S6 kinase 信号通路

目的 探讨血清肝素结合蛋白(HBP)与老年维持性血液透析(MHD)患者导管感染的关系Entinostat及其应用价值。方法 行MHD治疗的199例老年患者根据研究期间是否存在导管感染分为感染组(n=41)和非感染组(n=158)。收集两组一般临床资料和实验室检查指标，检测C反应蛋白(CRP)、降钙素原(selleck AZD6738PCT)和HBP水平。利用受试者工作特征(ROC)曲线明确各指标对导管感染及感染病原菌的鉴别价值。结果 41例发生血液透析导管感染，包括17例隧道感染和24例导管相关血源感染。分泌物或血培养36例，阴性5例。36例微生物培养阳性患者包括革兰阳性菌21例，革兰阴性菌15例。同非Symbiont interaction感染组相比，感染组合并糖尿病比例显著升高，透析龄更短，且白细胞计数、PCT、CRP及HBP水平显著升高(均P<0.001)。HBP对老年MHD患者导管感染进行辅助诊断的诊断效能最大，鉴别的特异性高达94.32%。革兰阴性菌组血清PCT和HBP水平显著高于革兰阳性菌组(均P<0.01)。HBP鉴别老年MHD导管感染患者为革兰阴性菌的曲线下面积为0.84,敏感性和特异性分别为80.04%和84.99%。结论 血清HBP水平对老年MHD患者导管感染具有一定的诊断效能，且对革兰阴性菌感染具有一定的参考价值。

目的 探究蜜蜂蛰咬后外周血细胞参数的变化，评价其对预测器官损伤的价值。方法 选取2寻找更多019年7月至2021年8月在该院急诊科收治的233例蜜蜂蛰咬患者。分别收集患者被蜜蜂蛰咬6 h内外周血细胞参数、临床病理诊断，以及预后情况。使用统计学方法对患者临床实验资料进行分析。结果 在收集的233例患者中，有22例(9.4%)发生器官损伤。与无Liproxstatin-1 MW器官损伤的患者相比，蜜蜂蛰咬后出现器官损伤Oncologic safety患者白细胞计数、中性粒细胞与淋巴细胞比值、血小板与淋巴细胞比值(PLR)和系统免疫炎症指数(SII)均有所升高，淋巴细胞减少(均P<0.05)。经过Logistic回归分析显示，PLR升高为蜜蜂蛰咬后出现器官损伤的独立危险因素(P<0.05)。经过受试者工作特征曲线分析，PLR预测蜜蜂蛰咬后出现器官损伤的灵敏度为77.3%,特异度为86.3%,阳性预测值为37.0%,阴性预测值为97.3%。结论 PLR是蜜蜂蛰咬后出现器官损伤的独立危险因素。蜜蜂蛰咬后PLR较高的患者需要进行积极护理和干预。

为探究魔芋葡甘STM2457聚糖（Konjac gluconnan,KGM）对结肠上皮细胞基因组稳定性的影响，以正常结肠细胞株NCM460和结肠癌细胞株SW620、HCT116为研究材料，用质量浓度为0、0.625、1.25、2.5、5、10、20、40 mg/mL的KGM处理受试细胞24、48、72 h，以四氮唑蓝（MTT）法检测细胞活力；并以CBMN-Cyt实验检测质量Entinostat体外浓度分别为5、20、30 mg/mL的KGM处理72 h后受试细胞的基因组不稳定性（Genome instability,GIN）、核分裂指数（nuclear division index,NDI）及凋亡水平。结果显示，不同质量浓度KGM作用72 h后，在5～Zemstvo medicine40 mg/mL范围内NCM460细胞活力显著上升（P<0.05），其GIN在KGM质量浓度为5 mg/mL时极显著降低（P<0.001），而30 mg/mL时则极显著升高（P<0.01）;5～40 mg/mL的KGM显著抑制HCT116细胞的活力（P<0.05），在40 mg/mL时SW620细胞活力极显著被抑制（P<0.01），且在KGM质量浓度为5～30 mg/mL时，SW620和HCT116这2株细胞的GIN和细胞凋亡率均显著增加（P<0.001）,NDI显著降低（P<0.05）。结果表明，低质量浓度（5 mg/mL）的KGM有利于维护正常结肠上皮细胞NCM460的基因组稳定性，各质量浓度（5～30 mg/mL）的KGM都会增加结肠癌细胞SW620和HCT116 GIN的凋亡发生率，这可能是其维护肠道健康的分子基础。

