S6 kinase 信号通路

目的:探讨铁死亡(Ferroptosis)在铝致原代神经元死亡中的作用,研究氧化损伤和铁代谢异常在铝致原代神经元Ferroptosis中的可能作用机制,为进一步研究铝的神经毒性及其机制提供理论依据。方法:分离出生24 h SD大鼠新生鼠大脑皮层,提取原代神经元并进行培养。用含终浓度分别为0、25、50、75、100、200和400μmol/L麦芽酚铝(Aluminum maholate,Al(mal)_3)的原代神经元特异性Neurobasal?-A培养基分别培养原代神经元12 h、24 h和48 h,采用CCK-8法测定上述不同染毒时间和染毒剂量下原代神经元的存活率,取存活率为65%-75%所对应的染毒剂量和染毒时间进行后续实验。将原代神经元分为13组,终浓度分别为:0μmol/LAl(mal)_3组、0.5%二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO)组、100μmol/L Al(mal)_3组、50μmol/L坏死性凋亡抑制剂(Necrostatin-1,Nec-1)组、20μmol/L凋亡抑制剂(Z-VAD(OH)-FMK,Z-VAD-FMK)组、50μmol/L自噬抑制剂(3-Methyladenine,3-MA)组、50μmol/L去铁胺(Deferoxamine,DFO)组和20μmol/L铁死亡诱导剂(Ferroptosis inducer,FINO_2)组以及100μmol/L Al(mal)_3+Nec-1组、100μmol/L Al(mal)_3+Z-VAD-FMK组、100μmol/L Al(mal)_3+3-MA组、100μmol/L Al(mal)_3+DFO组和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组。联合染毒时0.5%DMSO、50μmol/L Nec-1、20μmol/L Z-VAD-FMK、50μmol/L 3-MA、50μmol/L DFO和20μmol/L FINO_2均在添加终浓度为100μmol/L Al(mal)_3前2 h加入进行预处理,培养箱中培养24 h后进行后续实验。采用CCK-8法测定原代神经元存活率,采用倒置显微镜观察微管关联蛋白2(Microtubule-associated protein 2,MAP2)和DAPI荧光染色后的细胞形态改变。采用Western-blot法检测原代神经元氧化还原相关蛋白——溶质载体家族7成员11(Solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化酶4(Monoclonal antibody to glutathione peroxidase 4,GPX4)表达水平。分别使用谷胱甘肽过氧化物酶测试盒和还原型谷胱甘肽测试盒测定谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)活力和谷胱甘肽(Glutathione,GSH)含量。采用Western-blot法检测原代神经元铁代谢相关蛋白——转铁蛋白受体1(Transferrin receptor 1,TFR1)、二价金属离子转运体(Divalent metal transporter 1,DMT1)和铁蛋白重链(Ferritin heavy chain,FTH1)蛋白表达水平。原代神经元TFR1、DMT1、FPN1和FTH1m RNA表达水平则采用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,q RT-PCR)检测。通过比较Al(mal)_3单独染毒及其与DFO和FINO_2联合染毒对SD大鼠新生鼠皮质原代神经元存活率、细胞形态、氧化损伤相关指标以及铁代谢相关指标的影响,探索铝致原代神经元铁死亡的可能机制。结果:1.确定Al(mal)_3染毒剂量和染毒时间使用终浓度为0、25、50、75、100、200和400μmol/L Al(mal)_3染毒原代神经元12 h时,原代神经元存活率没有明显变化(P>0.05);使用终浓度为100、200和400μmol/L Al(mal)_3染毒原代神经元24 h、48 h后,原代神经元存活率明显降低(P<0.05)。取原代神经元存活率为65%-75%的染毒剂量(100μmol/L Al(mal)_3)和染毒时间(24h)进行后续实验。2.Ferroptosis在铝致原代神经元死亡中的作用对Al(mal)_3单独或与DFO、FINO_2联合染毒24 h的原代神经元存活率进行测定发现,20μmol/L FINO_2组、100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组原代神经元存活率分别为(18.76±0.002)%、(71.92±0.04)%和(15.42±0.002)%,较0μmol/L Al(mal)_3组原代神经元存活率(100.00±0.00)%显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05);100μmol/L Al(mal)_3组、20μmol/L FINO_2组、100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组原代神经元存活率分别为(72.81±0.04)%、(18.76±0.002)%、(71.92±0.04)%和(15.42±0.002)%,与0.5%DMSO组原代神经元存活率(102.59±0.05)%相比均降低(P<0.05);与100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组原代神经元存活率(71.92±0.04)%相比,50μmol/L DFO组(113.59±0.05)%和100μmol/L Al(mal)_3+DFO组(95.42±0.06)%均升高(P<0.05),20μmol/L FINO_2组(18.76±0.002)%和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组(15.42±0.002)%均降低(P<0.05)。采用荧光染色法对Al(mal)_3单独或与DFO和FINO_2联合染毒24 h的原代神经元形态进行观察发现,0μmol/L Al(mal)_3组、0.5%DMSO组和50μmol/L DFO组神经元胞体饱满圆润,轴突清晰且互相交织成网,100μmol/L Al(mal)_3组、100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组、20μmol/L FINO_2组以及100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组神经元胞体变小,边缘模糊不清,树突形态表现为断裂、变形,且相互连接变少。