S6 kinase 信号通路

黄连素是广泛存在于黄连、黄柏、小檗等中草药的一种异喹啉生物碱，具有多种药理作用。黄连素发挥多种药理机制与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信enamel biomimetic号通路有关。本文发现黄连素通过调控MAPK信号通路发挥以下作用：抑制癌细胞转移、增殖，增加耐药癌细胞敏感性发挥JQ1分子量抗癌作用；抑制病毒复制，抑制细菌诱导的炎症，抑制真菌增殖发挥抗病原体作用；促进组织葡萄糖摄取降血糖，改善胰岛素抵抗，保护胰岛β细胞发挥抗糖尿病作用；抑制血管平滑肌细胞增殖，抑制血管内皮细胞凋亡，降血脂发挥抗动脉粥样硬化作用；抑制心肌缺血，抑制心肌重塑发挥心脏保护作用；抑制β淀粉样蛋白表达，抑制神经炎症，抑制神经细胞死亡，改善糖尿病性神经病变发挥神经系统保护作用；抗胃肠炎，抗胰腺炎，肝保护作用发挥消化系统保护作用；抗糖尿病肾病，抗药物性肾损伤，抗肾缺血发挥肾脏保护作用；抗过敏反应，抗类风湿关节炎，ABT-263作用抗骨关节炎，抗牙周炎、鼻息肉等发挥抗炎作用。

研究背景及目的免疫球蛋白A肾病(Immunoglobulin A Nephropathy,Igmedicinal valueAN)是一种累及肾脏的自身免疫性疾病,以大量IgA颗粒和免疫复合物沉积在肾小球系膜为主要特征,是最常见的原发性肾小球肾炎之一。目前,IgAN的病因和发病机制尚未完全阐明。铁死亡是一种铁依赖性的调节性细胞死亡,涉及基因、蛋白水平等方面调节,与脂质活性氧的异常累积有关,继而产生氧化应激导致细胞死亡。研究表明,在多种肾病的发生发展过程中可出现不同程度的铁过载及脂质过氧化等铁死亡特征。据报道,铁死亡可能参与多种自身免疫性疾病的发生。然而,铁死亡在IgAN发病中的作用及其相关调节机制尚缺乏相应研究证据。因此,本研究探究铁死亡基因与IgAN病理分型和重要临床指标之间的关系,从而为IABT-199试剂gAN的诊断和治疗提供参考。研究方法本研究分为三个部分。第一部分首先利用高通量测序数据集结合生物信息学方法,基于GEO平台中的IgAN的GSE93798数据集筛选出DEG。结合已公开的铁死亡基因数据库,取交集确定铁死亡相关DEG。使用DAVID在线工具进行GO功能和KEGG通路富集分析,应用STRING进行PPI蛋白互作分析,进一步确定hub基因。使用CIBERSORT探讨IgAN组和对照组之间免疫细胞标志物表达的差异,估计免疫细胞和铁死亡相关DEG之间的相关性。第二部分应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)分别检测55例IgAN患者、55例系统性红斑狼疮患者和55例健康对照的外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中铁死亡相关DEG的表达水平。应用受试者工作特征(Receiver Operating Characteristic,ROC)曲线评价铁死亡相关基因作为诊断IgAN的效能。第三部分分析铁死亡基因表达水平在不同病理分型和不同疾病史的差异,以及与IgAN患者的重要临床指标的关联。研究结果第一部分,共筛选出348个差异表达基因,其中241个上调基因,107个下调基购买Entinostat因。基于已公开的铁死亡公共数据库,取交集进一步筛选出18个铁死亡相关的DEGs,基于PPI蛋白互作分析以及MCC算法,最终枢纽基因确定为IL1B、JUN、ATF3、CDKN1A、TNFAIP3。免疫浸润分析表明,JUN,ATF3,CDKN1A和TNFAIP3与中性粒细胞相关性最强。第二部分,PCR实验结果表明,铁死亡基因ATF3(P<0.001)、IL1B(P<0.001)、JUN(P<0.001)和TNFAIP3基因(P=0.002)在IgAN组表达水平低于健康对照,差异具有统计学意义。ROC曲线分析表明,IL1B、JUN、ATF3的曲线下面积(Area under the curve,AUC)均在0.7以上,分别为0.763,0.738和0.789。