S6 kinase 信号通路

目的 初步探讨肝肠吻合联合胆管支撑管置入术在Bismuth Ⅲ、Ⅳ型肝门部胆管狭窄修复中的应用价值。方法 回顾性收集2008年10月至2020年10月期间因Bismuth Ⅲ、Ⅳ型肝门部胆管狭窄于华中科技大学同济医学院附属协和医院行肝肠吻合联合胆管支撑管置入术的患者14例，所有患者均符合纳入排除标准。收集点击此处患者一般资料、既往病史、临床资料、术后住院时间、并发症发生率及术后复发情况等。结果 根据Bismuth分级对胆管狭窄的患者进行分类，Bismuth Ⅲ级3例，Bismuth Ⅳ级11例。良性病变10例，继发于胆管损伤的胆管狭窄8例，其中医源性损伤7例，腹部创伤1例；炎症性狭窄2例，其中胆管炎1例，炎性假瘤1例。恶性病变4例，均为肝门部胆管癌。14例患者均顺利完成手术，其中12例行腹腔镜下肝肠吻合联合胆管支撑管置入术，2例因严重腹腔粘连中转开腹；无围手术期死亡患者。1例患者lifestyle medicine发生术后胆瘘，保守治疗后缓解，围手术期无其他并发症发生。在随访期间，所有患者生活质量良好。结论 肝肠吻合联合胆管支撑管置入获悉更多术在治疗复杂肝门部胆管狭窄中具有一定应用价值。

驴乳营养价值高,含有丰富的不饱和脂肪酸、乳清蛋白和乳糖,化学成分与人乳接近,能够为人体提供足够的营养,能促进肠道益生菌的生长,参与新陈代谢,具有抗菌、抗病毒、免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、低过敏性等多种生物活性,是一种十分值得开发的宝贵资源。本研究主要以驴全乳为研究对象,对其抗炎特性进行研究,并对驴乳中酪蛋白糖巨肽的分离条件进行优化,最后对驴乳酪蛋白糖巨肽的抗炎特性进行研究,主要研究结果如下:1.测定在脂多糖诱导作用下细胞产生炎症,并测定炎症前后细胞的细胞活力表明,当LPS作用量为10μg/m L时细胞存活率(67.22%)相比对照组显著降低(P<0.05),地塞米松作为阳性对照,作用量为50μg/m L时细胞存活率达80.32%,相对于脂多糖组细胞活力显著增加(P<0.05);经过细胞毒性试验说明驴全乳本身未对巨噬细胞RAW264.7产生毒性。细胞由圆润状态出现伪足且体积变大,同时脂多糖组NO释放量较对照组显著增加(P<0.01)到5.81±0.28μmol/L,经地塞米松预保护后,相对于脂多糖组NO释放量显著降低(P<0.01)到1.75±0.14μmol/L,表明炎症模型构建成功。2.检测炎症相关因子含量变化发现,在经脂多糖诱导RAW264.7细胞产生炎症后,TNF-α含量达645.89 pg/m L,相较对照组541.96 pg/m L显著增加(P<0.01),IL-6含量为123.33 pg/m L,相较对照组78.22pg/m L也显著增加(P<0.01),经驴乳和牛乳治疗后,两者含量都随着乳作用浓度的增加而减少;脂多糖组IL-10含量相对于对照组的468.91 pg/m L显著减少(P<0.01)到361.25pg/m L,经驴乳和牛乳治疗后其含量显著增加(P<0.01);经脂多糖诱导后炎症细胞NO释放量相对于对照组1.09μmol/L显著增加(P<0.01)到5.81μmol/L,地塞米松组相对于脂多糖组显著降低(P<0.01)至1.74μmol/L,经驴乳和牛乳治疗后也显著降低(P<0.01),在同等剂量作用下,驴乳组要比牛乳组NO释放量降低程度更大。相关炎症指标测定结果都表现出驴乳的抗炎效果要优于牛乳,表明驴乳对炎症细胞有更加明显的保护作用。3.测定驴乳作用前后炎症细胞的凋亡率结果显示,空白对照组细胞凋亡率为3.20%,脂多糖组为13.00%,地塞米松组3.80%,当驴乳作用浓度分别为200、400、800μg/m L时,细胞Bafilomycin A1分子式凋亡率分别为4.60%、5.10%、5.90%,同样浓度的牛乳作用下凋亡率为6.20%、7.40%、8.50%,可以看出细胞凋亡率随着驴乳和牛乳作用浓度的升高而增加,而且驴乳治疗后整体比例要低于牛乳组,说明在相同作用浓度下,驴乳对细胞炎症的治疗作用要比牛乳好。