100μmol/L Al(mal)_3+DFO组神经元状态恢复较好,有部分轴突变短且与周围神经元连接不明显,但CX-5461大部分神经元胞体形态圆滑且轴突细长粗壮,交织成肉眼可见的浓密网状。对Al(mal)_3单独或与DFO和FINO_2联合染毒24 h的原代神经元总荧光强度进行比较发现,100μmol/L Al(mal)_3组、20μmol/L FINO_2组、100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组的总荧光强度分别为(339.16±7.97)、(296.06±9.95)、(297.05±7.68)和(284.70±6.26)与0μmolecular immunogenemol/L Al(mal)_3组原代神经元总荧光强度(372.89±3.61)相比明显降低(P<0.05);与0.5%DMSO组总荧光强度(320.08±15.46)相比,100μmol/L Al(mal)_3组总荧光强度(339.16±7.97)和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组总荧光强度(284.70±6.26)均降低,且差异具有统计学意义(P<0.05);100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组总荧光强度(284.70±6.26)相比于100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组总荧光强度(297.05±7.68)进一步降低(P<0.05)。3.坏死、凋亡、自噬在铝致原代神经元死亡中的作用Al(mal)_3单独或与Z-VAD-FMK、Nec-1和3-MA联合24 h后,原代神经元存活率检测结果显示:与0μmol/L Al(mal)_3组原代神经元存活率(100±0.00)%相比,100μmol/L Al(mal)_3组、100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组、100μmol/L Al(mal)_3+Nec-1组、100μmol/L Al(mal)_3+Z-VAD-FMK组和100μmol/L Al(mal)_3+3-MA组原代神经元存活率明显下降,分别为(72.81±0.04)%、(71.94±0.03)%、(59.26±0.04)%、(61.50±0.03)%和(56.73±0.03)%,差异具有统计学意义(P<0.05);100μmol/L Al(mal)_3组、100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组、100μmol/L Al(mal)_3+Nec-1组、100μmol/L Al(mal)_3+Z-VAD-FMK组和100μmol/L Al(mal)_3+3-MA组的原代神经元存活率分别为(72.81±0.04)%、(71.94±0.03)%、(59.26±0.04)%、(61.50±0.03)%和(56.73±0.03)%,与0.5%DMSO组原代神经元存活率(102.59±0.05)%相比明显降低(P<0.05);不同死亡方式抑制剂单独作用组即50μmol/L Nec-1组、20μmol/L Z-VAD-FMK组和50μmol/L 3-MA组的原代神经元存活率分别为(110.87±0.03)%、(98.47±0.04)%、(106.07±0.04)%,均高于100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组原代神经元存活率(71.94±0.03)%,且差异具有统计学意义(P<0.05);而联合染毒组即100μmol/L Al(mal)_3+Nec-1组、100μmol/L Al(mal)_3+Z-VAD-FMK组和100μmol/L Al(mal)_3+3-MA组原代神经元存活率分别为(59.26±0.04)%、(61.50±0.03)%和(56.73±0.03)%,均低于100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组原代神经元存活率(71.94±0.03)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。综上,不同死亡方式抑制剂组并未使得由Al(mal)_3染毒所导致的原代神经元存活率有明显升高。采用荧光染色法对Al(mal)_3单独或与Nec-1、Z-VAD-FMK和3-MA联合染毒原代神经元24 h的原代神经元形态进行观察发现,50μmol/L Nec-1组、20μmol/L Z-VAD-FMK组和50μmol/L 3-MA组单独处理原代神经元时,其形态无明显改变,胞体大而饱满,轴突相互连接,均匀交织成网;而当Al(mal)_3与其联合染毒时,即100μmol/L Al(mal)_3+Nec-1组、100μmol/L Al(mal)_3+Z-VAD-FMK组和100μmol/L Al(mal)_3+3-MA组中网状细胞结构明显减少,轴突断裂、胞体皱缩,神经元网络疏松。对Al(mal)_3单独或与Nec-1、Z-VAD-FMK和3-MA联合染毒24 h的原代神经元总荧光强度进行比较发现,100μmol/L Al(mal)_3组、100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组和100μmol/L Al(mal)_3+3-MA组总荧光强度分别为(372.89±3.61)、(297.05±7.68)和(292.90±8.09),与0μmol/L Al(mal)_3组相比明显降低(P<0.05);联合染毒组100μmol/L Al(mal)_3+Nec-1组、100μmol/L Al(mal)_3+Z-VAD-FMK组和100μmol/L Al(mal)_3+3-MA组的总荧光强度分别为(312.09±3.83)、(314.52±3.80)和(292.90±8.09),仍未恢复至单独染毒的50μmol/L Nec-1组、20μmol/L Z-VAD-FMK组和50μmol/L 3-MA组的总荧光强度水平,分别为(329.04±9.95)、(323.33±6.07)和(340.36±8.59),差异无统计学意义(P>0.05)。4.