IL1B、JUN和ATF3基因联合诊断价值较高。将SLE病例作为疾病对照,结果表明IL1B(P<0.001)、ATF3(P<0.001)和TNFAIP3基因(P<0.001)在SLE组表达水平高于IgAN,差异具有统计学意义。JUN(P<0.001)和CDKN1A基因(P=0.004)在IgAN组表达水平高于SLE组,差异具有统计学意义。ATF3和TNFAIP3的AUC值分别为0.776和0.743。第三部分,病理类型表现为细胞纤维性新月体占肾小球总数百分比为1-24%(C1)的患者PBMC中IL1B表达水平高于无新月体患者(C0)。在Lee氏分型中,更严重的肾小球新月体和硬化、肾小管和肾间质病变的IgAN患者的IL1B表达水平更高(Ⅳ型vsⅢ型)。EGFR和铁水平与IL1B基因表达水平呈负相关。JUN基因表达水平与葡萄糖苷酶和尿微量白蛋白呈正相关,但与血红蛋白水平呈负相关。CDKN1A基因表达水平与钠、铁和总蛋白呈负相关。有肾病家族史的IgAN患者TNFAIP3表达水平低于没有肾病家族史的IgAN患者。结论(1)铁死亡基因IL1B、JUN、ATF3,CDKN1A和TNFAIP3与免疫细胞相关。JUN,ATF3,CDKN1A和TNFAIP3与中性粒细胞相关性最强。(2)与健康对照组相比,IgAN患者PBMCs中的IL1B、JUN、ATF3和TNFAIP3表达水平降低。IL1B、JUN、ATF3对区分IgAN和健康对照的诊断价值较高。IL1B、ATF3和TNFAIP3在SLE组表达水平高于IgAN组;JUN和CDKN1A基因在IgAN组表达水平高于SLE组。ATF3和TNFAIP3基因联合诊断价值较高。(3)IL1B表达水平在牛津分型为C1的患者中高于C0,Lee氏分型Ⅳ型患者Ⅲ高于Ⅲ型。有肾病家族史的IgAN患者TNFAIP3表达水平低于无肾病家族史的IgAN患者。IL1B、JUN和CDKN1A表达水平与IgAN的重要临床指标存在关联。综上所述,本研究结果表明铁死亡相关基因在IgAN中存在异常表达,且与该病多种临床特征存在关联,为IgAN的预防、诊断和治疗提供新的思路。

目的:观察温胃阳汤治疗脾胃阳虚型幽门螺杆菌相关性胃炎的临床疗效,同时运用网络药理学技术,分析生物功能与通路信息,探讨温胃阳汤治疗脾胃阳虚型幽门螺杆菌相关性胃炎的作用机制。方法:临床研究部分:收集2022年1月至12月于柳州市中医医院就诊中符合脾胃阳虚型的幽门螺杆菌相关性胃炎患者70例,随机分为对照组与观察组各35例,对照组采用四联疗法治疗,即阿莫西林胶囊1g bid,克拉霉素胶囊0.5g bid,雷贝拉唑肠溶片10mg bid,胶体果胶铋胶囊100mg tid,连续服用14天后停药。观察组在四联疗法的基础上同时服用温胃阳汤治疗,两组疗程均为14天。记录患者治疗前后的中医证候积分和计算疗效指数,疗程结束后1月复查碳14尿素呼气试验,统计两组的Hp根除率,记录治疗过程中出现的不良反应事件。网络药理学研究部分:利用TCMSP、Herb中药数据库收索药物活性成分和靶点基因basal immunity。运用uniprot数据库将药物靶点基因转换成相对应的标准基因名。通过Gene Cards、OMIM、Disgenet三个疾病数据库收集幽门螺杆菌相关性胃炎的疾病靶点基因,构建药物与疾病基因的交集图,用Cytoscape 3.7.2软件制作药物成份-靶点的可视化网络图。将中药与疾病交集的靶点导入STRING数据库,制作蛋白质相互作用网络图,再根据Degree值由大到小筛选出核心靶点蛋白并绘成PPI网络图。最终通过DAVID数据库进行基因本体论(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,筛选出排名前10的GO功能分析结果与排名前15的信号通路信息。结果:临床研究方面:临床观察总共纳入70例患者,最终完成研究的案例有67JNJ-42756493作用例,其中对照组脱落1例,剔除1例,33例已完成研究,观察组脱落1例,34例已完成研究。