4.通过以上研究发现驴乳是具有抗炎特性的,随即对驴乳中酪蛋白糖巨肽进行分离,采用响应面法优化驴乳酪蛋白糖巨肽的分离条件,最佳条件参数为:酶液添加量0.29%,酶解时间4.14 h,离心时间9.49 min,对应糖巨肽纯度可高达47.21%。并测定炎症因子TNF-α和IL-6含量相对于脂多糖组显著降低(P<0.01),而且两者含量都随着糖巨肽作用浓度的增加而减少。经糖巨肽治疗后IL-10含量显著增加(P<0.01),细胞凋亡率随着糖巨肽作用浓度的升高而降低,说明在糖巨肽对细胞炎症具有一定的治疗作用,且高浓度糖巨肽抗炎要比低浓度好。本文利用体外更多构建巨噬细胞RAW264.7炎症模型,对驴全乳的抗炎特Blood Samples性进行研究,将驴乳中的酪蛋白糖巨肽的分离条件进行优化,研究发现驴乳及驴乳中酪蛋白糖巨肽具有抗炎作用,这为研究驴乳及其成分的抗炎机制提供理论依据,作为开发富含驴乳酪蛋白糖巨肽产品的基础,为驴乳制品的研究提供新思路。

目的 探讨丹皮酚基于Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Kelch-likeECH-associatedprotein1，Keap1）/核因子E2相关因子（nuclearfactorerythroid2-relatedfactor2，Nrf2）/抗氧化反应元件（antioxidantresponse，ARE）信号通路改善乙醇刺激所致小鼠肝脑炎症和氧化应激损伤的作用机制。方法 C57BL/6小鼠随机分为空白组，模型组，水飞蓟宾组（36.8mg/kg），丹皮酚高、中、低（480、240、120mg/kg）剂量组，每组15只；适应期所有组小鼠自由饮用Liber-DeCarli对照液体饲料，模型复制期空白组小鼠自由饮用Lieber-DeCarli对照液体饲料，其他组小鼠自由饮用Lieber-DeCarli乙醇液体饲料并连续灌胃给相对应的药10d；测定小鼠血脂[三酰甘油（triglyceride，TG）、总Immunohistochemistry胆固醇（telecine，TC）]、肝功能[谷丙转氨酶（alaninetransaminase，ALT）、天门冬氨酸转氨酶（aspartateTransaminase，AST）]、炎症因子[白细胞介素（interleukin，IL）-6、IL-1α、IL-1β、肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactor，TNF）-α）]以及氧化应激指标[过氧化氢酶（catalase，CAT）、还原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）]水平selleckchem Wnt-C59；采用苏木精-伊红染色法、油红O染色观察各组小鼠肝、脑组织病理形态变化；采用Westernblot、免疫荧光法以及RT-PCR检测小鼠肝、脑组织Keap1/Nrf2/ARE信号通路相关蛋白及mRNA的表达水平。结果 与模型组比较，丹皮酚高剂量组小鼠体质量显著增加（P＜0.05），血脂（TG、TC）、肝功能（ALT、AST）、炎症因子（IL-6、IL-1α、IL-1β、TNF-α）、氧化应激指标（CAT、GSH、SOD）水平显著升高（P＜0.05），MDA含量显著降低（P＜0.05）；小鼠肝、脑组织Nrf2、血红氧素合酶-1（hemeoxygenase-1，HO-1）、醌NADH脱氢酶1[NAD（P）Hquinoneoxidoreduct获悉更多ase1，NQO1]、谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基（glutamate-cysteineligasecatalyticsubunit，GCLC）蛋白及mRNA表达水平显著升高（P＜0.05），Keap1蛋白及mRNA表达水平显著降低（P＜0.05）；丹皮酚高剂量组小鼠肝、脑病理状态明显改善。结论 丹皮酚能显著减轻乙醇诱导的小鼠肝脑炎症和氧化应激损伤，其机制可能是通过调控Keap1/Nrf2/ARE信号通路实现的。