铝致原代神经元Ferroptosis的可能机制与0μmol/L Al(mal)_3组SLC7A11蛋白表达(1.18±0.13)相比,100μmol/L Al(mal)_3组、20μmol/L FINO_2组和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组的SLC7A11蛋白表达分别为(0.97±0.15)、(0.83±0.10)和(0.85±0.06),均降低但差异无统计学意义(P>0.05);与0.5%DMSO组SLC7A11蛋白表达(1.07±0.10)相比,20μmol/L FINO_2组和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组的SLC7A11蛋白表达分别为(0.83±0.10)和(0.85±0.06),均降低但差异无统计学意义(P>0.05);与100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组SLC7A11蛋白表达(1.22±0.06)相比,100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组的SLC7A11蛋白表达(0.85±0.06)降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。对各组原代神经元GPX4蛋白表达水平进行测定发现,与0μmol/L Al(mal)_3组GPX4蛋白表达(1.25±0.78)相比,GPX4蛋白在100μmol/L Al(mal)_3组(0.80±0.04)、20μmol/L FINO_2组(0.84±0.19)和100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组(0.89±0.17)表达均降低,差异无统计学意义(P>0.05),100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组GPX4蛋白表达(0.61±0.19)与0μmol/L Al(mal)_3组GPX4蛋白表达(1.25±0.78)相比显著降低(P<0.05);与0.5%DMSO组GPX4蛋白(1.02±0.15)相比,GPX4蛋白在20μmol/L FINO_2组(0.84±0.19)和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组(0.61±0.19)表达均降低,差异无统计学意义(P>0.05);与100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组GPX4蛋白表达(0.89±0.17)相比,100μmol/L Al(mal)_3+DFO组的GPX4蛋白表达(1.37±0.07)升高,而100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组GPX4蛋白表达(0.61±0.19)降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。对原代神经元GSH-PX含量进行测定发现,与0μmol/L Al(mal)_3组原代神经元GSH-PX含量(211.68±3.74)活力单位/mg prot相比,100μmol/L Al(mal)_3组GSH-PX含量(211.68±3.74)、20μmol/L FINO_2组GSH-PX含量(146.91±6.44)和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组GSH-PX含量(108.22±6.2)均明显降低(P<0.05);20μmol/L FINO_2组和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组的GSH-PX含量分别为(146.91±6.44)、(108.22±6.2),与0.5%DMSO组(205.37±1.36)相比均明显降低(P<0.05);与100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组GSH-PX含量(168.31±4.41)相比,100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组(108.22±6.2)的GSH-PX含量降低(P<0.05);50μmol/L DFO组(205.37±1.36)和100μmol/L Al(mal)_3+DFO组(188.13±5.51)的GSH-PX含量均有所升高回升(P>0.05)。对原代神经元GSH含量(μmol/g prot)的分析结果如下:与0μmol/L Al(mal)_3组(80.40±6.37)μmol/g prot和0.5%DMSO组(85.52±8.66)μmol/g prot相比,20μmol/L FINO_2组的GSH含量(60.60±3.69)μmol/g prot和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组的GSH含量(51.71±4.71)μmol/g prot均降低(P<0.05);与100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组GSH含量(66.55±3.75)μmol/g prot相比,0.5%DMSO组GSH含量(85.52±8.66)μmol/g prot和50μmol/L DFO组GSH含量(85.56±4.59)μmol/g prot明显升高(P<0.05);100μmol/L Al(mal)_3+DFO组的GSH含量(75.32±4.76)μmol/g prot高于100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组的GSH含量(66.55±3.75)μmol/g prot,但差异无统计学意义。对原代神经元内总铁含量进行统计分析后结果如下:与0μmol/L Al(mal)_3组总铁含量(9.31±2.54)μmol/g prot和0.5%DMSO组总铁含量(7.08±1.48)μmol/g prot相比,100μmol/L Al(mal)_3组、20μmol/L FINO_2组和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组总铁含量分别为(16.73±2.09)μmol/g prot、(19.12±2.79)μmol/gprot和(21.97±3.89)μmol/g prot,均明显上升(P<0.05);与100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组总铁含量(13.39±1.95)μmol/g prot相比,100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组总铁含量(21.97±3.89)μmol/g prot明显上升(P<0.05)。