目的:通过转录组学角度分析林蛙油对环磷酰胺所致卵泡发育障碍的影响,为林蛙油的雌激素样作用机制研究提供充足的理论及实验依据。方法:筛选后的雌性Wistar大鼠60只,随机分为对照组(CG)、模型组(MG)、阳性药组(PG)、林蛙油低(ORLG)、高剂量组(ORHG);除对照组外,其余大鼠均腹腔注射环磷酰胺建立卵泡发育障碍大鼠模型;除模型组外,其FUT-175体内实验剂量余大鼠灌胃相应药物,连续灌胃14-16天后测定大鼠血清性激素含量;摘取卵巢和子宫称量记录,计算器官指数;一侧卵巢与子宫做HE染色计算各级卵泡数量及子宫内膜厚度,另一侧卵巢进行转录组学分析,筛选差异基因,对差异基因进行GO和KEGG富集分析。结果:大鼠卵泡发育障碍模型成功建立。与模型组大鼠相比,林蛙油低、高剂量组大鼠子宫湿重和子宫指数显著升高(P<0.05),孕酮和雌二醇含量显著升高(P<0.05);林蛙油低、高剂量组大鼠窦前、窦状卵泡显著升高(P<0.05),子宫内膜厚度显著增加 (P<0.01),差异有统计学意义,林蛙油低剂量组大鼠黄体数量显著升高(P<0.05);转录组结果显示,林蛙油低、高剂量组/模型组之间差异基因分别有738、572个;GO富集分析分别富集到1790、1616个条目;KEGG富集分析主要集中在PI3K/Akt信号human‐mediated hybridization通路与B细胞受体信号通路。[结论] 林蛙油能有效改善环Puromycin磷酰胺所致卵泡发育障碍大鼠的血清性激素水平、卵巢卵泡发育情况、子宫内膜萎缩等情况,其分子机制可能与PI3K/AKT、B细胞受体等通路及基因有关。
阿扎胞苷与地西他滨治疗骨髓增生异常综合征的成本-效用分析
目的 从我国卫生体系角度出发评价阿扎胞苷与地西他滨治疗骨髓增生异常综更多合征(MDS)的经济性,为临床合理用药提供参考。方法 基于一项多中心回顾性队列研究(NCT01409070)的数据,构建Markov模型,模型模拟时限为10年,循环周期为28 d,以质量调整生命年(QALYs)作为健康产出指标并计算增量成本-效用比(ICUR),评价阿扎胞苷与地西他滨治疗MDS的经济性,采用单因素敏感性分析和概率敏感性分析验证基础分析结果的稳定性。结果 基础分析结果显示,与地西他滨治疗方案相比,阿扎胞苷治疗方案的总成本降低281 185.46元,且效用增加0.17 QALYs,阿扎胞苷治疗方案为绝对优势方案。NN2211配制单因素敏感性分析结果显示,无进展生存状态效用值、贴现率和地西他滨药费对结果的影响相对较大。概率敏感性分析结果提示,在3倍我国2immunocompetence handicap021年人均国内生产总值为意愿支付阈值范围内,阿扎胞苷治疗方案始终具有经济性。结论 从我国卫生体系角度出发,与地西他滨相比,阿扎胞苷治疗MDS更具成本-效用优势。
葡聚糖蔗糖酶在食品级乳酸菌中重组表达
为研究葡聚糖在乳酸菌中的合成情况以及结构分析,本研究将葡聚糖蔗糖酶DsrB与带有SP45分泌信号肽的乳酸乳球菌表达载体pNZ8148质粒载体进行连接,电转入乳酸乳球菌NZ9000中进行异源表达。经由一系列醇沉、三氯乙酸去除蛋白质、二次醇沉、透析以及纯化等步骤得到寻找更多多糖溶液。采用Opportunistic infection高效液相色谱法检测单糖组成;利用HPSEC测定葡聚糖的分子量;通过傅里叶红外技术、核磁共振技术以及扫描电镜分析多糖的结构以及观察多糖表面特征。结果表明将葡聚糖蔗糖酶在乳酸菌中进行表达,在蔗糖selleck R428浓度为10%的条件下,葡聚糖产量为10.54 g/L;单糖组成显示仅含有葡萄糖一种单糖;胞外多糖分子量测定结果为2.4×10~(6)Da;由傅里叶红外和核磁联合表明体外合成的胞外多糖仅含有α-(1,6)糖苷键;扫描电镜表示胞外多糖表面呈现为多孔状结构。在乳酸菌中异源表达,实现了葡聚糖的食品级生产,为葡聚糖于食品中应用提供了理论基础。
灵芝β-葡寡糖的分离纯化、结构表征及其活性研究