β-淀粉样蛋白(Aβ),主要是具有42个氨基酸的Aβ(Aβ42),在大脑内的聚集和沉积是阿尔茨海默氏病(Alzheimer’s disease,AD)发病机理中的一个关键因素。目前临床上治疗AD的药物或技术只能缓解症状或疗效存在争议。因此,寻找到安全、有效的预防和治疗药物或技术成为了当务之急。早已证明,脑内的部分Aβ可通过多种途径转运至外周系统并被清除。因此,增加外周血液中Aβ的清除率,减少其在血液中的水平来降低其在脑内的沉积可能是治疗AD的一个途径。Aβ42聚集体,特别是Aβ42寡聚体,不仅损害神经细胞的功能,它们还以可溶状态或沉积在血管壁上损伤血管内皮细胞,进一步加重AD的病理。因此,减少或消除Aβ42聚集体对血管内皮细胞的影响也会成为预防和治疗AD的一个重要目标。纳豆激酶(Nattokinase,NK)(EC 3.4.21.62)是一种天然的蛋白水解酶,其安全性和溶栓作用已被广泛研究并已得到充分肯定。最近有研究提出,NK在生理条件下可能会缓慢降解Aβ42,显示了NK在预防或治疗与Aβ42相关疾病如AD中可能会发挥一定的作用。然而,有关NK在靶向结合和降解不同形式的Aβ42,尤其是Aβ42聚集体(具有神经毒性的Aβ42形式),以及降低和清除血液中甚至脑中Aβ42负荷等方面的研究目前还非常有限。鉴于目前尚无安全、有效的预防和治疗AD方法,系统开展NK对不同形式Aβ42聚集体的降解作用并揭示其对预防和治疗AD的生理意义的研究是非常有必要的。本论文在分子、细胞和动物水平上系统地研究了NK对Aβ42及其多种聚集体的靶向结合与降解作用、NK催化的Aβ42聚集体的降解对血管内皮细胞的保护作用,以及NK对血液和脑内Aβ水平或斑块负载的影响,旨在促进预防、治疗与Aβ42聚集体相关疾病如AD的药物的研究与开发。通过本论文的研究,取得如下主要的结果:1.NK在一定时间内捕获不同形式Aβ42(单体、寡聚体、纤维)的能力不同,其中对Aβ42寡聚体的捕获能力最强。进一步分析发现,NK与不同形式的Aβ42(单体、寡聚体、纤维)的结合既可能是非催化性的,也可能是催化性的。2.我们应用系列Aβ肽及其聚集体等为底物,测定NK的底物结合特异性。结果表明,NK对Aβ42或Aβ40及其聚集体的结合特异性最高,远高于C-端截短的Aβ肽如Aβ35(包括其聚集体),而且几乎不与Aβ28、Aβ9结合。由此推断,Aβ42/Aβ40的C-端区Gly29至Val40氨基酸残基肽段很可能是NK的特异性靶向的重要区域,而由该区域形成的特定整合构象应该是NK识别和结合的最有效的靶点。3.在确定了NK对Aβ42聚集体具有较高的结合效率的基础上,我们分析了NK与Aβ42单体、Aβ42寡聚体和Aβ42纤维孵育后底物的降解率与产物体系。结果表明:NK主要催化Aβ42的聚集体形式,而且NK降解Aβ42寡聚体的能力高于其降解Aβ42纤维的能力,同时得出,相比于较大的Aβ42聚集体,较小的Aβ42聚集体与NK相互作用可能更符合NK催化的要求,Aβ42链间特定的整合构象是NK对其发挥催化作用的结构基础,而这种整合构象更多地存在于Aβ42寡聚体中而非Aβ42纤维中,Aβ42单体中不存在。另一方面,NK对Aβ42或其聚集体的降解分别产生了亲水性N-端片段和疏水性C-端片段。这些亲水性的Aβ片段可能是具有28至35个氨基酸残基且总体呈亲水性的Aβ肽,而疏水性的Aβ片段可能主要与其它Aβ42链的C-端区聚集形成不完整的Aβ42聚集体或就地留在了剩余的底物Aβ42聚集体中。4.为了确定NK催化Aβ42聚集体中的链的裂解是否影响Aβ42聚集体的结构(构象)稳定性,我们测定了NK与三种不同形式Aβ42形式(单体、寡聚体、纤维)孵育过程中Aβ42的聚集程度。结果表明:NK催化的Aβ42聚集体的降解明显减缓或降低了Aβ42或其小聚集体的(进一步)聚集,并可能同时引起不完整的Aβ42聚集体的拆分(或解聚)。5.