两组患者的一般资料无统计学的差异。对照组和观察组的治疗后的Hp根除率分别为:84.84%和97.05%,两组的根除率在统计学上无差异(P>0.05)。在中医证候评分方面,治疗后观察组的中医证候总分低于对照组(P<0.05)。观察组总共有7种中医证候的改善程度高于对照组,分别为:“胃脘冷痛”、“食后腹胀”、“烧心感”、“恶心呕吐”、“口吐清涎”、“畏寒肢冷”、“大便稀溏”,这些证候积分与对照组相比有统计学差异(P<0.05)。在治疗过程中观察组的不良反应率低于对照组(P<0.05)。网络药理学方面:网络药理学分析中获得45种药物有效成分,有效靶点为1036个,疾病靶点有2068个,药物与疾病的交集靶点有290个。筛选出排名前5的核心靶标蛋白分别为AKT1、IL-6、TP53、TNF、ALB,GO功能展示了主要生物过程(BP)共560个条目,细胞组成(CC)共59个条目,分子功能(MPS-341F)共99个条目。KEGG通路富集分析结果表明:温胃阳汤主要参与治疗的信号通路为癌症调控通路、脂质和动脉粥样硬化相关通路,以及JAK/STAT、P13K/Akt、Fox O等与炎症反应相关的通路。结论:温胃阳汤联合四联疗法治疗脾胃阳虚型HPAG与单纯四联疗法的Hp根除率相当,但温胃阳汤的参与治疗更能有效改善临床症状,且治疗期间的药物不良反应发生率更低,安全性较高。温胃阳汤的在药物作用机制上面是发挥减轻炎症,促进胃黏膜修复,抑制癌变相关的信号通路等作用。温胃阳汤对于脾胃阳虚型的幽门螺杆菌相关性胃炎的治疗有临床运用价值,值得推广。

目的 探讨尿微量白蛋白、血清胱抑素C和血清同型半胱氨酸联合检测诊断高血压肾病的价值。方法选择2021年3月—2023年3月上海交通大学医学院附属苏州九龙医院收治的高血压肾病患者60例，另取同期健康体检者60例为对照组，比较两组尿微量白蛋白、血清胱抑素C和血清同型半胱氨酸水平，评估3指标联合对高血压肾病诊endobronchial ultrasound biopsy断效能，另将高血压肾病患者分为早期LY294002临床试验高血压肾病与临床高血压肾病组两亚组，对比两亚组检测值的差异。结果 观察组尿微量白蛋白（29.46±5.20）mg/L、血清胱抑素C(1.57±0.32)mg/L、血清同型半胱氨酸（21.53±4.29）μmol/L均高于对照组，差异有统计学意义（t=27.409、9.620、22.631,P<0.05）。联合检测对高血压肾病诊断准确率（95.00%）和灵敏度（96.67%），高于尿微量白蛋白+同型半胱氨酸、胱抑素C+同型半AZD9291抑制剂胱氨酸检测（χ~2=13.000、21.000、15.000、21.000,P<0.05）。临床高血压肾病组尿微量白蛋白、血清胱抑素C、血清同型半胱氨酸均高于早期高血压肾病组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 高血压肾病患者尿微量白蛋白、血清胱抑素C和血清同型半胱氨酸水平明显升高，联合检测可提高疾病诊断效能，且肾损害越严重该3指标水平越高。

由应激引起的炎症反应是当前家禽养殖业的一大难题,持续的炎症刺激是导致家禽免疫力降低、死淘率增高的重要原因之一,对家禽养殖业造成了巨大的经济损失。课题组前期通过转录组测序技术开展了糖皮质激素诱导的应激反应对鸡免疫器官基因表达影响的研究,发现MyD88基因通过TLR4/MyD88信号通路对应激状态下家禽免疫器官功能具有潜在调节作用。因此,MyD88基因在家禽生产过程中是MRTX849溶解度否参与了应激导致家禽免疫器官损伤引起的炎症反应,进而影响机体的免疫功能,值得进一步研究。海藻硫酸多糖(Sulfated Polysaccharides from Seaweed,SPS)具有良好的抗炎、抗病毒、抗肿瘤活性和调节机体免疫力的功能。目前,关于SPS作为一种天然的免疫调节剂应用于家禽领域中的研究较少。探究SPS调控家禽免疫器官炎症反应的作用机理对家禽生产具有重要的指导意义。