灵芝(Ganoderma lucidum)是我国传统的药食兼用真菌,β-葡聚Fixed and Fluidized bed bioreactors糖作为灵芝中主要的活性成分之一,在免疫调节、抗肿瘤、抗炎、抗氧化等方面活性显著。实验室前期从灵芝子实体中纯化出一种β-葡聚糖组分GLP20,研究发现该葡聚糖具有较好的生物活性,然而由于其分子量大、溶解性差、黏度大等特点影响了其进一步的开发利用。且相关研究表明多糖降解为低聚糖不仅可以降低多糖的分子量,提高其水溶性,还可以保留甚至提高多糖原有的生物活性,所以本实验室前期通过微波降解手段将灵芝β-葡聚糖GLP20降解为低聚糖片段,初步分离后得到具有抗炎活性的葡寡糖组分GLPW-A(聚合度为2-14)。为阐释抗炎活性与灵芝葡寡糖聚合度之间的关系,将灵芝β-葡寡糖组分GLPW-A(DP2-14)通过Bio-GelP-2凝胶色谱柱分离,从洗脱液、流速以及每管接样量三个方面优化分离条件。通过阴离子色谱和基质辅助激光解析串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析测定其聚合度,并进行体外抗炎活性点击此处评价。结果表明,当洗脱液为0.1 mol/L的NH4HCO3溶液,流速为0.1m L/min,每2m L收集一管时分离效果最佳,按出峰时间先后收集得到了八个组分(F1-F8)。聚合度分析显示,VP-16供应商F8和F7分别为DP2和DP3的葡寡糖组分,其余六个组分F6-F1均主要含有2-3种聚合度的葡寡糖。体外抗炎活性表明,主要含有DP4-6的F5和F6组分在实验范围内无明显抗炎活性,而其余各组分均在一定浓度下表现出不同程度的抗炎作用,且活性优于GLPW-A组分,推测灵芝β-葡寡糖的抗炎活性与寡糖片段的聚合度有关,本研究为灵芝β-葡寡糖的构效关系研究奠定基础。
地菍扦插繁殖技术及幼苗耐阴性研究
地菍(Melastoma dodecandrum)是野牡丹科野牡丹属的常绿亚灌木,叶片色彩丰富,花紫红色顶生,果黑色可食,地上部可入药,具有较强的应用价值。本文对地菍扦插繁殖技术和耐阴机制等进行探讨研究。扦插繁殖试验探究不同生根剂处理、不同扦插基质、不同扦插季节对地菍插穗生根效果的影响;耐阴试验以地菍两个月扦插苗为材料,探究其在CK(全光照)、1C(50%遮阴)、2C(70%遮阴)、3C(85%遮阴)四个不同光照下的生长形态、生理生化特性及解剖结构等的变化,并利用隶属函数分析法对不同遮阴处理下地菍抗逆性进行综合评价,可为今后野生植物地菍在园林中的推广应用提供理论依据。试验结果如下:(1)外源激素正交试验结果显示,地菍的生根类型有结上生根型、皮部生根型、混合生根型这3种,属于较容易生根的灌木。不同生根剂处理对生根效果的影响表明,最适合地菍插穗生根的处理方式为A_2B_3C_1(500 mg·L~(-1)NAA处理0.5 minJNJ-42756493价格)和A_3B_1C_3(100 mg·L~(-1)IBA处理30 min);不同扦插基质试验表明,园土/蛭石/珍珠岩(1:1:1)的混合基质为地菍扦插生根的最佳基质,但考虑用于推广生产“地菍卷”的可操作性,单一的园土更适合,用于护坡植物;不同扦插季节试验表明,3月份扦插生根效果最好,生根率可达96.67%;物候期观测表明,地菍在江西叶子常绿,开花时间集中在5~7月。(2)遮阴试验的研究结果表明,地菍幼苗的株高、叶长、叶宽、叶面积、叶鲜重、含水量、比叶面积均随着遮阴程度的增加而增加,单株叶片数则呈减小变化;最长根长、总根长、总根表面积、总根体积、总根尖数等一系列根系生长指标随着遮阴程度的增加先升后降,并在2C达到最大值;茎叶生物量、地上部干重及总生物量也在2C处理下最大。遮阴下地菍幼苗叶片中全N、全P、全K养分含量均高于全光照。(3)地菍属于异叶面,单层栅栏组织,随着遮阴程度的增加,地菍叶片、栅栏组织、海绵组织和下表皮厚均变薄;CK处理的上表皮厚度显著大于遮阴处理;主脉厚度及栅海比均随着遮阴程度的增加表现为先减后增的趋势,且CK处理最大。(4)地菍幼苗叶片初始荧光(F_o)、最大荧光(F_m)和可变荧光(F_v)均以3C最高,且显著大于其他处理;最大光化学效率(F_v/F_m)以3C最高,且2C、3C与CK存在显著性差异;实际光化学效率(Y(II))以2C最高,且遮阴处理皆显著大于全光照;光化学淬灭系数(q P)和非光化学淬灭系数(q N)各Avian infectious laryngotracheitis处理之间无显著差异。可见,遮阴可以提高地菍幼苗光化学效率。