对原代神经元FTH1表达水平分析结果如下:与0μmol/L Al(mal)_3组(1.37±0.46)和0.5%DMSO组(0.74±0.11)相比,FTH1蛋白表达在100μmol/L Al(mal)_3组(6.96±1.08)、20μmol/L FINO_2组(5.42±1.53)和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组(9.42±2.89)均明显上升(P<0.05);与100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组FTH1蛋白表达(3.07±0.30)相比,100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组表达(9.42±2.89)明显升高(P<0.05),而与100μmol/L Al(mal)_3+DFO组之间的蛋白表达(3.43±0.71)无明显差异(P>0.05)。对原代神经元中铁代谢相关蛋白TFR1表达水平分析结果如下:与0μmol/L Al(mal)_3组(1.35±0.25)以及0.5%DMABT-199 IC50SO组(1.44±0.12)相比,TFR1蛋白表达在100μmol/L Al(mal)_3组(1.77±0.14)和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组(2.33±0.14)水平升高(P<0.05);与100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组的TFR1蛋白表达水平(1.66±0.40)相比,100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组的TFR1蛋白表达水平(2.33±0.14)表现为升高(P<0.05),而100μmol/L Al(mal)_3+DFO组的TFR1蛋白表达水平(1.58±0.26)则略微降低(P>0.05)。对原代神经元中DMT1蛋白表达水平分析结果如下:100μmol/L Al(mal)_3、100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组以及100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组的DMT1表达水平分别为(0.81±0.14)、(0.93±0.47)、(1.29±0.49),与0μmol/L Al(mal)_3组(0.42±0.11)相比均升高,差异有统计学意义(P<0.05);与0.5%DMSO组(0.58±0.37)相比,100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组DMT1蛋白表达分别为(0.93±0.47)、(0.58±0.26),均升高且差异有统计学意义(P<0.05),与50μmol/L DFO组之间DMT1蛋白表达(0.50±0.36)差异不明显(P>0.05);与100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组(0.93±0.47)相比,100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组的DMT1表达(1.29±0.49)明显上升(P<0.05)。对原代神经元中铁代谢相关物质TFR1m RNA表达水平分析结果如下:与0μmol/L Al(mal)_3组(1.00±0.00)相比,20μmol/L FINO_2组(1.87±0.59)和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组(2.11±0.21)的TFR1m RNA表达升高(P<0.05);与0.5%DMSO组(1.23±0.21)相比,20μmol/L FINO_2组TFR1m RNA表达(1.87±0.59)明显升高(P<0.05);与100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组(1.55±0.60)相比,100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组的TFR1m RNA表达(2.11±0.21)明显升高(P<0.05),TFR1m RNA表达在50μmol/L DFO组(1.09±0.20)和100μmol/L Al(mal)_3+DFO组(0.82±0.18)均降低(P<0.05)。对原代神经元中DMT1m RNA表达水平分析结果如下:与0μmol/L Al(mal)_3组(1.00±0.00)相比,在100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组(1.45±1.06)和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组(2.52±2.29)显著升高(P<0.05),经DFO处理后,100μmol/L Al(mal)_3+DFO组的DMT1 m RNA表达(1.05±0.22)与0μmol/L Al(mal)_3组(1.00±0.00)无明显差异(P>0.05);与0.5%DMSO组(1.12±0.6)相比,100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组(1.45±1.06)、20μmol/L FINO_2组(1.84±0.6)和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组(2.52±0.29)均升高(P<0.05),100μmol/L Al(mal)_3+DFO组(1.05±0.22)的DMT1 m RNA表达与溶剂对照组无明显差异(P>0.05);与100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组(1.45±1.06)相比,Al(mal)_3+FINO_2组的DMT1m RNA表达(2.52±2.29)升高(P<0.05)。