S6 kinase 信号通路

目的 观察二甲双胍对过氧化氢（H_2O_2）诱导的人肺泡上皮细胞A549氧化损伤的抑制作用，并基于上皮—间质转化（EMT）及核因子κB(NF-κB)信号通路调控探讨相关机制。方法 体外培养A549细胞并分为对照组、模型组、二甲双胍组、BAY 11-7082组、抑制剂组和激活剂组。对照组不给予药物干预，模型组、二甲双胍组、BAY 11-7082组、抑制剂组、激活剂组均给予400μmol/L H_2O_2刺激24 h构建体外急性肺损伤细胞模型；二甲双胍组分为三个浓度亚组，分别给予2.5、5、10 mmol/L的二甲双胍；BAY 11-7082组加入5 mmol/L的NF-κB信号通路抑制剂BAY11-7082；根据CCK-8法检测细胞活力结果，选择5 mmol/L为二甲双胍最佳作用浓度，抑制剂组、激活剂组造模后给予5 mmol/L二甲双胍，并分别加入5μmol/L的BAY 11-7082和1μmol/L的NF-κB信号通路激活剂Prostratin。各组均干预24 h。倒置显微镜下观察细胞形态；采用ELISA法检测细胞培养液上清中的丙二醛（MDA）和超氧化物岐化酶（SOD）；采用细胞划痕试验测算细胞迁移率；采用Western blotting法检测细胞中的EMT相关蛋白及NF-κB信号通路相关蛋白。结果 模型组细胞较对照组生长受到抑制、细胞形态不规则、细胞碎片增多，MDA、细胞迁移率、N-钙黏蛋白、波形蛋白、纤维黏连蛋白及p-NF-κB p65蛋白水平升高，SOD、E-钙黏蛋白水平降低（P均<0.05）；Infection-free survival二甲双胍组和BAY 11-7082组细胞生长抑制作用较模型组减弱、细胞形态正常、细胞碎片少，MDA、细胞迁移率、N-钙黏蛋白、波形蛋白、纤维黏连蛋白及p-NF-κB p65蛋白水平降低，SOD、E-钙黏此网站蛋白水平升高，且抑制剂组较二甲双胍组上述指标变化更显著（P均<0.05）；激活剂组上述指标变化趋势与二甲双胍组相反（P均<0.05）。结论 二甲双胍对H_2OPF-6463922纯度_2诱导的A549氧化损伤具有抑制作用，可能与其阻滞NF-κB信号通路、抑制细胞迁移和EMT有关。

