药安全性。结果：研究组临床疗效高于对照组（P<0.05），治疗前患者血脂指标水平差异不明显（P>0.05），治疗后4周研究组TC水平、TG水平、LDL-C水平降低高于对照组（P<0.05）,HDL-C水平高于对照组（P<0.05），心血管不良事件率低于对照组（P<0.05）。结论：老年冠心病合并高脂血症病人使用葛根芩连汤加味联合阿托Tau pathology伐他汀治疗，临床疗效理想，用药安全性较高，可有效改善血脂水平，该联合用药方式在临床上具有应用价值。