对原代神经元中FPN1m RNA表达水平分析结果如下:与0μmol/L Al(mal)_3组(1.00±0.00)相比,FPN1m RNA表达在100μmol/L Al(mal)_3组(0.90±0.13)、20μmol/L FINO_2组(0.77±0.44)均降低但差异无统计学意义(P>0.05),与100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组的FPN1m RNA表达(0.45±0.23)相比则明显降低(P<0.05);与0.5%DMSO组(1.26±0.15)相比,100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组FPN1m RNA表达(0.45±0.23)明显降低(P<0.05),与50μmol/L DFO组之间FPN1m RNA表达(1.30±0.23)则无明显差异(P>0.05);与100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组(1.07±0.53)相比,100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组FPN1m RNA表达(0.45±0.23)明显降低(P<0.05)。对原代神经元中FTH1m RNA表达水平分析结果如下:与0μmol/L Al(mal)_3组(1.00±0.00)、0.5%DMSO组(1.03±0.25)和100μmol/L Al(mal)_3+DMSO组(1.12±0.40)相比,FTH1m RNA表达在100μmol/L Al(mal)_3+DFO组(2.06±0.27)和100μmol/L Al(mal)_3+FINO_2组(4.51±0.94)均明显升高(P<0.05)。结论:Al(mal)_3染毒可导致原代神经元出现铁死亡、凋亡、坏死和自噬,但Ferroptosis是其重要的死亡方式。氧化损伤是铝致原代神经元Ferroptosis的机制之一,其可能作用途径为:铝通过抑制原代神经元SLC7A11表达使进入细胞内的半胱氨酸量减少,进而使GSH合成减少、GPX4失活,细胞内氧化还原状态失衡,最终导致原代神经元发生Ferroptosis。铁代谢失衡也是铝致原代神经元Ferroptosis的机制之一,其可能作用机制为:铝可通过增加原代神经元TFR1、DMT1、FTH1表达,降低FPN1表达引起细胞内铁代谢失衡,铁离子蓄积,从而诱发Ferroptosis。

细菌感染严重威胁全球公共卫生安全,抗生素治疗被认为是对抗细菌感染的主要策略,然而抗生素的滥用引发了细菌耐药性急剧增加的问题,因此亟需开发具有多重作用机制的新型高效抗菌剂。Cu_2O纳米材料不仅具有类过氧化物酶活性,催化转化H_2O_2生成·OH,表现为化学动力学抗菌,而且在近红外区具有较强的光响应能力,可通过光疗法协同化学动力学作用机制高效杀菌,在医药领域具有广泛的研究前景。然而,Cu_2O的毒性大、生物相容性差以及稳定性低,严重限制了其进一步在抗菌领域的应用。因此,构建新型、安全、高效的Cu_2O抗菌纳米复合材料具有重要意义。黄连素在我国已有2000多年的药用历史,不仅抗菌效果好、生物相容性高、稳定性强,而且具有光敏性,能够产生光动力效应。基于此,本论文选用黄连素修饰Cu_2O,制备新型Cu_2O-黄连素纳米材料,并进行化学动力/光动力/光热疗法协同抗菌性能研究。本论文的第一部分成功制备了Cu_2O-去亚甲基黄连素(Cu_2O-DMB)纳米粒,其粒径分布在225-375 nm之间并带有正电位(+5.87 m V),能通过静电作用捕获细菌,对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐氨苄西林大肠杆菌(AREC)的捕HIV-infected adolescents获率分别为31.1%和22.2%。光吸收实验研究表明Cu_2O-DMB具有较好的近红外光响应能力,在808 nm光照下能够产生~1O_2,表现为光动力活性,同时产生光热效应,转换效率可达31.42%。类酶活性研究表明Cu_2O-DMB可作为自级联反应器,通过类谷胱甘肽氧化酶(GSH-OXD)活性消耗GSH和O_2生成GSSH和H_2O_2,然后通过Adezmapimod体内类过氧化物酶活性(POD)将H_2O_2催化转化为·OH。因此,Cu_2O-DMB可通过光动力产生的~1O_2与类酶活性产生的·OH对细菌的细胞膜造成氧化损伤,与光热效应协同杀菌。抗菌实验表明,在808 nm光照下,Cu_2O-DMB能够影响细菌膜电位并诱导蛋白质泄露,最小抑菌浓度MIC值为8μg m L~(-1),对MRSA和AREC抗菌率分别为99.4%和99.8%;可抑制生物膜形成,MRSA和AREC的生物膜相对生成量分别为6.86%和8.55%;在12个培养周期内MIC值没有明显变化,不易诱导细菌产生耐药性。生物相容性研究表明Cu_2O-DMB的毒性较低,当浓度为8×MIC时,溶血率仅为1.31%,细胞存活率超过80%;能够有效促进MRSA感染的小鼠伤口愈合,7天后伤口相对面积仅为1.56%,对小鼠创口组织和器官的H&E染色分析发现没有明显组织病变和炎症。以上结果表明Cu_2O-DMB具有光响应增强的抗菌能力,通过化学动力/光动力/光热协同作用杀菌,是一种高效对抗耐药菌感染的纳米抗菌材料。Cu_2O-DMB虽然具有较高抗菌效率,但无法控制Cu_2O在细菌感染微环境的释放,需进一步对材料进行优化,本论文第二部分成功制备了光/pH双响应的具有核壳结构的Cu_2O-二氢去亚甲基黄连素@磷酸钙(Cu_2O-RDMB@Ca P)纳米材料。通过电感耦合等离子光谱仪(ICP)监测金属离子的释放研究表明,Cu_2O-RDMB@Ca P具有比Cu_2O、Cu_2O-DMB和Cu_2O-RDMB更高的稳定性,在pH为4.0条件下孵育24 h后,磷酸钙外壳的相对分解率为76.3%,铜离子的释放量为5.2%;在pH为7.0的条件下孵育24 h后,磷酸钙外壳的相对分解率仅为19.5%,铜离子的释放量为1.2%。因此Cu_2O-RDMB@Ca P表现为pH响应,使铜离子在细菌感染酸性微环境释放,实现了材料在特定部位发挥抗菌作用。光吸收实验研究表明Cu_2O-RDMB@Ca P同样具有近红外光响应能力,在808 nm光照下能够产生~1O_2,表现为光动力活性,同时产生光热效应,转换效率为29.81%。类酶活性研究表明Cu_2O-RDMB@Ca P同样可作为自级联反应器,消耗GSH和O_2生成H_2O_2,并通过类POD活性产生·OH。因此Cu_2O-RDMB@Ca P具有与Cu_2O-DMB类似的化学动力/光动力/光热疗法协同抗菌性能,能够干扰细菌膜电位并使蛋白质泄露,MIC值为20μg m L~(-1),对MRSA和AREC抗菌率分别为98.2%和98.6%;有效抑制生物膜的形成,MRSA和AREC的生物膜生成量低于5%,在12个培养周期内MIC值没有明显变化,不易诱导细菌产生耐药性。