[研究背景]帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是全球患病人数第二多的神经退行性疾病,也是第三大威胁我国中老年人身体健康的隐形杀手,临床表现众多且严重影响患者的生活质量。据统计,我国目前有帕金森病患者数目约300万,并预计到2030年这一数字将增至500万,占全球帕金森病患者数量的一半。帕金森病的发病机制包含了多种途径,其中小胶质细胞介导的免疫炎症反应起到了关键作用。小胶质细胞的活化可能引发炎症反应,导致神经炎症以及多巴胺能神经元的变性损伤,进而导致帕金森病的病理特征。cGAS-selleck E7080STING信号通路是与免疫炎症反应相关的一个重要信号通路,该通路的激活可能导致免疫炎症的发生。cGAS-STING信号通路已在自身免疫疾病中受到了广泛研究,如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎,并被证实其发挥了重要作用。然而,在神经退行性疾病,尤其是在帕金森病中,cGAS-STING信号通路的作用还需要进一步的研究。为了深入理解cGAS-STING信号通路在帕金森病中发挥的具体作用,并探索通过药理学手段抑制STING信号通路的激活来减轻神经炎症保护多巴胺能神经元的可能性,本实验的目标是研究cGAS-STING信号通路中关键分子STING在帕金森病中的功能。通过分析STING的作用机制,我们希望为开发新的帕金森病治疗策略提供理论基础,最终目的是减轻帕金森病患者的临床特征提高生活质量。[研究方法]1.小鼠于造模前2天连续5天腹腔注射C-176,并通过腹腔注射神经毒性药物MPTP来制备急性PD模型。造模7天后,通过转棒、爬杆和悬挂实验评估小鼠的行为学指标变化;尼氏染色、酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)免疫组化染色及Western Blot评估多巴胺能神经元变性死亡情况;Western Blot、real timelandscape dynamic network biomarkers RT-PCR及免疫荧光检测脑内神经炎症反应。2.小鼠于造模前2天开始连续7天腹腔注射C-176,通过腹腔注射MPTP连续5天诱导亚急性PD模型。造模21天后,通过转棒、爬杆和悬挂实验评估小鼠的行为学缺陷状况;免疫组化、尼氏染色和Western Blot评估多巴胺能神经元变性情况;Western Blot、real time RT-PCR及免疫荧光检测神经炎症水平。3.BV2小胶质细胞用不同药物浓度的C-176(0.5 μM、1 μM和2 μM)预处理2小时,用LPS(1 μg/mL)和MPP+(1 mM)共同刺激,收集细胞通过real time RT-PCR检测相关炎症因子mRNA表达水平,Western Blot检测STING及其下游分子和NLRP3炎性小体的蛋白表达情况。4.使用STING的小干扰RNA(STING siRNA)在BV2小胶质细胞中敲低STING的表达,通过real time RT-PCR和Western Blot实验观察敲低STING的表达对LPS/MPP+所致BV2小胶质细胞炎性激活反应和NLRP3炎性小体激活的影响。[实验结果]1.在MPTP诱导的急性PD小鼠模型中,黑质和纹状体部位的STING蛋白表达水平均上升,约在造模第3天表达达到高峰。在LPS/MPP+诱导的BV2小胶质细胞炎性激活模型中,LPS/MPP+刺激3 h STING蛋白表达水平即开始升高,并持续至24 h。2.在MPTP诱导的小鼠急性PD模型中,STING特异性抑制剂C-176可显著改善PD小鼠的运动障碍,减轻黑质纹状体通路多巴胺能神经元及神经纤维的变性和丢失,提高纹状体TH蛋白水平;减轻黑质部位小胶质细胞及星型胶质细胞的炎性激活;C-176还可抑制STING信号通路及NLRP3炎性小体的活化。3.C-176可减轻LPS/MPP+诱导的BV2小胶质细胞炎症反应,降低炎症因子表达水平;抑制STING及其下游分子和NLRP3炎性小体的活化。4.C-176可改善神经毒性药物MPTP诱导的亚急性PD模型小鼠的运动障碍,减轻黑质和纹状体多巴胺神经元及神经纤维的丢失,减轻脑内神经炎症反应。5.利用STING siRNA在BV2小胶质细胞中特异性敲低STING的表达,结果发现敲低STING的表达可减轻LPS/MPP+诱导的BV2小胶质细胞炎症反应购买SCH772984,并可抑制STING及其下游信号分子的活化。[结论]通过药理学手段抑制STING的激活可减轻MPTP导致的急性以及亚急性PD模型小鼠的多巴胺能神经元变性损伤,改善小鼠运动缺陷症状,减轻脑内神经炎症反应。体外实验中STING特异性抑制剂C-176及STING siRNA均可减轻LPS/MPP+诱导的BV2小胶质细胞炎症反应,抑制NLRP3炎性小体的激活。本研究提示针对STING信号通路有望为PD的治疗及药物研发提供新靶点和新策略。