目的 探讨降钙素原（PCT）、肝素结合蛋白（HBP）、血清淀粉酶样蛋白A(SAA)，检测对病毒性肺炎患者继发细菌感染的诊断价值。方法 选取2022年1月至2023年4月牡丹江医学院附属红旗医院、康安医院住院的肺部感染患者93例，将以上患者按临床表现及实验室检测分为细菌感染组30例，混合感染组34例（病毒感染继发细菌感染患者），病毒感染组29例。比较三组患者一般www.selleck.cn/products/cb-839资料、血清因子水平、不同感染类型血清因子水平及各项检测方法诊断价值。结果 三组患者性别、年龄、体重指数（BMI）、急性生理与慢All-in-one bioassay性健康评分系统（APACHEⅡ）评分比较，差异无统计学意义（P> 0.05）；混合感染患者血清PCT、HBP、SAA水平均高于细菌感染及病毒感染患者，差异有统计学意义（P <0.05）。细菌感染组及混合感染组PCRapamycin分子式T、HBP在血清中水平均显著高于病毒感染组，差异有统计学意义（P <0.05）；而病毒感染组SAA在血清中水平高于细菌感染组，差异有统计学意义（P <0.05）;SAA对于混合感染组患者的特异度及敏感度均较高，其次，PCT及HBP均具有较高的灵敏度及特异度，其中PCT预测价值更高，差异有统计学意义（P <0.05）。结论血清PCT、HBP、SAA在肺部感染性疾病中均具有一定诊断价值，可为临床诊断及治疗提供参考依据。

目的 探讨血小板与淋巴细胞比值（PLR）、中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）、癌胚抗原（CEA）selleck NMR与直肠癌患者预后的关系。方法 选取60例直肠癌患者，随访3年，记录患者的预后情况。比较不同预后直肠癌患者PLR、NLR、CEA水平；直肠癌患者预后的影响因素采用多因素Logistic回Drug Discovery and Development归分析。结果 随访3年，60例直肠癌患者生存32例，死亡28例。死亡直肠癌患者血清PLR、NLR、CEA水平均明显高于生存患者，差异均有统计学意义（P﹤0.01）。单因素分析结果显示，TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期、分化程度为低分化、有淋巴结转移和有远处转移的直肠癌患者的生存率分别低于TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期、分化程度为中高分化、无淋巴结转移以及无远处转移的患者，差异均有统计学意义（P﹤0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示，TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期、分化程度为低分化、有淋巴GSK126结转移、有远处转移、PLR升高、NLR升高、CEA升高均为直肠癌患者预后的独立危险因素（P﹤0.05）。结论 外周血PLR、NLR以及CEA水平升高表明直肠癌患者死亡风险增加，临床工作中可通过联合检测上述指标为临床干预方案的制订提供指导依据，从而改善预后。

目的:探讨甲状旁腺常规超声、声触诊组织量化成像(VTIQ)、超声造影(CEUS)参数及临床指标评估继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT)严重程度的价值。方法:收集2020年10月—2022年12月于石河子大学第一附属医院血透中心行血液透析治疗的76例慢性肾脏病SHPT患者资料,根据i PTH水平分为轻度组(i PTH 300～800 pg/m L)和重度组(i PTH≥800 pg/m L),所有患者均行常规超声及VTIQ检查,21例患者行CEUS检查。分析比较两组间常规超声selleckchem BAY 73-4506特征(位置、数目、形态、大小、血供等)、VTIQ参数(SWVmax、SWVmin、SWVmean、SWVratio)及临床指标(透析龄、Ca、P、ALP、血清白蛋白以及SCr等)的差异,筛选出组间差异有统计学意义的变量,依此建立Logistic回归预测模型,评价该模型预测SHPT严重程度的价值;同时对CEUS特征及定量参数(AT、TTP、MTT、AMP、PI等)与SHPT患者i PTH间的关系进行分析研究。