由于Cu_2O-RDMB@Ca P具有pH响应能力,在中性条件下铜离子的释放量少,降低了材料对正常细胞的毒副作用,提高了其生物相容性,当浓度为16×MIC时,溶血率仅为1.61%,细胞存活率超过90%。小鼠实验研究表明,Cu_2O-RDMB@Ca P能够有效促进MRSA感染的伤口愈合,7天后创面完全愈合,对创口组织和器官的H&E染色分析发现无明显病变和炎症产生。综上所述,Cu_2O-RDMB@Ca P不仅具有光响应增强的抗菌能力,通过化学动力/光动力/光热协同作用杀菌,而且具有pH响应能力,实CH-223191化学结构现铜离子在细菌感染酸性微环境的释放,提高了生物相容性,在抗菌领域具有很好的应用前景。以上两部分成功制备了新型、安全、高效的光响应及光/pH双响应的Cu_2O-黄连素纳米材料,并进行化学动力/光动力/光热协同作用机制及抗菌性能研究,降低了Cu_2O毒性的同时,还拓宽了黄连素在抗菌材料领域的研究思路,为临床治疗细菌感染以及解决细菌耐药性问题提供了理论依据及研究基础。

目的:研究薯蓣皂苷元(diosgenin, Dio)对小鼠免疫性睾丸炎的作用及机制。方法:小鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、盐酸左氧氟沙星组，以及Dio低、高剂量组GSI-IX，左侧睾丸注射30μL 10%冰醋酸诱导小鼠免疫性睾丸炎。给药21 d后，检测睾丸组织氧化应激及炎性Biocompatible composite因子水平、病理变化、细胞凋亡情况、NF-κB/NLRP3和Keap/Nrf2信号通路相关蛋白及阳性细胞表达。结果:模型组小鼠睾丸部分生精上皮结构紊乱，出现空泡样变，睾丸间质出现大量炎性浸润；Dio组小鼠睾丸各级病理改变得到有效恢复。与空白组比较，模型组小鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6和MDA水平明显升高(P<0.01),SOD和GSH-Px水平明显降低(P<0.01),睾丸细胞凋亡率明显升高(P<0.01),睾丸NF-κB、NLRP3、ASC、Caspase-1、PLX5622IL-1β、Keap1、Nrf2蛋白及NF-κB、Nrf2阳性细胞表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较，Dio组上述炎症及氧化应激指标水平明显纠正(P<0.01),睾丸细胞凋亡率明显降低(P<0.01),睾丸Nrf2蛋白及阳性细胞表达明显升高(P<0.01),其余蛋白及阳性细胞表达均明显降低(P<0.01)。结论:Dio可改善免疫性睾丸炎小鼠的炎症及氧化应激，机制可能与调控NF-κB/NLRP3和Keap/Nrf2信号通路有关。

目的:研究薯蓣皂苷元(diosgenin, Dio)对小鼠免疫性睾丸炎的作用及机制。方法:小鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、盐酸左氧氟沙星组，以及Dio低、高剂量组GSI-IX，左侧睾丸注射30μL 10%冰醋酸诱导小鼠免疫性睾丸炎。给药21 d后，检测睾丸组织氧化应激及炎性Biocompatible composite因子水平、病理变化、细胞凋亡情况、NF-κB/NLRP3和Keap/Nrf2信号通路相关蛋白及阳性细胞表达。结果:模型组小鼠睾丸部分生精上皮结构紊乱，出现空泡样变，睾丸间质出现大量炎性浸润；Dio组小鼠睾丸各级病理改变得到有效恢复。与空白组比较，模型组小鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6和MDA水平明显升高(P<0.01),SOD和GSH-Px水平明显降低(P<0.01),睾丸细胞凋亡率明显升高(P<0.01),睾丸NF-κB、NLRP3、ASC、Caspase-1、PLX5622IL-1β、Keap1、Nrf2蛋白及NF-κB、Nrf2阳性细胞表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较，Dio组上述炎症及氧化应激指标水平明显纠正(P<0.01),睾丸细胞凋亡率明显降低(P<0.01),睾丸Nrf2蛋白及阳性细胞表达明显升高(P<0.01),其余蛋白及阳性细胞表达均明显降低(P<0.01)。结论:Dio可改善免疫性睾丸炎小鼠的炎症及氧化应激，机制可能与调控NF-κB/NLRP3和Keap/Nrf2信号通路有关。

与DNA相关的部分疾病,比如癌症,脓毒症,银屑病等,严重影响Barasertib着人们的身体和精神健康。在这些疾病的治疗中,DNA有重要作用。比如递送质粒DNA(p DNA)可以治疗由基因突变导致的癌症,结合细胞游离DNA(cf DNA)可以减轻炎症。阳离子聚合物具有结合DNA的能力,并且其DNA结合能力可以调控。利用阳离子聚合物结合DNA治疗疾病有望克服临床治疗方式的不足。同时阳离子聚合物制备方法多样,可以根据疾病调节阳离子聚合物的性能设计最佳给药方式。本论文根据DNA相关疾病的治疗难点设计不同给药方式的阳离子聚合物结合DNA实现疾病的治疗。癌症是调节细胞增殖和凋亡的DNA发生突变造成的疾病。递送p Cas9-survivin可以切断癌症中过表达的survivin基因来治疗癌症。乙醇胺修饰的聚甲基丙烯酸缩水甘油酯(PGEA)已被证明可递送p DNA治疗肿瘤。为了提高PGEA的转染治疗A549肺癌,设计了体内注射甘露糖功能化PGEA(GM)递送p Cas9-survivin的方案。GM中的甘露糖单元可以通过甘露糖受体促进A549细胞的转染。GM结合p Cas9-survivin在细胞内释放可以表达出Cas9蛋白切断survivin基因使A549细胞凋亡。体外实验表明,GM能结合p DNA并在细胞内释放p DNA。同时GM具有良好的吞噬效果、转染性能和生物安全性。GM递送p Cas9-survivin抑制了A549细胞的增殖,并在动物实验中表现出了良好的抑瘤效果。这说明GM结合p DNA被A549细胞内吞后可以释放p DNA提高转染。脓毒症是由微生物入侵导致全身cf DNA升高的炎症性疾病。全身cf DNA的增多是炎症反应的重要因素。所以治疗药物需要通过体内注射抑制体内细菌和结合cf DNA抗炎。妥布霉素是一种对革兰氏阴性菌杀伤效果非常好的抗生素,但是妥布霉素无法结合cf DNA来抗炎。妥布霉素有多个氨基,通过氨基环氧开环反应能得到支化妥布霉素基阳离子聚合物(HPT)。与线性结构相比,HPT的支化结构DNA结合能力更强。HPT有希望应用于体内cf DNA导致的疾病。HPT中的妥布霉素单元可能杀死大部分革兰氏阴性菌。