本研究通过构建雏鸡断喙应激炎症模型和鸡巨噬细胞(HD11)炎症模型,采用ELISA、CCK-8、LDH、q RT-PCR、Ed U、流式细胞术等方法在个体和细胞水平上检测SPS对雏鸡脾脏中MyD88基因和TLR4/MyD88/NF-κB信号通路中相关基因表达以及HD11细胞增殖、凋亡的影响。探讨SPS调控家禽脾脏应激性炎症反应的作用机理,为新型抗应激添加剂的开发和应用提供理论依据。主要研究内容和结果如下:试验一:SPS对断喙应激诱导雏鸡脾脏炎症反应的影响选择1日龄体重相近、健康的固始公鸡200只,随机分为A、B、C、D、E 5个组。A组为对照组,饲喂基础日粮不添加SPS;B、C、D、E组为断喙应激组,基础日粮中分别添加0 mg/kg,80 mg/kg,160 mg/kg,240 mg/kg的SPS。适应性饲养至10日龄,分别于断喙后第1、3、5、7 d后进行屠宰和样品采集。采用全自动血液生化分析仪、ELISA和q RT-PCR检测免疫相关指标的变化。结果显示,与A组相比,B组雏鸡在断喙后不同时间点,血清中CORT、LDH、TC、IL-6、TNF-α、IL-1β和NF-κB的含量显著升高(P<0.05),Ig M、Ig G、CD3和CD4的含量显著降低(P<0.05),表明雏鸡断喙应激炎症模型构建成功;与A组相比,B组脾脏组织中MyD88基因表达量显著升高(P<0.05);与B组相比,不同浓度的SPS均能提高雏鸡的免疫器官指数,降低血清中炎性细胞因子的含量,下调脾脏中MyD88和促炎基因的相对表达量,缓解断喙应激引起的炎症反应,改善机体的免疫状态。其中,添加160 mg/kg SPS的效果最显著(P<0.05)。试验二:MyD88对HD11细胞免疫功能的影响在雏鸡断喙应激诱导的炎症模型中,MyD88基因在脾脏中显著高表达,推测MyD88基因在调控应激诱导的鸡脾脏selleckchem Torin 1炎症反应中可能发挥关键作用。因此,我们通过构建MyD88过表达载体和干扰片段并将其转染至HD11细胞中,旨在从细胞水平上探究MyD88基因对HD11细胞免疫功能的影响。结果显示,MyD88过表达后能显著Immunochromatographic assay上调促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-8、NF-κB和TLR4基因的相对表达量(P<0.05),显著抑制HD11细胞的活性和增殖(P<0.05),促进细胞的凋亡(P<0.05);干扰结果与过表达结果呈相反趋势。此结果表明,MyD88基因具有促炎作用,促进炎症相关基因的表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,调节HD11细胞的免疫功能。试验三:SPS对脂多糖(LPS)诱导HD11细胞炎症反应的影响通过添加LPS构建HD11细胞促炎模型。采用CCK-8和LDH法筛选SPS在HD11中的最佳添加浓度,并通过转染MyD88过表达质粒和干扰片段与LPS共处理,以及将SPS与LPS进行共处理,采用q RT-PCR法检测炎性细胞因子的表达水平,探究SPS是否通过MyD88基因调控HD11细胞的炎症反应。结果显示,添加2μg/m L的LPS刺激细胞9 h成功构建HD11细胞促炎模型,50μg/m L SPS能显著提高HD11细胞的存活率(P<0.05),且对细胞没有明显的毒性作用;MyD88与LPS联用具有协同作用,能进一步促进IL-1β、TNF-α、IL-8、NF-κB和TLR4等炎症基因的表达(P<0.05),加剧由LPS诱导的细胞炎症反应;SPS与LPS进行共处理,能显著下调TLR4/MyD88/NF-κB炎症信号通路中相关基因的表达水平(P<0.05),缓解由LPS刺激的细胞炎症反应。综上所述,SPS可能通过下调MyD88基因所介导的TLR4/MyD88/NF-κB炎症信号通路,缓解雏鸡断喙应激诱导的炎症反应,以及LPS所致HD11细胞炎症反应。