目的 ：探讨慢性肾功能不全患者其肺动脉压的变化，并分析慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）进展的危险因素。方法 ：回顾性分析联勤保障部队第九二一医院2021年1月―2022年12月间就诊的CKD患者，分析在不同估算肾小球滤过率（estMLN8237纯度imtibio-talar offsetated glomerular filtration rate,e GFR）下肺动脉压的变化特点，同时比较各因素对慢性肾功能不全患者的影响。结果 ：随着CKD分期增高，肺动脉压呈逐步增长趋势。在119名CKD患者中合并有肺动脉高压的有18例，其中1～2期0例，3期4例，4期6例，5期8例。同时随着肾小球滤过率（e GFR）下降，患者血红蛋白（Hb）及血小板（PLT）下降，D-二聚体升高。结论 ：肺动脉压与肾小球滤过率（e GFR）呈反比关系，即当肾小球滤过率（e GFR）下降时，心血管风险随之增加，且早期CKD患者积极治Tofacitinib抑制剂疗贫血，降低肺动脉压可减缓肾脏疾病进展。

背景:随着我国老龄化,外周动脉疾病患病率逐渐升高,且研究发现外周动脉与心血管死亡有关,并且会增加心血管事件发生风险。白蛋白-球蛋白比值(白球比)在预测心血管死亡方面也有一定的价值,而关于白球比与外周动脉疾病之间联系的相关文献却很少,故本研Blue biotechnology究为探讨高血压人群中白球比与外周动脉疾病发生风险之间的关系。方法:本研究为一项回顾性横断面研究,LEE011纯度从2018年3月至2018年8月在江西婺源及安徽岳西共招募了28906名研究参与者。我们使用广义相加模型分析白球比与外周动脉疾病的关系。结果:本研究最终共纳入具有完整基线的高血压人群共24806人。广义相加模型回归分析发现,当白球比作为连续性变量时,白球比与外周动脉疾病之间呈负相关关系。将白球比进行四等分组,结果发现相较于Q1selleck Crizotinib组,Q2、Q3、Q4组外周动脉发生风险逐渐降低,具体来说,在完全调整模型中,Q2、Q3、Q4组外周动脉疾病发生风险相较于Q1分别下降了11%(OR:0.89;95%CI:0.72-1.11)、27%(OR:0.73;95%CI:0.58-0.92)和35%(OR:0.65;95%CI:0.51-0.83)。亚组分析发现,白球比与外周动脉疾病之间的关系在吸烟以及卒中人群中更加显著。结论:白球比与外周动脉疾病之间呈负相关关系,且这种关系在吸烟及卒中人群中更显著。

目的：探讨卡格列净联合二甲双胍对中老年2型糖尿病(T2DM)合并轻度肾损伤患者糖脂代谢及肾脏保护的影响。方法：选取某院收治的60例中老年T2DM合并轻度肾损伤患者为研究对象，采用随机数字表法将其分为B组和A组，每组30例。B组采用二甲双胍治疗，A组采用卡格列净联合二甲双胍治疗。比较2组临床疗效、治疗前后2组血糖[餐后2 h血糖(2 hPG)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)]及胰岛功能指标[胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)]、肾功能指标、血清富亮氨酸α-2糖蛋白-1(LRG1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-23(IL-23)水平及不良反应发KPT-330生率。结果：A组临床总有效率(96.67%)高于B组(73.33%)(P<0.05)。治疗3个月后，A组2 hPG、FPG、HOMA-IR及HbA1c[(7.43±0.86)mmol/L、(Pathologic processes5.67±0.83)mmol/L、(2.03±0.42)、(6.31±0.35)%]均低于B组[(8.21±0.77)mmol/L、(6.94±0.71)mmol/L、(2.85±0.55)、(6.88±0.32)%],HOMA-β(56.74±8.21)高于B组(49.63±7.46),A组血肌酐、尿蛋白排泄率、尿酸及尿素氮[(83.41±11.35)μmol/L、(78.49±10.43)μg/min、(315.44±26.75)μmol/L、(7.95±2.04)mmol/L]水平低于B组[(92.67±10.22)μmol/L、(86.74±9.53)μg/min、(364.03±29.87)μmol/L、(9.52±2.27)mmol/L],肾小球过滤率[(87.02±5.17)mL/min]高于B组[(80.65±6.41)mL/min],A组血清LRG1、TGF-β1、IL-1β及IL-23[(206.32±29.45)ng/mL、(483.25±35.47)pg/mL、(31.63±5.38)ng/L、(15.09±3.07)ng/L]水平低于B组[(CCRG 81045小鼠258.44±23.09)ng/mL、(531.02±40.67)pg/mL、(43.11±6.47)ng/L、(19.67±4.14)ng/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。A组不良反应发生率(16.67%)与B组(10.00%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论：卡格列净联合二甲双胍治疗中老年T2DM合并轻度肾损伤患者疗效显著，可有效缓解临床症状，改善肾功能，促进病情恢复。