同时HPT的阳离子性能有望结合cf DNA抗炎。与妥布霉素相比,HPT有与之相近的抗菌性能,同时具有DNA结合能力和抗炎效果。在大肠杆菌脓毒症模型的治疗中,HPT能有效杀伤大肠杆菌,结合cf DNA抑制炎症,降低组织损伤。这说明HPT能在高效杀菌的同时结合cf DNA清除炎症治疗脓毒症。银屑病是由cf DNA增多引起皮肤增厚的炎症性皮肤病。当前的微针给药能克服皮肤增厚导致药物渗透困难的问题,但是难以结合cf DNA抗炎。阳离子聚合物由于毒性和力学性能的原因,在微针方面研究较少,所以需要一种能结合cf DNA的阳离子聚合物微针实现对银屑病的治疗。壳聚糖分子量高,生物相容性好,有利于制成力学性能优良的微针来实现经皮给药,但是壳聚糖的DNA结合能力需要提高。将双氰胺修饰到壳聚糖上可以得到双胍壳聚糖(BGC),通过比较双胍含量与DNA结合效率、生物安全性和抗炎效果之间的关系,发现双胍含量为20%的壳聚糖(BGC2)综合性能最好。由BGC2制成的微针(BGC2-MNs)能结合cf DNA,抑制炎症Medical care,对银屑病小鼠有良好的治疗效果。这说明BGC2-MNs能穿过皮肤屏障,结合cf DNA清除炎症治疗银屑病。综上所述,本论文根据不同疾selleck Smoothened Agonist病治疗方式损伤健康组织的难点,设计了阳离子聚合物递送和结合DNA治疗疾病的方法,根据注射和微针的给药形式制备不同性能的阳离子聚合物实现疾病的治疗。分别取得了结合p DNA被A549细胞内吞后释放p DNA提高转染,杀菌并结合体内cf DNA治疗脓毒症以及微针穿过皮肤屏障并结合cf DNA治疗银屑病等进展。本论文探索了阳离子聚合物与DNA的结合能力之间的关系,为阳离子聚合物从DNA层面治疗相关疾病提供了新方法。

目的:通过对草乌进行性状学标志物研究、化学标志物研究与生物学标志物研究,确定草AY-22989 MW乌的质量标志物,为草乌的深入研究以及建立科学的质量评价体系提供依据。方法:1.通过眼观、手摸、鼻闻、口尝等鉴定方法对草乌进行形状、大小、颜色、表面特征、质地、折断面、气、味等方面的性状鉴定研究,确立草乌的宏观性状学标志物;应用显微镜技术对草乌粉末特征进行观察其形状、大小(长度、直径)、颜色、细胞内含物和细胞壁,并测量、拍照记录,明确草乌的微观性状学标志物;2.运用小effective medium approximation鼠急性毒性实验,确定0%和100%估计致死量(Dmin、Dmax)、LD_(50)及其95%可信区间,采用小鼠热板实验和二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验进行草乌抗炎镇痛药效学实验,再利用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)技术,检测草乌抗炎镇痛实验的入血成分,建立草乌的化学标志物;3.使用DNA条形码(DNA barcoding)技术和植物基因组提取试剂盒对草乌与其近缘种进行DNA提取、PCR扩增、电泳GDC-0973半抑制浓度检测DNA质量、纯化、测序,再利用Codon Code Aligner17.0、MEGA 7.0等软件进行数据分析,并采用邻接法(Neighbor-Joining Tree)构建系统发育树,建立草乌的生物学标志物。结果:1.草乌性状学标志物的研究中,草乌具有不规则长圆锥形,稍弯曲,长1.5～8.1cm,直径0.4～2.5cm,表面颜色为灰褐色或者黑棕褐色,表面皱缩,具纵皱纹、点状须根痕和若干瘤状侧根,顶端有残留茎及少量不定根残基,部分顶端一侧具枯萎的芽,另一侧具圆形或扁圆形不定根残基。质坚硬,断面呈灰白色或者暗灰色,具裂隙,形成层环纹有多角形、类圆形,髓部较大或中空。气微,味辛辣、麻舌,即以上特征可制定为草乌的宏观性状学标志物;通过显微鉴定分析,其中石细胞呈无色或者淡黄色,与后生皮层细胞连结的为棕色,具有多种形状,呈类方形、长条形、类长方形、三角形等,部分延长至形成了纤维状,直径18～139μm,长115～274μm。壁厚薄不一,层纹明显,有的内含棕色物;在偏光显微镜下呈亮黄白色,即以上特征可制定为草乌的微观性状学标志物。2.通过小鼠急性毒性实验,得出Dmin为0.38g/kg,Dmax为1.60g/kg,LD_(50)为0.681g/kg,及其95%可信区间结果为0.510～0.863g/kg。依据急性毒性实验,采用热板法和耳廓肿胀法进行了草乌的抗炎镇痛药效学实验,并分析了草乌入血成分,初步确定了草乌功效的化学标志物,即乌头碱、次乌头碱、新乌头碱。3.通过DNA barcoding分析研究,样品均能成功提取出DNA,ITS、ITS2、psb A-trn H、mat K、rbc L等5条序列均能扩增出目的片段且能获得较高质量的测序序列和序列峰图。从序列比对、遗传距离考察结果来看,乌头属种内几乎无变异,ITS、ITS2、psb A-trn H、mat K、rbc L序列种内遗传距离平均值分别为:0.000、0.2528、0.000、0.000、0.000;种间遗传距离平均值分别为0.8270、4.741、1.425、5.9150、1.4257;依据已有乌头属药材序列及Genbank数据库中相关序列,通过NJ系统进化树分析发现,在matk序列系统发育树中,草乌单分为一枝,与其它乌头属药材序列可分辨,即matk序列为草乌的生物学标志物。结论:1.通过宏观性状学标志物研究和微观性状学标志物研究,梳理了草乌性状与显微特征,为草乌标准制定提供了参考;2.从草乌化学标志物研究中,草乌传统功效的化学成分为乌头碱、次乌头碱、新乌头碱,明确了药效物质基础,为草乌质量评价提供了理论依据。3.在草乌生物学标志物的研究中,确定草乌与其它乌头属药材鉴别的序列为matk序列,为草乌与其近缘物种从DNA分子水平鉴别提供了科学依据。

目的：探讨补肾祛瘀活血汤联合氯沙坦治疗气虚血瘀型慢性肾小球肾炎(CGN)疗效及对血清胱抑素C(Cys-C)、α1-微球蛋白(α1-MG)水平和T淋巴细胞亚群的影响。方法：选取2020年3月～2022年3月本院收治的136例气虚血瘀型CGN患者，采用随机数字表法分为联合组68例和西药组68例。西药组采用氯沙坦治疗，联合组在西药组的基础上联合补肾祛瘀活血汤治疗，两组均连续治疗3个月。治疗结束后，比较两组临床疗效。比较两组治疗前后中医证候积分、肾功能指标[24h尿蛋白定量(UPQ)、血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、Cys-C、α1-MG]和T淋巴细胞亚群变化。结果：治疗后，联合组总有效率(95.59%)高于西药组(83.82%),差异具有统计学意义(P<0.05)LXH254浓度。治疗后，两组患者中医证候积分及24h UPQ、血清Cr、BUN、Cys-C、α1-MG较治疗前下降(P<0.05),且联合组中医证候积分及24h UPQ、血清Cr、BUN、Cys-C、α1-MG较低(P<0.05)。治疗后，两组患者CD_4~+和CD_4~+/CD_8LY2157299体外~+较治疗前上升、CD_8~+较治疗前下降(P<0.05),且联合组CD_4~+和CD_4~+/CD_8~+较高、CD_8~+较低(P<0.05)。结论：补肾祛瘀活血汤联合solid-phase immunoassay氯沙坦治疗气虚血瘀型CGN,可改善患者肾功能，有效下调血清Cys-C、α1-MG表达水平，增强机体免疫功能，提高患者临床疗效。