目的 研究虚拟现实认知训练联合多奈哌齐对脑卒中后认知相关电位的影响。方法 选取福建中医药大学附属康复医院于2021年8月—2023年1月收治的60例患者作为样本，经脑电图检查、MRI检查确诊为脑卒中且治疗后存在轻度认知功能障碍的患者。随机抓阄法分为两组，每组30例。其中传统认知训练联合多奈哌Panobinostat采购齐治疗患者纳入对照组，虚拟现实认知训练联合多奈哌齐治疗治疗患者纳入试验组。比较两组脑卒中后轻度认知功能障碍患者的临床治疗效果、氧化应激指标、脑代谢指标、认知功能评分、神经递质水平、认知相关电位情况。结果 治疗后，试验组总有效率高于对照组（P <0.05）。试验组丙二醛、同型半胱氨酸低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。试验组患者N-乙酰天冬氨酸（N-acetyl-aspartate,NAA）/肌酸（creatinine,Cr）高于对照组，胆碱复合物（choline,Cho）/Cr低于对照组（P <0.05）。试验组患者简易精神状态量表（mini-mental state examination,MMSE）评分高于对照组，蒙特利尔认知评估量表（Montreal cognitive AMG510assessment,Mo CA）评分高于Biomaterial-related infections对照组（P <0.05）。试验组乙酰胆碱高于对照组，多巴胺高于对照组（P <0.05）。试验组P300波幅高于对照组，P300潜伏期低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 虚拟现实认知训练联合多奈哌齐治疗的效果显著优于传统认知训练，因此虚拟现实认知训练更具推广价值。

目的 探讨地榆皂glucose biosensors苷Ⅱ对结肠癌细胞HT-29增殖、迁移、侵袭和凋亡的作用并探讨其作用机制。方法 采用CCK-8法检测地榆皂苷Ⅱ对细胞增殖的影响，采用划痕试验检测地榆皂苷Ⅱ对细胞迁移能力的影响，采用Transwell小室实验检测地榆皂苷Ⅱ对细胞侵袭能力的影响，采用流式细胞术测定地榆皂苷Ⅱ对细胞凋亡的影响，分别采用实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot法测定地榆皂苷Ⅱ对细胞中蛋白激酶B (AKT)/磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)信号通路mRNA和蛋白表达的影响。结果 地Docetaxel细胞培养榆皂苷Ⅱ(0、1、5、10、20、40、60和80μmselleck化学ol/mL)可剂量依赖性抑制结肠癌细胞HT-29的增殖；地榆皂苷Ⅱ(5、10和20μmol/mL)可剂量依赖性抑制结肠癌细胞HT-29的迁移能力；地榆皂苷Ⅱ(5、10和20μmol/mL)可剂量依赖性抑制结肠癌细胞HT-29的侵袭能力；地榆皂苷Ⅱ(5、10和20μmol/mL)可剂量依赖性促进结肠癌细胞HT-29的凋亡；地榆皂苷Ⅱ(5、10和20μmol/mL)可剂量依赖性降低结肠癌细胞HT-29中AKT和PI3K mRNA的表达，增加Caspase-3和Caspase-9 mRNA的表达；地榆皂苷Ⅱ(5、10和20μmol/mL)可剂量依赖性地降低结肠癌细胞HT-29中磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)和磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)蛋白的表达，增加Cleaved-Caspase-3和Cleaved-Caspase-9蛋白的表达，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 地榆皂苷Ⅱ具有抑制结肠癌细胞HT-29的增殖、迁移、侵袭，促进细胞凋亡作用，可能与其促进AKT和PI3K蛋白磷酸化、Caspase-3和Caspase-9蛋白活化而调节AKT/PI3K信号通路有关。