(5)地菍幼苗叶片中的叶绿素a、叶绿素b、叶绿素总含量以及类胡萝卜素的含量随着遮阴强度的增加而增加,而花色素苷含量与叶绿素a/b的值均呈下降趋势;CK、3C处理下的相对电导率显著高于1C、2C;CK的selleck化学丙二醛(MDA)含量显著高于其他处理;超氧化物歧化酶(SOD)活性和过氧化氢酶(CAT)活性均以CK最强,显著高于2C、3C;可溶性糖(SS)、可溶性蛋白(SP)及类黄酮含量以CK最高,3C最低,各处理间均存在显著性差异。结果表明,CK、3C处理不利于地菍生长,1C、2C处理有利于地菍生长。(6)遮阴试验的结果表明地菍具有良好的耐阴性,采用适当的遮阴处理可以促进其生长。经隶属函数值分析法综合评价得知,不同遮阴处理地菍幼苗抗逆性依次为:处理2C(70%遮阴)>处理1C(50%遮阴)>处理3C(85%遮阴)>处理CK(全光照)。综合分析可知,地菍幼苗在70%遮阴下生长最佳。
鳖甲煎丸联合低分子肝素钙治疗恶性肿瘤并发下肢深静脉血栓临床研究
目的:观察鳖甲煎丸联合低分子肝素钙治疗恶性肿瘤并发下肢深静脉血栓的临床疗效。方法:采用随机数字表法将63例恶性肿瘤并发下肢深静脉血栓患者分为试验组(31例)与对照组(32例)。2组均采用常规抗肿瘤治疗,在此基础上,对照组给予皮下注射低分子肝素钙治疗,试验组在对照组基础上加服鳖甲煎丸治疗。比较2组治疗前后中医证候评分、凝血功能指标[活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、国际标准化比值(INR)、D-二聚体(D-D)、血小板计数(BPC)]、血液流变学指标(全血高切黏度、全血中切黏度、全血低切黏度、血浆黏度)、炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6Navitoclax小鼠(IL-6)]、患肢腿围,并评估2组临床疗效及不良反应发生情况。结果:试验组脱落1例,纳入研究30例;对照组脱落2例,纳入研究30例。试验组总有效率93.33%,高于对照组66.67%(P<0.05)。治疗后,2组APTT、PT、INR均高于治疗前(P<0.05),D-D、BPC均低于治疗前(P<0.05);试验组治疗后APTT、PT、INR均高于对照组(P<0.05),D-D、BPC均低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组中医证候评分、全血高切黏度、全血低切黏度、全血中切黏度、血浆黏度、TNF-α、IL-6水平均低于治疗前(P<0.05),试验组治疗后中医证候评分、血液流变学指标、炎症因子水平均低于对照组(P<0.05)。Fer-1半抑制浓度治疗后,2组患肢髌骨上15 cm、髌骨下10 cm处腿围均较治疗前缩短(P<0.05),且试验组治疗后患肢腿围短于对照组(P<0.05)。2组均未出现不良反应。结论:鳖甲煎丸联children with medical complexity合低分子肝素钙治疗恶性肿瘤并发下肢深静脉血栓疗效确切,能有效改善患者凝血功能、血液流变学指标,降低炎症因子水平,减轻患肢肿胀程度,安全性较高。
绝经后女性2型糖尿病合并骨质疏松与OPG基因多态性及突变相关性分析
目的:探讨绝经后2型糖尿病(T2DM)女性OPBiofilter salt acclimatizationG基因rs6993813、rs4355801位点基因多态性及突变与骨量异常的关系,为绝经后T2DM伴骨质疏松(OP)人群提供新的临床预测指标及诊疗依据。方法:选取石河子大学医学院第一附属医院于2020年10月至2021年10月期间就诊的200例绝经后女性作为研究对象,根据研究对象的糖耐量试验及BMD测量结果分为四组:血糖正常伴骨量正常组(n=52)、T2DM伴骨量正常组(n=47)、血糖正常伴骨量异常组(n=43)及T2DM伴骨量异常组(n=58);记录患者绝经年限等一般基线资料,检测其代谢性相关生化指标,并测定OPG基因rs6993813和rs4355801位点的基因分型。结果:OPG基因rs6993813位点:在D组中,CC/TC基因型(突变型)的P水平较TT基因型(野生型)偏低(P<0.05)点击此处,而CC/TC基因型(突变型)的BMD(NOselleck激酶抑制剂F)水平较TT基因型(野生型)偏高(P<0.05)。