结果:(1)SHPT患者透析龄、P、ALP、校正Ca×P以及甲状旁腺病灶平均体积、血供得分、平均SWVmax和平均SWVmean在轻度组和重度组间差异具有统计学意义(均P<0.05);(2)血供得分(OR:2.441;95%CI:1.162～5.130)、human microbiome平均SWVmean(OR:0.007;95%CI:0.000～0.639)、透析龄(OR:1.182;95%CI:1.046～1.335)、P(OR:0.204;95%CI:1.313～10.260)以及校正Ca×P(OR:5.483;95%CI:1.306～23.061)是影响SHPT患者i PTH水平的独立影响因素(均P<0.05);(3)Logistic回归方程如下:Logit(P)=-34.885+0.893×血供得分-4.962×平均SWVmean+0.167×透析龄+8.686×P+1.702×校正Ca×P,以-5.97为截断值时,模型预测SHPT严重程度的曲线下面积AUC(95%CI)、敏感度、特异度以及准确度分别为0.964(0.895～0.993)、85.37%、97.14%、90.79%,阳性预测值及阴性预测值分别为85.00%、97.22%,血供得分、平均SWVmean、透析龄、P以及校正Ca×P预测SHPT病情严重程度的AUC(95%CI)分别为:0.826(0.722～0.904)、0.565(0.446～0.679)、0.851(0.751～0.922)、0.773(0.662～0.861)、0.824(0.719～0.902),模型预测SHPT严重程度的效能明显高于各单因素(Z=3.149、5.967、3.073、3.726、3.084,均P<0.05),经检验,此模型预测SHPT病情严重程度结果与临床评估结果有良好一致性(Kappa值=0.817,P=0.000);(4)不同i PTH水平的甲状旁腺CEUS特征(早期增强模式、晚期增强模式、增强方向以及造影剂消退方式)差异有统计学意义(均P<0.05),甲状旁腺病灶在CEUS增强早期以及增强晚期多以弥漫性等增强为主,与周围甲状腺组织呈同步消退;(5)甲状旁腺病灶CEUS定量参数PI、AMP与i PTH水平呈正相关(r=0.686、0.757,均P=0.000),TTP与i PTH水平呈负向相关(r=-0.420,P=Tezacaftor小鼠0.004),AMP值与i PTH关联最显著,TTP次之,标准化回归系数分别为0.647、-0.243(均P<0.05)。结论:超声特征及临床指标可预测继发性甲状旁腺功能亢进严重程度;联合预测模型对评估继发性甲状旁腺功能亢进病情进展有重要价值。

荔枝(LitchNSC 125973分子量i chinesis)起源于中国,是我国亚热带区种植面积最大的水果经济作物。同荔枝霜疫霉(Perornophythora litchii)引致的荔枝霜霉疫病是荔枝生产上危害最严重的病害,主要造成荔枝大量落花落果,使荔枝产量大幅减少、品质interface hepatitis大幅下降,是荔枝产业健康发展的一个制约因素。YPK1是真核生物中一类高度保守的具有激酶结构域的AGC型丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(protein kinase),起磷酸化蛋白的作用。蛋白磷酸化和去磷酸化是细胞信号传导调控的重要方式;蛋白磷酸化对真菌的生长发育、有性或无性生殖、致病力等生理过程起调控作用。本课题组从荔枝霜疫霉中,经同源比对,鉴定获得丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶PlYPK1,该基因在卵菌中保守存在。分析表明,PlYPK1在病原菌侵染后期(12～24 h)转录水平较菌丝阶段显著提高。进一步采用CP-456773溶解度CRISPR/Cas9基因编辑技术对PlYPK1基因进行敲除,并且对该基因的功能进行了分析。结果表明PlYPK1敲除突变体菌丝生长速率较野生型无明显差别。与荔枝霜疫霉野生型菌株相比,PlYPK1敲除突变体不产生孢囊梗,不产生孢子囊,不产生卵孢子,致病力显著下降,表明PlYPK1在调控荔枝霜疫霉无性生殖、有性生殖以及致病力方面发挥重要作用。本研究发现了荔枝霜疫霉PlYPK1在病原菌无性生殖、有性生殖和致病过程中发挥关键作用,这为进一步探究荔枝霜疫霉PlYPK1蛋白调控途径及其病害防控提供了新的理论基础和靶标基因。