应用血管内皮细胞测定了NK催化的Aβ42聚集体的降解对细胞存活率和损伤率的影响。结果表明:Aβ42寡聚体和Aβ42纤维可剂量依赖地引起血管内皮细胞活力的下降,且等剂量的Aβ42寡聚体和Aβ42纤维对血管内皮细胞活力的负面影响程度相似,但NK催化Aβ42聚集体降解后显著减少甚至消除了Aβ42聚集体对血管内皮细胞活力(或存活)的不利影响。细胞损伤率的测定结果表明,Aβ42寡聚体和Aβ42纤维均可诱导血管内皮细胞的损伤或死亡,而NK的存在明显减轻了Aβ42聚集体对血管内皮细胞的损伤作用。由此得出,NK可通过催Undetectable genetic causes化Aβ42聚集体降解对血管内皮细胞的活性或存活率起到保护作用。6.我们分别通过细胞的划痕愈合和transwell迁移实验分析了Aβ42聚集体对HUVECs横向和径向迁移的影响。在划痕愈合实验(横向迁移)中,Aβ42寡聚体和Aβ42纤维均可引起HUVECs划痕融合的延迟,显示出对HUVECs迁移能力损伤作用,其中Aβ42纤维对靶细胞迁移的影响较Aβ42寡聚体更显著。然而,NK明显提高了靶细胞的迁移率。所以,NK催化的Aβ42聚集体,尤其是Aβ42纤维的降解,对血管内皮细胞的横向迁移能力有明显的保护作用。另一方面,transwell测定的细胞径向迁移结果表明,Aβ42聚集体几乎不影响靶细胞在三维空间是上的迁移能力,尽管NK的存在仍然有助于维持靶细胞的径向迁移。总之,Aβ42纤维比Aβ42寡聚体更能影响或阻碍血管内皮细胞的迁移能力,而NK的存在明显维护或保护了血管内皮细胞的迁移能力免受Aβ42聚集体,尤其是Aβ42纤维的影响。7.血管内皮细胞的致密性和屏障性能的调节还高度依赖于其黏附性。为此,我们分析了Aβ42聚集体对HUVECs黏附能力的影响。结果表明:Aβ42寡聚体和Aβ42纤维均可降低靶细胞的黏附率,而且Aβ42寡聚体比Aβ42纤维的损害作用更大。NK对Aβ42寡聚体和Aβ42纤维的降解显BIBW2992著减轻了这些Aβ42聚集体对靶细胞黏附率的影响,甚至可使因轻微受损Lorlatinib半抑制浓度而活性脱附的靶细胞的黏附能力(即再黏附率)得到一定的恢复。为了确定Aβ42聚集体对血管内皮细胞黏附率的影响是否与VE-cadherin有关,我们进一步分析了相应条件下HUVECs的VE-cadherin水平。结果表明,Aβ42聚集体均显著降低了HUVECs的VE-cadherin表达水平,NK对Aβ42聚集体的催化降解可在一定程度上减少Aβ42聚集体对VE-cadherin表达水平的影响,从而使细胞与细胞之间的黏附得以维持。进一步分析得出:Aβ42聚集体对VE-cadherin表达水平的影响可能是它们影响血管内皮细胞的黏附能力的部分机理。8.我们通过动物实验研究了NK对血液和脑内Aβ水平或斑块负载的影响。体外实验的结果表明:NK浓度依赖地降低了血清中Aβ的水平。进一步的体内实验结果证明,虽然NK会在被摄取和/或进入血液过程有部分丢失(被降解),但仍有少部分NK进入血液系统,并显示出良好的降解Aβ的作用。除此之外,本论文分析了AD小鼠大脑海马区细胞的(群体)形态和Aβ斑块的负荷。结果表明:虽然NK对小鼠大脑海马区细胞的(群体)形态影响不明显,但Aβ斑块的负荷有所减少。这说明,NK通过降低外周Aβ的水平可能在一定程度上间接促进了脑内Aβ的外流,从而可在一定程度上减轻大脑海马区的病理学改变。综合以上研究结果,我们得出:NK可降解Aβ42聚集体,阻抑Aβ42聚集体对血管内皮细胞多方面的损伤,进入体内后可有效降低血液中Aβ的水平,并可在一定程度上减少脑内Aβ斑块的负荷。本论文的研究结果为NK在预防和治疗AD的可行性提供了实验依据和一定的理论指导。