OPG基因rs4355801位点:在B组中,GG/AG基因型(突变型)的FPG、HbA1c水平较AA基因型(野生型)显著偏低(均P<0.05)。在D组中,GG/AG基因型(突变型)的BMD(L1-4)水平较AA基因型(野生型)显著偏高(P<0.05)。多元线性回归分析显示:甘油三酯的降低以及rs4355801位点突变的减少是BMD(L1-4)降低的危险因素;绝经年限的增加以及高密度脂蛋白的降低是BMD(NOF)降低的危险因素。结论:绝经后T2DM女性OPG基因rs6993813、rs4355801位点基因多态性可能与骨代谢无关;但其rs6993813位点基因突变可能与骨代谢相关;其rs4355801位点基因突变可能与骨代谢、糖代谢相关;长绝经年限、低TG、低HDL-C可能是BMD降低的危险因素。
健脾补肺化痰方基于“肠道菌群-SCFAs/组胺-MCs”治疗支气管哮喘的机制探索
目的:基于肠道菌群对疾病转归的关联性与肠道菌群对呼吸道疾病免疫的影响,本研究就健脾补肺化痰方通过肠道菌群治疗儿童哮喘临床缓解期(clinical remission of asthma,CRA)的作用机制进行探究。方法:将48只雌性BLAB/c小鼠按完全随机原则分为6组,即空白对照组(HSE组)、模型组(MOD组)、中药+模型组(TCM组)、西药+模型组(MST组)、共饲养模型组(C-MOD组)、共饲养中药+模型组(C-TCM组),每组8只。参与模型制备的各组使用OVA+AL(OH)_3致敏、OVA雾化诱导建立支气管哮喘临床缓解期BALB/c小鼠模型。在麻醉状态下使用有创肺通气功能检测试验检测FEV1/FVC、FEF25_75/FVC以评估肺通气功能;使用苏木-伊红染色检测肺组织与结肠组织的病理情况;使用夹心酶联免疫吸附试验(Sandwich enzyme linked immunosorbent assay,Sandwich-ELISA)检测IL-33(InterleukinVorinostat核磁 33,IL-33)、组胺;使用蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)检测白三烯C4(Leukotriene C4,LTC4)、肥大细胞生长因子受体(c-kitproto-oncogeneprotein,C-KIT)的蛋白表达;使用实时荧光定量试验(Quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction,QPCR)检测LTC4的m RNA表达;使用16S r DNA测序技术检测肠道菌群的含量;使用气相色谱-质谱法(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)检测粪便中各短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)含量;使用免疫荧光技术(Immunofluorescence technique,IF)标记肥大细胞类糜蛋白酶1(Mast cell protease1,MAPT-1)。结果:1.肺功能与病理:与HSE组相比,MOD组的肺通气功能下降(P<0.05),肺部与结肠存在大量病理改变;与MOD组相比,TCM组与MST组的肺通气功能有所提高(P<0.05),肺部与结肠的病理情况得到缓解;2.IL-33、LTC4:与HSE组相比,MOD组的IL-33水平、LTC4的蛋白与m RNA表达infectious spondylodiscitis均有提高(P<0.05);与MOD组相比,TCM组与MST组的IL-33水平、LTC4的蛋白与m RNA表达均降低(P<0.05);3.肠道菌群、粪便中SCFAs与组胺以及血清中组胺:与HSE组相比,MOD组的拟杆菌、放线菌的丰富度降低(P<0.05),厚壁菌丰富度升高(P<0.05),F/B比率高(P<0.05),SCFAs总量降低(P<0.05),乙酸、丙酸明显降低(P<0.05),组胺在血清与粪便的水平升高(P<0.05);与MOD组相比,TCM组的拟杆菌、放线菌的丰富度升高(P<0.05),厚壁菌丰富度降低(P<0.05),F/B比率低(P<0.05),SCFAs的水平改变,组胺在血清与粪便的水平降低(P<0.05)。