研究背景乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,占全球新发女性癌症病例的24%以上,约占癌症相关死亡病例的15%。尽管诊断和治疗方法不断发展,但部分乳腺癌患者的预后仍不理想,特别是转移性乳腺癌患者的预后情况。既往研究报道,3%～10%的乳腺癌患者在首诊时即存在远处转移,这部分患者目前认为是不可治愈的,并且,在原发非转移性病例中,最终有25%的患者可出现远处转移。除此之外,先天性和获得性耐药以及肿瘤异质性等问题,也极大地限制了药物治疗的有效性,往往会导致治疗失败和肿瘤进展,缩短患者生存时间。因此,探究乳腺癌耐药转移的分子机制有助于寻找新的治疗策略,从而改善乳腺癌患者的预后。依据先前的一些研究报道,肿瘤治疗过程可以诱导细胞发生特异性程序性细胞死亡。在2012年,铁死亡做为一种新的程序性细胞死亡形式首次被发现。一经发现,便作为一种潜在的肿瘤治疗途径引起了广泛的关注。铁死亡的主要特征是铁依赖的脂质过氧化物积累,其在形态学、生物化学和遗传学上与传统的凋亡、自噬或坏死不同。此前,多种基因己被认定与铁死亡密切相关,这些基因统称为铁死亡相关基因(ferroptosis-related genes,FRGs),如谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、CDGSH铁硫结构域1(CISD1)和核因子E2相关因2(NRF2)等。虽然不同类型的肿瘤细胞对铁死亡的敏感性不同,但铁死亡在肿瘤进展和治疗中起着关键作用,在卵巢癌,肺癌和乳腺癌中研究发现,铁死亡诱导剂(erastin)和化疗药物的联合应用可以提高癌症的疗效。并且,铁死亡也与多种肿瘤的预后相关,有学者在胶质瘤、黑色素瘤和肾细胞癌中建立了铁死亡相关预后模型,进而探索铁死亡相关基因作为肿瘤预后标志物和治疗靶点的潜在价值。许多报道也显示铁死亡与乳腺癌有很强的相关性,这表明铁死亡有望成为乳腺癌的重要生物标志物。因此,建立乳腺癌铁死亡相关预测模型,进一步阐明铁死亡在乳腺癌中的作用机制,将有助于乳腺癌的预后预测和治疗疗效提高,从而进一步改善乳腺癌患者的预后情况。肿瘤免疫微环境通常包括存在于肿瘤周围的免疫细胞和免疫相关分子,这些细胞和分子在肿瘤间质间相互影响,对免疫治疗的反应发挥重要作用。近年来,免疫细胞和免疫分子与铁代谢的关系得到了广泛的关注。多种类型免疫细胞,包括Th1细胞、自然杀伤T细胞和巨噬细胞等,也被证明与铁代谢稳态的维持有关。有趣的是,肿瘤细胞中发生铁死亡,可将更多的肿瘤细胞表面抗原暴露于免疫细胞,这有助于提高免疫治疗的抗肿瘤疗效。然而,铁死亡在乳腺癌免疫治疗中的具体作用及机制尚未完全阐明。在本研究中,首先从GSE20685数据库中获得了乳腺癌患者的mRNA表达谱和临床数据,依此构建了乳腺癌铁死亡相关预后模型。接着,利用METABRIC数据库进一步对该模型进行验证。此外,本研究还通过ssGSEA和免疫浸润分析评估了肿瘤微环境中的免疫浸润特征。第二,基于多个数据库以及乳腺癌组织表达和预后分析,本研究选择了铁死亡相关基因热休克蛋白β-1(HSPB1)进行后续研究,深入探究了 HSPB1在乳腺癌及铁死亡中的作用及调控机制。功能实验证实,HSPB1对乳腺癌的发展及铁死亡起着至关重要的作用。最后,我们进一步揭示了 HSPB1在乳腺癌化疗耐药中的相关功能,发现其能够参与调控化疗诱导的铁死亡。我们的研究强调了铁死亡相关基因HSPB1是乳腺癌化疗耐药的一个新的调节因子,靶向HSPB1可能成为抑制乳腺癌进展和克服治疗耐药的新策略,这将有助于改善乳腺癌患者在接受个体化治疗时的临床获益情况。第一部分 乳腺癌铁死亡相关预后PF-03084014抑制剂预测模型的构建及免疫浸润分析研究目的1.基于铁死亡相关基因的表达情况对乳腺癌患者进行分组,并分析不同乳腺癌患者亚组间的基因表达差异、临床特点及预后情况。2.利用GEO数据库构建乳腺癌患者铁死亡相关预后预测模型,并通过METABRIC数据库进行验证。3.评价基于铁死亡相关基因构建的预后模型的预测价值,并构建nomogram模型。4.分析高风险组及低风险组乳腺癌患者的生存情况、免疫浸润情况、免疫治疗反应的差异。5.评估靶向铁死亡相关基因在乳腺癌治疗中的潜能。研究方法1.基于数据库及文献报道获得铁死亡相关基因,并从GSE20685数据库获得铁死亡相关基因的表达谱及乳腺癌患者的临床信息,利用NMF、t-SNE及PCA分析等对乳腺癌患者进行分组并验证,分析不同乳腺癌患者亚组间的基因表达情况、临床特点及预后情况。2.将GSE20685数据库视为训练集,并将METABRIC数据库视为验证集,利用COX单因素、Lasso及COX多因素回归分析等统计学方法,构建并验证乳腺癌患者铁死亡相关预后预测模型。通过Kaplan-Meier生存分析及ROC分析等评价此预后模型的预测价值。3.通过单因素及多因素COX回归分析,构建nomogram模型,并利用校准曲线、ROC及DCA分析等评价其临床价值。4.利用铁死亡相关预后预测模型将乳腺癌患者分为高风险及低风险两组,通过ESTIMATE、CIBERSORT及ssGSEA算法等分析高风险组和低风险组乳腺癌患者的免疫浸润情况,并通过SubMap分析评价两组患者的免疫治疗反应的差异。