研究目的:本研究旨在探讨青蒿素(Artemisinin,ARS)是否可以缓解三甲基氯化锡(Trimethyltin chlorid,TMT)诱导的神经毒性以及PK2/PKRs相关信号通路在其中是否发挥一定作用。研究方法:将60只雄性Balb/c小鼠分为Con组、TMT组、TMT+ARS组、ARS组。TMT组小鼠一次性注射TMT,药物组腹腔注射4周的ARS。采用免疫组化评估PK2相关蛋白在小鼠海马中的表达情况。采用网络药理学预测ARS治Whole Genome Sequencing疗TMT所致的神经损伤的潜在机制。使用行为学评分对小鼠的神经行为进行相关评价。HE、Nissl及电镜评价海马组织病理损伤情况。Western Blotting检测PSD95、SYN1、Synaptophysin、NF-κB p65、TNF-α、PK2、PKR1、PKR2的表达情况。研究结果:免疫组化结果显示,与Con组相比,TMT组小鼠海马CA2和CA3区的PK2和PKR2蛋白表达升高,PKR1蛋白无明显改变;网络药理学结果表明BLZ945抑制剂PK2可与ARS、中枢神经损伤及TMT的交集靶点相互作用;行为学评分显示,与Con组相比,TMT组小鼠癫痫评分和中毒症状评分显著升高,而给ARS之后行为学评分明显降低;HE和Nissl染色结果显示,与Con组相比,TMT组小鼠海马CA3和DG区神经元出现嗜酸性细胞质、细胞核深染和核溶解,与TMT组相比,TMT+ARS组小鼠海马神经元损伤程度减轻;电镜结果显示,与Con组相比,TMT组小鼠海马神经元线粒体出现肿胀空泡,粗面内质网出现脱颗粒,给ARS之后上述现象明显逆转;Western Blotting结果显示,TMT组PSD95、SYN1和Synaptophysin蛋白表达比Con组明显降低,TNF-α、NF-κB p65、PK2和PKR2蛋白表达比Con组显著升高,而PKR1蛋白表达无明显改变,与TMT组相比,TMT+ARS组PSD95、SYN1和Synaptophysin蛋白表达明显升高,TNF-α、NF-κB p65、PK2和PKR2蛋白表达显著下降,PKR1蛋白无明显改变。研究结论:TMT会导致小鼠海马CA2和CA3区的PK2和PKR2蛋白表达增加;ARS改善TMT引起的小鼠海马超3-MA核磁微结构异常,缓解海马神经元损伤;ARS主要通过调节NF-κB-PK2/PKRs相关炎症通路来缓解TMT所致的神经损伤。

目的 评估不同来源标本幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)耐药基因检测的准确性及精准用药后的治疗效果。方法 411例患者利用~(13)C/~(14)C及多重qPCR技术检测H.pylori及耐药基因，Kappa检验评估试剂盒检测胃黏膜、粪便及唾液等结果与~(13)C/~(14)C检测结果的一致性，统计H.pylori检出率、耐药率。其中试剂盒检测141例H.pylori阳性者为精准治疗组；同时期200例~(13)C/~(14)C检测H.pylori阳性者为传统治疗组，分别统计H.pylori清除率。结果 胃黏膜的阳性检出率(34.3%)最高，接近~(13)C/~(14)C的阳性检出率(37.2%),其次是粪便(28.Laduviglusib化学结构7%),检出率最低是唾液(9.2%)。胃黏膜与~(13)C/~(14)C检测一致性最好(Kappa=0.962,P<0.001),粪便与~(13)C/~(14)C检测一致性较好(Kappa=0.874,P<0.001);唾液与~(13)C/~(14)C检测一致性差(Kappa=-0.010,P=0.662)。胃黏膜检测141例H.pylori阳性者有64例耐药，总耐药率为45.4%。甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林及左氧氟沙星耐药率分别为23.4%、37.6%、2.1%及39.7%。唾液检测38例H.pylori阳性者有9例耐药，总耐药率为23.7%。甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林及左氧氟沙星耐药率分别为13.2%、23.7%、0及18.4%。粪便检测118例H.pylori阳性者有37例耐药，总耐药率为31.4%。甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林及左氧氟沙星耐药率分别为13.6%、20.3%、0.8%及24.6%。精准治疗组清除率优于传统治疗组(P<0.001)。结论 基于多重qPCR技术的试剂盒可以用来检测H.pylori及其耐药Thyroid toxicosis基因。其中胃黏膜和粪便H.pylori检出率较高，可以作为临床检测H.pAG-221供应商ylori及其耐药基因的合适样本，从而指导临床用药达到精准治疗。