4.共饲养实验中病理、肠道菌群及其代谢产物:与MOD组相比,C-MOD组的肺、肠病理情况得到缓解,血清中组胺水平降低(P<0.05),粪便中组胺水平有降低趋势;与TCM组相比,C-TCM组的肺、肠病理情况更严重,粪便中组胺水平升高(P<0.05),血清中组胺有升高趋势;与C-MOD组相比,C-TCM组的菌群丰富度与SCFAs无差异(P>0.05),血清中组胺水平降低(P<0.05),粪便中组胺水平降低(P<0.05)。5.肥大细胞标记(MAPT-1、C-KIT):与HSE组相比,MOD组的MAPT-1与C-KIT高表达(P<0.05);与MOD组相比,C-MOD组、TCM组、C-TCM组的MAPT-1与C-KIT均低表达(P<0.05);与TCM组相比,C-TCM组的MAPT-1与C-KIT高表达(P<0.05)。结论:1.健脾补肺化痰方能够有效缓解ARS小鼠肺组织与结肠组织的炎症细胞浸润,抑制气道重塑;2.健脾补肺化痰方能够下调ARS小鼠血清中ILFerroptosis抑制剂-33水平、气道中LTC4蛋白与m RNA的表达,提高肺通气功能。3.健脾补肺化痰方能够调控ARS小鼠肠道菌群的细菌群落丰富度以及肠道菌群代谢的组胺、SCFAs。4.健脾补肺化痰方可通过“肠道菌群-SCFAs/组胺-MCs”轴对ARS小鼠起哮喘治疗作用。
苦荞转录因子基因FtbHLH3的克隆、亚细胞定位及表达分析
bHLH(basic helix-loop-helix)转录因子在植物黄酮化合物生物合成中具有重要的调控作用。为探究苦荞[Fagopyrum tataricum(L.)Gaertn]中bHLH转录因子在黄酮化合物生物合成中Double Pathology的功能和分子调控机制,利用RT-PCR(reverse transcriptionpolymerase chain reaction)技术从苦荞中克隆了一个bHselleck PD-0332991LH转录因子基因FtbHLH3,并对其进行生物信息学、亚细胞定位、转录激活活性、基因表达、基因共表达和基因表达量与总黄酮含量相关性分析。结果表明,FtbHLH3全长CDS序列为783 bp,编码selleck HPLC260个氨基酸。保守结构域和系统进化分析表明,FtbHLH3是一个非Ⅲf亚家族bHLH转录因子成员。亚细胞定位和转录激活活性分析显示,FtbHLH3定位于细胞核,不具有转录激活活性。基因共表达分析表明,FtbHLH3与苦荞中拟南芥TT8同源基因FtTT8和12个黄酮化合物生物合成结构基因共表达。不同组织部位中基因表达量与总黄酮含量间相关性分析表明,FtbHLH3的表达量与总黄酮含量间具有较高的正相关性。本研究结果表明,FtbHLH3是一个定位于细胞核,不具有转录激活活性的非Ⅲf亚家族bHLH转录因子,可能通过与其他转录因子互作来调控苦荞黄酮化合物的生物合成。
低分子肝素对高脂血症性胰腺炎患者血脂及凝血功能指标的影响研究
目的:探讨高血脂症胰腺炎患者治疗中采用低分子肝素对改善其血脂水平及凝血功能的效果。方法:本研究选取2022年1月至2022年12月我院确诊治疗的高血脂症性胰腺炎患者60例,采用抽签方式将其分为对照组与观察组,各纳入对象30例,对照组予以胃肠减压、抗炎、止痛、禁食等常规治疗,观察组患者基于对照组治疗加用低分子肝素,比较分析两组患者治疗总有效率、血脂水平、血淀粉酶及凝血功能指标水平。结果:观察组治疗总有效率较对www.selleck.cn/products/abt-199照组更高(93.3%vs 73.3%)(P<0.05)。治疗前effective medium approximation两组间血清甘油三酯、总胆固醇BIBW2992使用方法、淀粉酶等指标水平比较无统计学差异(P>0.05),治疗后观察组上述指标较对照组更低(P<0.05)。治疗前两组间PT、TT、FIB、APTT等凝血功能指标水平比较无统计学差异(P>0.05),治疗后观察组凝血功能指标较对照组改善更明显(P<0.05)。结论:在高血脂症性胰腺炎患者临床治疗中基于常规疗法予以低分子肝素治疗,不仅能够降低患者血脂水平,还可提升治疗效果,改善其凝血功能。