目的 探讨利格列汀片联合羟苯磺酸钙胶囊治疗糖尿病肾病的临床价值。方法 回顾性分析2019年5月—2022年5月中国人民解放军联勤保障部队第九一〇医院肾内科收治的60例糖尿病肾病患者的临床资料，按照入院先后顺序进编号并分组，前30例纳入对照组，常规行血糖、血压控制，运用盐酸贝那普利降低血压、减轻心脏和肾脏负担，从而保护肾脏功能等基础治疗；剩余30例纳入联合组，在常规基础治疗上使用利格列汀片联合羟苯磺酸钙胶囊联合治疗。对比两组的血糖、血脂情况，肾功能各项指标改善情况。结果 治疗后，联合组血糖、血脂控制效果优于对照组，差异Virus de la hepatitis C有统计学意义（P<0.05）；治疗后，联合组血肌酐、尿素氮、蛋白尿排泄率、肾小球过滤率均低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 糖尿病肾病PI3K/Akt/mTOR抑制剂在常规控selleck糖控脂基础上使用利格列汀片联合羟苯磺酸钙胶囊进行药物联合治疗可增强血糖、血脂控制效果，同时联合用药下可对肾功能、疾病的治疗以及预后产生积极影响

研究目的:重复闭合性脑损伤(repeated closed head injury,r CHI)是对抗类项目运动员常见的脑损伤之一,经常发生在拳击、足球、橄榄球等对抗性比赛和其他运动中,运动过程中严重的闭合性脑损伤会造成不可逆性的颅脑器质及功能异常,给运动人员带来了极大的身体和心理伤害,是临床亟待解决的难题。闭合性脑损伤对神经等损害主要包括两方面,首先是直接性伤害,包括神经元轴突或者突触的损伤等。其次是继发性伤害导致的闭合性脑损伤,由于线粒体结构和功能障碍、细胞碎片等导致的氧化应激和慢性炎症反应可导致脑组织受到二次伤害。因此,解决重复闭合性脑损伤后的继发性伤害是促进脑损伤恢复的一种有前景的治疗策略。靶向线粒体结构和功能进而改善多种损伤性脑病和神经退行性脑病已得到大量研究的证实。目前普遍认为线粒体是低强度激光的光生物调节作用(Photobiomodulation,PBM)的靶点,光生物调节可通过改善线粒体功能影响氧化应激和炎症反应进而达到到减轻脑损伤的目的。然而,鲜有研究深入探讨PBM预防r CHI的作用和神经保护的机制。本课题使用大鼠r CHI模型模拟对抗类运动项目常见闭合性脑损伤,探究PBM预防r CHI神经元损伤和行为学障碍的作用和机制。研究方法:将32只6周龄雄性SD大鼠,随机分为4组。分别为正常对照组(Cont组)、正常对照+光生物调节组(Cont+PBM组)、脑损伤组(r CHI组)、脑损伤+光生物调节组(r CHI+PBM组),每组8只。使用自由落击模型构建闭合性脑损伤,每5天进行一次撞击,共撞击3次。术前使用异氟烷对大鼠进行麻醉,备皮,碘伏局部消毒后在颅骨正中做3 cm左右切口,剥离皮下组织及骨膜,充分暴露颅骨,置于十字型撞杆下,使用198.6 g圆柱形撞击器在120 cm高处自由落击大鼠头部切口处。撞击后立即去除撞击器,缝合局部皮下组织及皮肤,局部应用抗生素以防止伤口感染。造模后Cont+PBM组和r CHI+PBM组即刻进行808 nm连续获悉更多波低强度激光照射头部损伤处,每天照射一次,每次2 min,连续20天。头皮表面接受到的激光强度为350 mW/cm2、皮质接受到的激光强度为25 mW/cm2、光斑面积为1.5 cm2。Cont组和r CHI组非激光照射,但进行与光生物调节组同样的操作,唯一不同的是不打开激光器电源。实验进行至第20天,使用巴恩斯迷宫(Barnes maze)、高架十字迷宫(Elevated plus maze)、旷场实验测试检测大鼠脑损伤后的焦虑、紧张等状态。