旨在探究体外培养条件下番茄红素对小鼠原始卵泡激活的作用及机制。分离出生后3 d的ICR小鼠卵巢并对其在体外连续培养4 d,在培养过程中添加不同浓度番茄红素0(对照组)、5、50和500μmol/L,通过HE染色分析不同浓度番茄红素对小鼠原始卵泡发育的影响，通过Wnt-C59说明书过碘酸-希夫(periodic acid Schiff, PAS)染色及TUNEL染色检测卵泡闭锁及细胞凋亡情况，通过增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)染色检测颗粒细胞增殖情况，应用ELISA检测卵巢中活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平，通过Real-time PCR检测部分凋亡及抗氧化基因表达，并通过Western blot检测卵泡激活关键信号通路PI3K-AKT中部分成员蛋白的表达。结果显示，与对照组相比，500μmol/L番茄红素浓度培养条件下原始、过渡态、初级及次级卵泡数量均显著升高(P<0Cartilage bioengineering.05),而退化卵泡及凋亡细胞数量显著减少(P<0.05),处于增殖状态的颗粒细胞数量显著增多(P<0.05);与对照组相比，500μmol/L处理组中ROS水平明显降低(P<0.05),部分抗凋亡基因及抗氧化基因，包括Bcl-2、Xiap、Apaf-1、Cat、Prdx1、Gpx1的表达显著升高(P<0.05),而促凋亡基因Bax、Caspase-3、Caspase-8的表达显著下调(P<0.05);500μmol/L处理组中PTEN、AKT和FOXO3A蛋白的表达水平与对照相比明显下调(P<0.05),而磷酸化AKT及磷酸化FOXO3A蛋RP56976体内白的表达水平显著上调(P<0.05)。综上所述，500μmol/L番茄红素可能通过增强细胞的抗氧化性和调控PI3K-AKT通路部分蛋白的表达促进原始卵泡的存活和激活。本试验为深入探讨番茄红素调控原始卵泡发育的分子机制提供了一定的试验数据，并为原始卵泡发育障碍引发的相关不孕症的治疗提供了新的思路。

目的：观察电针干预对帕金urine microbiome森（PD）模型小鼠行为学、结肠及中脑黑质部相关氧化应激因子的影响，探讨电针治疗帕金森病的作用机制。方法：将C57 BL/6小鼠随机分为空白组、模型组及电针组，每组12只。采用鱼藤酮连续灌胃4周构建PD小鼠模型。针刺组于造模成功后电针刺激“百会”“曲池”“足三里”，疏密波，频率2 Hz/15 Hz，强度1 mA，20 min/次，1次/d，针刺5 d，休息2 d循环，共治疗14 d。干预结束后采用步态分析实验评估各组小鼠运动能力及运动协调性；肠推进率评估各组小鼠肠道传输功能；流式细胞术检测小鼠结肠活性氧（ROS）水平；ELISA法检测各组小鼠结肠及黑质中总蛋白（TP）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量；采用免疫荧光染色检测小鼠黑质核因子E2相关因子2（Nrf2）蛋白表达水平。结果：与空白组比较，模型组小鼠平均速度、步率、正常步序比此网站、前后足间距离、四足的步幅长度、摆动速度、最大接触面积的最大强度降低（P<0.000 1，P<0.01，P<0.05，P<0.001），最大变化率升高（P<0.001），肠推进率降低（P<0.000 1），结肠中ROS荧光强度升高（P<0.01），结肠及脑黑质中GSH-Px、SOD水平降低（P<0.01，P<0.05），结肠及脑黑质中MDA含量升高（P<0.01），脑黑质中Nrf2阳性表达降低（P<0.000 1）。