目的:探讨赤芍-附片对慢加急性肝衰竭大鼠的保护作用,及其对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响。方法:制备ACLF大鼠模型,分为模型组、阳性组、赤芍组、附片组、赤芍-附片组,另设空白组。予相应药物干预1周,生化法检测肝功能,全自动血凝仪测定PT,ELISA法检测IL-1β、IL-6、TNF-α,光镜观察肝组织,Western blot法检测PI3K/AKT信号通路相关分子标志物p-PI3K、p-AKT(Ser473)ALK抑制剂蛋白表达;实时荧光定量PCR技术检测PI3K、AKTm RNA的表达。结果:1.肝功能、凝血功能:与空白组对比,模型组大鼠血清ALT、AST、TBIL、TBA水平明显升高(P<0.05),PT明显延长(P<0.05),与模型组比较,各干预组大鼠ALT、AST、TBIL、TBA水平均下降(P<0.05),PT明显缩短(P<0.05),赤芍-附片组下降最为显著。2.炎症因子水平:与空白组对比,模型组大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α水平明显升高(P<0.05),与模型组比较,各干预组大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α水平均下降(PLBH589浓度<0.05),赤芍-附片组下降最为显著。3.肝脏组织病理:肝脏组织HE染色示模型组肝细胞形态变化,呈融合性坏死、点状或灶状坏死,纤维组织增生,汇管区见大量炎症细胞浸润。4.p-PI3K、p-AKT(Ser473)蛋白表达:与空白组对比,模型组大鼠p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平明显Institute of Medicine下降(P<0.05),各干预组大鼠p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平明显升高(P<0.05),其中赤芍-附片组表达最高。5.PI3Km RNA、AKTm RNA水平:与空白组对比,模型组大鼠PI3K、AKTm RNA表达水平明显下降(P<0.05),与模型组比较,各干预组大鼠PI3Km RNA、AKTm RNA表达水平明显升高(P<0.05),其中赤芍-附片组表达最高。结论:赤芍-附片可能通过调节PI3K/AKT信号通路,下调相关炎症因子的表达,以减轻慢加急性肝衰竭大鼠免疫炎症反应,从而发挥对肝脏的保护作用。

以不同Antibiotic de-escalation分子量透明质酸锌为研究对象，通过斑马鱼保湿、皮脂腺细胞SZ95的脂滴检测、5α还原酶抑制作用、成纤维细胞增殖、Ⅰ型胶原蛋白含量检测、巨噬细胞的炎症因子抑制试验，对其体外保湿、控油、紧致、舒缓功效进行了研究。结果显示0.5%中分子透明质酸点击此处锌可以抑制斑马鱼因高渗透压引起的失水，具有显著的保湿功效；大分子透明质酸锌可以通过抑制5CP-456773α还原酶达到控油功效，中分子、小分子透明质酸锌可以通过抑制脂滴合成、抑制5α还原酶达到控油功效；小分子透明质酸锌有良好的促进成纤维细胞增殖作用，促进作用呈现剂量依赖性，中分子透明质酸锌在质量浓度为125,12.5和1.25μg/mL时，均可显著促进Collagen I的生成；大分子、中分子、小分子透明质酸锌在质量浓度为25,125μg/mL时均可显著抑制炎症因子IL-1α,TNF-α,PGE 2的表达。实验结果表明，透明质酸锌具有良好的保湿、控油、紧致、舒缓的功效。