免疫荧光和/或Western Blot检测皮质的神经元凋亡(NeuN/Tunel,Caspase-3/9的活性、Bcl-2、Bax)、神经元退行性变化(NeuN/Fluoro-Jade C)、神经元损伤(MAP2、MBP、SYP、Spin)、线粒体碎片化(Tom20、FIS1、MFN1)、星形胶质细胞和小胶质细胞的过度活化及表型极化(GFA购买CobimetinibP和Iba-1分别与A1/M1和A2/M2标记物分别进行共染)、检测不同极化表型的星形胶质细胞对髓鞘的吞噬情况(GFAP、A1/A2标记物及MBP进行三染)。使用Image J和ImariHIV-related medical mistrust and PrEPs软件进行共定位分析及细胞体积分析。研究结果:巴恩斯迷宫结果显示,重复闭合性脑损伤不会导致海马依赖的空间学习及记忆障碍,r CHI组与r CHI+PBM组之间无显著性差异;高架十字迷宫发现r CHI组进入开臂的次数和总体逗留时间显著低于Cont组和r CHI+PBM组,提示重复闭合性脑损伤造成大鼠的焦虑样行为,而PBM显著改善r CHI造成的大鼠焦虑样行为。旷场实验进一步验证了r CHI组大鼠的焦虑样行为,主要表现为穿越线的次数显著低于Cont组和Cont+PBM组。Tunel染色结果显示,r CHI造成皮质部位的神经元发生明显的凋亡,而PBM显著减少重复闭合性脑损伤造成的神经元凋亡;NeuN与Fluoro-Jade C共染发现r CHI造成神经元明显的退行性变化,而PBM显著改善神经元退行性变化;MAP2、MBP、Spin、SYP的染色结果发现,PBM可显著改善r CHI导致的神经元损伤。进一步的机制研究发现,PBM可通过改善线粒体的碎片化减少炎症反应,表现为r CHI组皮质区域线粒体连续结构显著减少、分裂蛋白表达显著增加、融合蛋白表达显著减少、小胶质细胞和星形胶质细胞显著激活,而光生物调节作用干预后上述变化均得到显著改善。重复闭合性脑损伤导致星形胶质细胞向A1表型极化,导致A1表型星形胶质细胞吞噬髓鞘,而PBM则促使极化的星形胶质细胞向抗炎表型A2极化并减少髓鞘吞噬。Cont组和Cont+PBM组之间在行为学和上述各指标的统计中无显著性差异。研究结论:低强度激光光生物调节作用可显著改善重复闭合性脑损伤导致的神经元损伤、神经元退行性变化和神经元凋亡。机制上主要通过减少线粒体碎片化进而调控胶质细胞的表型极化状态,减少星形胶质细胞对神经元髓鞘的吞噬。同时结果表明光生物调节对正常大鼠皮质调控无效。上述结果为在运动医学领域使用低强度PBM调节预防和减少对抗类项目中的重复闭合性脑损伤提供了有力的动物实验支持。

目的 探究IL-35和IL-37在幽门螺杆菌（Hp）相关Surgical intensive care medicine性胃炎和胃溃疡患者中表达水平的差异。方法 选择2019年6月至2021年6月中国人民解放军联勤保障部队第九四一医院收治的胃炎和胃溃疡患者作为研究对象。经纳入、排除标准筛选，共入组124例患者，其中Hp相关性胃炎患者42例（设为HAG组），非Hp相关性胃炎患者24例（设为nHAG组），Hp相关性胃溃疡患者38例（设为HGU组），非Hp相关性胃溃疡患者20例（设为nHGU组）。采用ELISA法检测血浆中IL-35和IL-37蛋白的表达水平。采用实时荧光定量PCR法检测胃黏膜组织中IL-35和IL-37 mRNA的表达水平。采用logistic回归模型分析影响Hp相关性胃溃疡发生的危险因素。结果 与nHAG组相比，Hselleck激酶抑制剂AG组血浆中IL-35和IL-37蛋白的表达水平，以及胃黏膜组织中IL-35和IL-37 mRNA的相对表达量均显著降低（P均<0.05）。与nHGU组相比，HGU组血浆中IL-35和IL-37蛋白的表达水平，以及胃黏膜组织中IL-35PF-02341066体内实验剂量和IL-37 mRNA的相对表达量均显著降低（P均<0.05）。Hp相关性胃溃疡患者血浆中IL-37蛋白的表达水平，以及胃黏膜组织中IL-35和IL-37 mRNA的相对表达量均与胃溃疡的发生呈负相关，且均为胃溃疡发生的保护因素（P均<0.05）。结论 Hp相关性胃炎和胃溃疡患者中IL-35和IL-37均呈低表达，两者对于诊断胃炎和胃溃疡患者是否感染Hp具有一定应用价值。