5.通过细胞功能实验,评估铁死亡诱导剂在乳腺癌进展中的作用,并通过CellMiner数据库下载获得药物z评分以及NCI-60癌细胞系的相应基因表达情况,从而寻找靶向铁死亡相关基因的潜在治疗药物。研究结果1.从GeneCards数据库、FerrDb数据库及其他相关文献中获得铁死亡相关基因信息,经过整合,纳入314个铁死亡相关基因,经过MAD筛选后,总共171个基因用于后续的亚组分析。NMF分析将乳腺癌患者分为两个亚组(组1和组2),并且t-SNF及PCA分析结果也证实了此分组的准确性。组2患者生存率明显低于组1患者,且两组间在铁死亡相关基因表达及临床特点方面存在较大差异。2.从GSE20685数据库中获得327例乳腺癌患者的铁死亡相关基因的RNA表达和临床信息作为训练集,以METABRIC数据库中的1904例乳腺癌患者的RNA表达和临床信息作为验证集。对GEO的数据进行COX单因素、Lasso及COX多因素回归分析,构建了包含9个铁死亡相关基因的预后预测模型。Kaplan-Meier生存分析结果显示,与低风险组乳腺癌患者相比,高风险组乳腺癌患者的总体生存率明显更低。ROC分析发现,所建立的预后模型在预测乳腺癌总体生存率方面具有显著的特异性和敏感性。利用METABRIC数据库作为验证集,证实了所构建的预后模型的预测效率。3.对9基因预后预测模型及乳腺癌患者临床特点进行单因素和多因素Cox回归分析,结果发现TNM分期和风险评分是乳腺癌总体生存率的独立预测因子,并据此构建了 nomogram模型。校准曲线、ROC及DCA分析等均证实了 nomogram模型的临床价值。4.ESTIMATE算法显示,高风险组乳腺癌患者肿瘤组织具有更高的肿瘤纯度和更低的免疫评分。CIBERSORT算法发现,高风险组乳腺癌患者具有较高的免疫抑制微环境。ssGSEA分析显示,高风险组乳腺癌患者肿瘤组织中的免疫细胞浸润比例普遍较低。SubMap分析发现,低风险组的乳腺癌患者可能在抗PD-1治疗中获益。5.细胞功能实验显示,铁死亡诱导剂可诱导ROS产生并抑制乳腺癌细胞增殖、活性、迁移及耐药性。数据库分析表明,靶向铁死亡相关基因可能在乳腺癌治疗中发挥重要的作用。研究结论1.利用铁死亡相关基因的表达谱,可以将乳腺癌患者分为两个亚组,两组间具有不同的铁死亡基因表达模式、TNM分期及预后情况。2.基于9个铁死亡相关基因的表达,构建了乳腺癌预后预测模型并进行了验证。3.9个铁死亡相关基因预后预测模型在预测乳腺癌患者总体生存率方面具有显著的特异性和敏感性。4.根据构建的预后预测模型,可将乳腺癌患者分为高风险和低风险组,两组间患者预后情况、免疫浸润模式及免疫治疗反应存在较大差异。5.铁死亡诱导剂在抑制乳腺癌耐药转移中发挥重要作用,靶向铁死亡相关基因有望成为乳腺癌治疗的新策略。第二部分 乳腺癌铁死亡相关基因HSPB1的筛选及功能研究研究目的1.筛选乳腺癌中的关键铁死亡相关基因。2.分析铁死亡相关基因HSPB1在乳腺癌组织及正常组织中的表达情况及其与预后的相关性。3.通过体外实验探究HSPB1对乳腺癌细胞的增殖、转移、耐药及铁死亡的作用。4.通过体内实验探究HSPB1对乳腺癌耐药转移的影响。研究方法1.对第一部分中9个铁死亡相关基因进一步筛选,根据TCGA和GEO数据库的层次聚类分析,以及免疫组化和qRT-PCR检测乳腺癌和正常组织样本的差异表达基因,筛选得到乳腺癌铁死亡相关基因HSPB1。随后,运用Kaplan-Meier分析、卡方检验、单因素和多因素的Cox回归分析,探究HSPB1与乳腺癌的预后和临床特点的相关性。2.构建HSPB1过表达载体和siRNA,在过表达或敲低HSPB1的MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞系中进行以下体外实验:细胞增殖、克隆形成、EdU结合等实验,探究HSPB1对乳腺癌细胞增殖能力的影响;划痕实验、迁移和侵袭实验、Western blot等实验探究HSPB1对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响;IC50检测和细胞毒性试验等评价HSPB1对乳腺癌细胞阿霉素(doxorubicin)耐药的作用;活性氧(ROS)分析、丙二醛(MDA)测定等实验检测HSPB1对乳腺癌细胞铁死亡的影响。3.进一步用裸鼠异种移植模型在体内评估了 HSPB1对乳腺癌的影响。将HSPB1稳定过表达或对照的MDA-MB-231细胞皮下注射到BALB/c裸鼠的右侧胁腹,当皮下肿瘤达到50 mm3大小时,将每组裸鼠随机平均分为两个小组,分别静脉注射doxorubicin或等体积的溶剂对照。