目的 分析不同眼球按摩护理对青光眼小梁切除术后患者眼压和手术成功率的影响。方法 AG-221 molecular weight选取2017年3月—2020年9月于丰城市人民医院行小梁切除术的50例青光眼患者，按照眼球按摩护理方法的不同分为对照组（患者自行按摩）与观察组（专业护士协助按摩），每组25例。对比2组术后不同时间段的眼压、功能性滤泡形成情况及手术成功率，术后视力变化情况及并发症（低眼压、黄斑水肿、前房出血）。结果 观察组术后1个月、3个月的眼压值均低于对照组（P<0.05）；观察组术后3个月视力改善情况优于对照组（P<0.05）；观察组功能性滤泡形成率为96.00%，高于对照组的68.00%(PMedical billing<0.05)；观察组手术成功率为92.00%，高于对照组的68.00%(P<0.05)；观察组术后并发症总发生率为4.00%，与对照组的12.00%相比差异无统计学意义（P>0.05）。结论 行青光眼小梁切除术后患者在专科护士的协助下Adavosertib体内实验剂量进行眼球按摩，可以有效改善眼压，促进功能性滤过泡形成，从而提高手术成功率，对视力改善能够起到一定的促进作用。

肌少症在老年慢性阻塞性肺疾病人群中患病率较高bone marrow biopsy，与慢性阻塞性肺疾病密切相关。两者共存不仅损害患者身心健康，还增加了临床治疗的难度。现代医学对慢性阻塞性肺疾病合并肌少症的发病机制研究较少，临床治疗也以对症处理为主，以缓解症状、减少COPD急性发作次数为目的。对于老年慢性阻塞性肺疾病和肌少症临床共病之间可能存在内在联系，但目前对该合并症关注不足。随着生物技术的不断进步，肠道菌群的作用在许多慢性疾病的发病机制中越来越受到重视。有Laduviglusib研究表明，老年慢性阻塞性肺疾病患者肠道菌群存在明显失衡，而肌少症的发生也与肠道菌群关系较为密Bucladesine分子量切。本文通过探讨肠道菌群与老年慢性阻塞性肺疾病合并肌少症之间的相互关系，分析肠道菌群的失衡可能是导致老年慢性阻塞性肺疾病合并肌少症的关键因素之一，提出以微生态疗法调节肠道菌群失衡，可能成为临床防治老年慢性阻塞性肺疾病合并肌少症的一种新途径。

本研究制备了一种具备优良免疫原性的猪丹毒杆菌表面抗原重组蛋白。采用基因调取的方式，构建质粒并亚克隆到表达载体pET28a上，进一步将改造质粒转化到大肠杆菌感受态BLMK-2206使用方法21细胞中，构建了1株猪丹毒SpaA全基因重组表达菌株。之后通过IPTG诱导表达、镍离子层析柱分离纯化、梯度透析获得高纯度重组SpaA蛋白。经免疫攻毒试验验证，重组SpaA蛋白能够有Erastin作用效保护小鼠和猪免于猪丹毒杆菌强毒攻击，其中小鼠的重组SpaA蛋白最小免疫剂量为每只2.0μg,100μg的重组SpaA蛋白能够保护猪免于猪丹毒杆菌强毒株感染。以重组SpaA蛋白作为组分与猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗共同免疫小鼠，结果显示该混合疫苗对于猪丹毒杆菌及猪多杀性巴氏杆菌均有良好的保护Chinese herb medicines效果。本研究结果证实，重组SpaA蛋白是我国现行猪丹毒杆菌传统灭活疫苗升级换代的理想候选抗原，同时也具备良好的抗原相容性，其高纯度及低免疫剂量的特点也为其他组分提供了充足的剂量空间。