与模型组比较，电针组小鼠平均速度、步率、正常步序比、前后足间距离、四足步幅长度、摆动速度、最大接触面积的最大强度升高（P<0.01，P<0.05，P<0.001，P<0.000 1），最大变化率降低（P<0.01），小鼠肠推进率升高（P<0.001），结肠中ROS荧光强度降低（P<0.01），结肠及脑黑质中GSH-Px、SOD水平升高GSK J4 IC50（P<0.05），结肠及脑黑质中MDA含量降低（P<0.01），脑黑质中Nrf2阳性表达升高（P<0.000 1）。结论：电针疗法可改善PD模型小鼠的运动障碍、步态紊乱及肠道运动功能，保护多巴胺能神经元免受损害，其机制可能与电针可拮抗脑肠氧化应激有关。

目的 探讨伴非自杀性自伤(NSSI)行为的抑郁障碍患者血清炎性细胞因子水平，并分析炎性细胞因子水平与患者冲动特质的相关性。方法 选择40例伴NSSI行为的抑郁障碍患者(NSSI组)、45例不伴NSSI行为的抑郁障碍患者(非NSSI组)、40例正常对照者(正常对照组)入组；采用酶联免疫吸附实验(ELASA)检测被试血清白细胞购买LEE011介素(IL)-2、IL-6、IL-10、IL-15、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平；采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)进行病情评估；采用Barratt冲动量表(BIS-11)对患者的冲动性进行评价。结果 NSSI组血清IL-2、IL-6、IL-10、此网站IL-15、TNF-α水平较非NSSI组和正常对照组明显升高，差异有统计学意义(P<0.01);NSSI组BIS-11运动因子得分、缺少计划因子得分和总分高于非NSSI组，差异有统计学意义(P<0.01); NSSI组血清IL-2、IL-6、IL-10、IL-15、TNF-α水平与BIS-11运动因子得分、缺少计划因子得分和总分呈正相关(P<0.01)。结论 伴NSSI行为的抑郁障碍患者炎性细胞因子水平明显升高，患者具有更明Mediation effect显的冲动性人格特征，炎性细胞因子水平与患者冲动性呈正相关。

验证PI3K/AKT信号通路抑制的有效性，分析Aquatic biologyPI3K/AKT信号通路对冷却滩羊肉贮藏期间细胞凋亡途Laduviglusib体外径的影响。以滩羊后腿肉为研究对象，采用10 μmol/L PI3K抑制剂LY294002溶液对滩羊肉进行注射处理，4℃条件下分别贮藏0 d、2 d、4 d、6 d、8 d，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-Polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）和蛋白质免疫印迹（Western blottiing，WB）分析PI3K、AKT蛋白的表达情况，以此验证PI3K/AKT信号通路抑制的有效性，同时分析滩羊肉贮藏期间能量因子、氧化应激水平、线粒体损伤程度以及Caspase-3活性的变化，以探索PI3K/AKT信号通路对冷却滩羊肉贮藏期间细胞凋亡途径的诱导机制。结果表明：通过蛋白质免疫印迹法（WB）发现PI3K和AKT蛋白表达量均减少，验证了PI3K/AKT信号通路被抑制的有效性；与对照组相比，LY294002处理组线粒体ATP、糖原含量、琥珀酸脱氢酶（SDH）和柠檬酸合成酶（CS）活性显著下降（P < 0.05）；线粒体ROS逐渐增多，氧化应激水平和MPTP开放程度增加；膜电位显著下降（P < 0.05）；凋亡因子Caspase-3活性极显著高于对照组（P < 0.01），表明PI3K/AKT信号通路通过促进RCB-839浓度OS产生并与PI3K相互作用，介导了下游Caspase-3的活化，使线粒体结构与功能受损，导致MPTP开放、膜电位降低，进而诱发细胞凋亡。