一定时间后处死小鼠并取瘤进行IHC分析相关基因表达。此外,利用肺转移模型研究了 HSPB1对乳腺癌体内转移的影响,用苏木精和伊红(H&E)染色比较肺部转移结节的大小和数量。研究结果1.TCGA和GEO数据库的层次聚类分析、患者组织样本显示HSPB1在乳腺癌组织中的表达高于正常组织。此外,HSPB1在乳腺癌细胞系中的表达比正常细胞更高。Kaplan-Meier分析显示,HSPB1高表达的乳腺癌患者的总生存期和无病生存期更差。卡方检验结果表明,HSPB1高表达与乳腺癌的远处转移显著相关(P<0.001)。单变immune senescence量和多变量的Cox回归分析表明HSPB1高表达预示着乳腺癌患者的不良预后。2.在过表达或敲低HSPB1的MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞系中进行的一系列体外实验表明,HSPB1过表达促进了乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。HSPB1过表达导致上皮标志物(E-cadherin)表达减少,间质标志物(Fibronectin、N-cadherin、Vimentin)表达增加,证实HSPB1对调节乳腺癌细胞EMT具有显著作用。在doxorubicin耐药的乳腺癌细胞中,HSPB1的mRNA和蛋白表达水平显著高于亲代细胞,doxorubicin处理导致HSPB1的表达以剂量和时间依赖的方式增加,而且HSPB1具有提高乳腺癌细胞doxorubicin耐药的作用。Erastin(铁死亡的诱导剂)处理也会导致HSPB1表达水平以剂量依赖的方式增加,HSPB1的过表达使乳腺癌细胞中erastin诱导的铁死亡水平降低,而ferrostatin-1(Fer-1,铁死亡的抑制剂)的处理则与HSPB1的过表达具有协同效应。因此,ROS及MDA分析均表明,HSPB1有抑制乳腺癌细胞铁死亡的作用。3.裸鼠异种移植模型结果发现,HSPB1过表达导致肿瘤体积和肿瘤重量增加。注射doxorubicin的小鼠肿瘤比PBS处理的肿瘤小而轻,表明doxorubicin对体内乳腺癌细胞的生长有抑制作用。IHC分析表明,在体内HSPB1可增强乳腺癌对doxorubicin的耐药。此外,肺转移模型发现HSPB1过表达明显增加了肺部转移结节的大小和数量。总之,体内实验结果表明,HSPB1促进了乳腺癌细胞的生长、doxorubicin耐药和体内转移。研究结论1.初步筛选出HSPB1作为乳腺癌关键的铁死亡相关基因。2.HSPB1在乳腺癌组织中的表达明显高于正常组织,并且HSPB1高表达与乳腺癌患者的不良预后相关。3.体外实验证明,HSPB1发挥促癌基因作用,能够促进乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并可通过抑制铁死亡发生增强乳腺癌细胞对doxorubicin的耐药。4.体内实验证明,HSPB1能够促进乳腺癌的进展和耐药。第三部分 铁死亡相关基因HSPB1通过NF-κB通路促进乳腺癌耐药及转移研究目的1.探究铁死亡相关基因HSPB1对NF-κB信号通路的影响。2.评估NF-κB信号通路在HSPB1介导的乳腺癌耐药转移中的作用。3.分析HSPB1对乳腺癌中巨噬细胞浸润的影响并探索相关机制。4.阐明HSPB1促进乳腺癌细胞对doxorubicin诱导的铁死亡抵抗的内在机制。研究方法1.通过Western blot检测HSPB1对NF-κB信号通路相关分子表达的影响。通过NF-κB报告基因实验、western blot及qRT-PCR等探究HSPB1过表达对NF-κB通路活性的影响。2.利用核质蛋白分离及免疫荧光实验等检测NF-κB表达情况,探究HSPB1表达对NF-κB核转位的影响。Co-IP实验探究HSPB1表达对Ikβ-α和NF-κB之结合的影响。用蛋白酶体抑制剂、溶酶体抑制剂处理乳腺癌细胞,检测HSPB1在调节Ikβ-α的蛋白稳定性方面的作用,探究Ikβ-α是否可被蛋白酶体或溶酶体降解。用蛋白质合成抑制剂处理细胞,以检测Ikβ-α的半衰期。通过Western blot检测细胞中Ikβ-α的泛素化。3.运用NF-κB报告基因实验、western blot及qRT-PCR等,证实敲低Ikβ-α能够激活NF-κB信号通路。利用MTT、克隆形成实验、Edu、transwell、划痕实验、ROS检测等,评估激活NF-κB信号通路是否能减弱HSPB1敲低对乳腺癌的抑制作用。4.通过ELISA实验研究IL6的分泌是否会受到HSPB1的影响。通过细胞迁移实验和HUVECs的小管形成实验,检测IL6对乳腺癌细胞恶性行为的作用。使用CIBERSORT、xCell和quanTIseq算法来评价肿瘤微环境中免疫细胞的浸润水平。利用HSPB1敲低或过表达细胞的培养基的上清液以评估HSPB1是否能调节乳腺癌中巨噬细胞的浸润,在培养基中加入抗IL6中和抗体以验证HSPB1促进巨噬细胞恶性行为是由IL6介导的。研究结果1.HSPB1过表达可导致p-Ikβ-α、NF-κB及其靶基因的蛋白水平上升,Ikβ-α的蛋白表达下降。qRT-PCR和免疫荧光检测也表明Survivin和IL6在HSPB1过表达后表达升高。此外,HSPB1敲低可以抑制NF-κB信号通路的激活。这些数据表明,HSPB1参与了 NF-κB信号通路的活化。2.HSPB1过表达能够促进乳腺癌细胞中NF-κB向核内转位,而HSPB1敲低后,NF-κB向核内转位受到抑制。Co-IP实验证实HSPB1能够与Ikβ-α相互结合。蛋白酶体抑制剂可导致Ikβ-α的表达上调,而且HSPB1过表达明显降低了 Ikβ-α的半衰期,说明HSPB1可以降低Ikβ-α的蛋白稳定性。HSPB1调节乳腺癌细胞中IKβ-α的泛素化,敲低HSPB1降低了 Ikβ-α的泛素化水平。这些发现表明,HSPB1可以通过与Ikβ-α结合而加强Ikβ-α泛素化介导的降解,促进NF-κB从细胞质的NF-KB/Ikβ-α复合物中释放出来,促进NF-κB向核内转位,从而增强NF-κB的活性。3.由NF-κB报告实验和检测NF-κB靶基因的表达证实,HSPB1敲低引起的IKβ-α表达增加和NF-κB活性降低,可以通过敲低Ikβ-α来恢复,表明敲低Ikβ-α能够激活NF-κB信号通路。Ikβ-α敲低可以削弱HSPB1敲低对细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。在HSPB1敲低的细胞中,由doxorubicin或erastin诱导的细胞活力的抑制和ROS产生的增多可以通过同时敲低Ikβ-α而逆转。这些结果表明,HSPB1通过影响NF-κB的活性来调节乳腺癌细胞的生物学行为和doxorubicin诱导的铁死亡,恢复NF-κB活性可降低HSPB1敲低在乳腺癌细胞中的抑制作用。4.ELISA检测表明HSPB1敲低导致IL6的分泌减少,而HSPB1过表达则促进IL6的分泌。HSPB1过表达细胞的上清液增加乳腺癌细胞的迁移能力和HUVECs的小管形成能力,而补充IL6中和抗体后在一定程度上减弱这种促进作用。HSPB1的表达水平与M2巨噬细胞的浸润水平、M2/M1的比例呈正相关,而与M1巨噬细胞的浸润水平呈负相关。这些结果显示,HSPB1可以通过调节IL6的表达而促进乳腺癌细胞的恶性行为。研究结论1.铁死亡相关基因HSPB1能够在乳腺癌细胞中促进NF-κB信号通路的激活。2.在乳腺癌细胞中,激活NF-κB信号通路能够恢复因HSPB1敲低产生的抑制作用。3.HSPB1通过促进Ikβ-α的泛素化降解,促使胞质中此网站NF-κB的核转位增加,进而抑制doxorubicin诱导的铁死亡。4.HSPB1能够通过调节IL6的表达及分泌从而促进M2巨噬细胞的浸润。

目的:胃黏膜低级别上皮内瘤变(Low-grade gastric intraepithelial neoplasia,LGIN)作为胃癌癌前病变,在胃癌防治工作中具有重要意义,本研究旨在探讨胃黏膜低级别上皮内瘤变患者的随访转归情况,通过分析患者的临床及病理特点,探讨影响胃黏膜低级别上皮内瘤变患者转归的相关危险因素。方法:选取2017年6月-2022年6月在扬州大学附属医院消化内镜中心就诊经过胃镜及病理活组织检查首次明确为胃黏膜低级别上皮内瘤变的283例患者作为研究对象,对所纳入研究对象进行问卷调查,包括个人基本资料、生活饮食习惯、既往病史、既往胃镜检查及幽门螺杆菌感染状况等信息,同时收集患者的内镜及病理资料,如病变部位、病变内镜下表现、是否合并萎缩、肠化等,并且完善幽门螺杆菌检测确定是否存在Hp感染,通过一定时间的随访,对比随访前后两次的胃镜及病理检查结果,判断LGIN患者的转归情况,并将其分为病变进展组及非进展组,通过单因素分析及多因素logistic回归分析探讨LGIN患者病变进展的相关危险因素。结果:(1)一般资料:LGIN患者年龄分布广泛,最大者年龄为85岁,最小者仅29岁,平均年龄为57.12±10.19岁,以45-59岁年龄段多见。性别以男性多见,男女比例为2.68:1。(2)内镜资料:283例LGIN患者病变主要位于胃窦部,其次是胃角,贲门/胃底及胃体相对较少,病变部位与年龄、性别分组间均无明显统计学差异(P>0.05)。病变内镜下表现以粗糙糜烂型为主、其次为增生隆起型、溃疡凹陷型及平坦浅表型。其中溃疡凹陷型组相对平坦浅表型组患者的平均年龄较高,但不同镜下表现与年龄分组间亦无明显统计学差异(P>0.05)。(3)病理资料:283例LGIN患者病理等级构成以轻度异型增生为主,占85.9%(243/283),中度异型增生占14.1%(40/283),不同病理等级程度与各年龄段分组及病灶部位分组间均存在统计学差异(P<0.05)。(4)LGIN合并萎缩、肠化分别占57.2%(162/283)、77.0%(218/283),且萎缩、肠化以轻度及中度为主,不同年龄段分组间与是否合并萎缩及肠化存在正相关(P<0.05)。(5)Hp感染情况:283例LGIN合并Hp感染占51.6%(146/283),部位以胃窦部多见,但各部位间Hp感染情况无明显统计学差异(P>0.05)。不同年龄阶段间Hp感染也没有统计学差异(P>0.05),Hp感染与是否合并萎缩及肠化相关,且与萎缩、肠化的程度存在显著统计学差异(P<0.05)。(6)LGIN患者病变转归情况及病变进展的相关危险因素:283例LGIN患者随访发现病变逆转占60.4%,病变稳定占31.5%,病变进展占8.1%,其中有5例进展为腺癌,总的癌变率为1.8%。年龄、性别、消化道肿瘤家族史、饮酒史、喜食腌制品、喜食浓茶、Hp感染、病变部位、病变内镜下表现均与LGIN进展相关(P<0.05),多因素logistic回归分析发现有饮Y-27632抑制剂酒史(P=0.022,OR=3.224,95%CI:1.183-8.782)、有消化道肿瘤家族史(P=0.029,OR=3.526,95%CI:1.13oral oncolytic6-10.947)、合并有Hp感染(P=0.024,OR=4.220,95%CI:1.205-14.783)、病变部位位于贲门/胃底(P=0.004,OR=6.838,95%CI:1.874-24.958)以及内镜下表现为溃疡凹陷型(P=0.023,OR=5.073,95%CI:此网站1.245-20.667)是LGIN患者病变进展的危险因素。结论:1.胃黏膜低级别上皮内瘤变以男性多见,其年龄分布广泛,主要以中老年为主,并且以45-59岁年龄段多见,病灶主要位于胃窦部,内镜下表现以粗糙糜烂型及增生隆起型为主,病理等级构成以轻度异型增生为主。2.LGIN患者伴有萎缩、肠化及Hp感染的比例在本研究中分别占57.2%、77.0%、51.6%,且萎缩及肠化的程度主要以轻度及中度为主,与年龄及Hp感染相关。3.本研究283例LGIN患者随访转归中,病变逆转占60.4%,病变稳定占31.5%,病变进展占8.1%,总的癌变率为1.8%。有饮酒史、有消化道肿瘤家族史、合并有Hp感染、病变位于贲门/胃底与病灶内镜下表现为溃疡凹陷型是LGIN患者病变进展的危险因素。

目的：探讨入院平均血小板体积与血小板Torin 1 IC50计数比值（MPV/PLT）、中性粒细胞百分率与白蛋白比值（NPAR）对重症急性胰腺炎（SAP）患者并发急性肾损伤（AKI）的预测价值。方法：选取2019年1月～2022年12月首都医科大学附属北京世纪坛医院重症医学科收治的117例SAP患者，根据是否并发AKI分为AKI组23例和非AKI组94例。计算入院时MPV/PLT、NPAR，采用多因素Logistic回归分析SAP并发AKI的影响因素，采用受试者工作特征（ROC）曲线分析MPV/PLT、NPAR对SAP患者并发AKI的预测价值。结果：与非AKI组比较，AKI组MPV/PLT、NPAR升高（P<0.05）。AKI组心率、呼吸频率快于非AKI组，平均动脉压低于非AKI组，乳酸脱氢酶、血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）高于非AKI组（P<0.05）。多因素Logistic回归分析显示，BUN、Scr、MPV/PLT、NPAR升高为medium Mn steelSAP患者并发AKI的独立危险因素（P<0.0IACS-010759溶解度5）。ROC曲线分析显示，BUN、Scr、MPV/PLT、NPAR四项联合预测SAP患者并发AKI的AUC大于单独预测。结论：入院MPV/PLT、NPAR升高与SAP患者并发AKI相关，在BUN、Scr基础上联合MPV/PLT、NPAR能提高预测SAP患者并发AKI的效能，可能成为SAP患者并发AKI的辅助预测指标。