目的:探讨一种利用光谱CT碘定量的影像学方法评估分肾功能并与核素~(99m)锝-二亚乙基三胺五乙酸(~(99m)Technetium-diethylene triaminepentaacetic acid,~(99m)Tc-DTPA)肾动态显像Gates法测量的肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)进行对比,发掘其潜在临床应用价值。方法:回顾性分析山西医科大学第一医院2021年1月至2021年9月两周内先后进行光谱CT肾脏多期增强及~(99m)Tc-DTPA肾动态显像的病例101例。光谱CT肾脏多期增强扫描采用标准的腹部三期增强方案。手动勾画光谱CT参数肾脏体积(volume,V)、平均CT值(Hounsfield Unit,HU)、平均碘浓度值(iodine concentration,IC),并将平均碘浓度值与肾脏体积相乘得到碘对比剂累积量K值,同时使用简化的“two-point Patlak plot”法计算得到分肾CT清除率。根据~(99m)Tc-DTPA肾动态显像Gates法肾小球滤过率参考值Gates GFR,将201个肾脏分为分肾功能正常组(Gates GFR≥40m L/min)、分肾功能轻中度受损组(20m L/min≤Gates GFR<40m L/min)及分肾功能重度受损组(Gates GFR<20m L/min)三组。采用单因素方差分析或Kruskal–WallPLX4032is H检验比较光谱CT各参数三组间的差异,并将各参数与肾动态显像所得Gates GFR做Spearman相关性分析。绘制受Chemicals and Reagents试者工作特性(Receiver operating characteristic,ROC)曲线评价分肾CT清除率区分分肾功能正常和分肾功能轻中度受损,以及区分分肾功能轻中度受损和分肾功能重度受损的诊断性能。并绘制Bland-Alterman图分析分肾CT清除率与Gates GFR之间的一致性。结果:光谱CT所得肾脏体积V、平均动脉期CT值HU(t1)、平均静脉期CT值HU(t2)、平均动脉期碘密度值IC(t1)、平均静脉期碘密度值IC(t2)、动脉期肾脏碘对比剂累积量K(t1)、静脉期肾脏碘对比剂累积量K(t2)及分肾CT清除率三组之间的差异均具有统计学意义(F/Z=47.997、48.572、45.284、48.596、49.628、70.152、91.880及91.892,均P(27)0.001)。V、HU(t1)、HU(t2)、IC(t1)、IC(t2Tofacitinib配制)、K(t1)、K(t2)及分肾CT清除率均与Gates GFR相关(r=0.538、0.468、0.476、0.486、0.504、0.683、0.743、0.752,均P<0.001)。分肾CT清除率区分分肾功能正常与轻中度受损的曲线下面积为0.760,灵敏度及特异度分别为0.736、0.698,界值为450mg;分肾CT清除率区分分肾功能轻中度受损与重度受损的曲线下面积为0.928,灵敏度及特异度分别为0.463、0.934,界值为240mg。Bland-Alterman图显示有8个样本即3.96%(<5%)的样本超出了95%的一致性界限范围,误差暂可接受。结论:光谱CT各参数均与~(99m)Tc-DTPA肾动态显像Gates GFR正相关,可以反映分肾功能。其中光谱CT分肾CT清除率与Gates GFR相关性最高并且一致性好,可以实现分肾功能的定量分级,具有潜在临床应用价值。

目的：基于贝叶斯网状Meta分析评价6种针灸疗法治疗原发性痛经（PD）的临床疗效与安全性。方法：计算机检索PubMed、Web of science等数据库，搜集6种常见针灸疗marine microbiology法（针刺、针灸、艾灸、温针灸、电针及穴位埋线）治疗PD的随机对照试验研究文献，检索时限为2000年1月1日—2020年9月30日。由2位研究者独立筛选文献、提取数据和评价纳入研究的偏倚风险。采用R软件进行数据分析，以Stata16.0软件绘制网状证据图。结Enasidenib果：共纳入98项随机对照试验研究，总计7 410例PD患者，涉及8种干预措施。所有结局指标均显示随机效应模型整体拟合度较好，可以在一致性模型下进行网状Meta分析。在有效率方面，针刺、艾灸、针灸、温针灸、电针、穴位埋线均优于空白或安慰剂、非甾体类抗炎药，针灸、温针灸均优于针刺及艾灸，有效率排序第一为温针灸。在疼痛缓解方面，针灸的效果优于针刺及艾灸，除艾灸与电针外，其余干预措施缓解疼痛的效果均优于非甾体类抗炎药，缓解疼痛效果排序第一为针灸。在安全性方面，各干预措施之间比较，差异无Alpelisib统计学意义，均表现出良好的安全性。结论：6种针灸疗法治疗PD的临床疗效均优于非甾体类抗炎药，针灸与温针灸可成为临床治疗PD的首选疗法。

目的:幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的老年患者胃黏膜萎缩和肠化发生率较高,这也是胃癌发生的重要危险因素。常规胃镜检查或检查前准备不充分,极易出现漏诊。因此,通过对链霉蛋白酶颗粒在Hp感染老年患者精查胃镜中有效性、安全性及耐受性的分析,评估链霉蛋白酶颗粒在Hp感染的老年患者精查胃镜中的应用价值,为临床推广应用提供参考。方法:选取2022年1月至2023年3月于宜春市人民医院消化内科住院部及门诊的194名Hp感染老年患者为研究对象,随机分为两组:试验组92人,检查前20-60min用温开水70 获悉更多mL溶解链霉蛋白酶颗粒20000 U+1 g碳酸氢钠及二甲硅油散水悬液口服,检查前10 min予盐酸达克罗宁胶浆1支(10 mL)含服;对照组89人,仅服用二甲硅油散及盐酸达克罗宁胶浆。通过精查胃镜检查,观察患者胃黏膜清晰度、胃黏膜清洁度、胃黏膜形态表现、萎缩、肠化及早期胃癌检出率;记录胃镜检查过程中冲洗次数、胃镜操作时间、医生对胃镜检查效果满意度、患者用药后不良反应、患者再次重复意愿等指标,通过spss 27.0软件进行数据统计分析。结果:内镜下胃黏膜视野清晰度总评分、胃内各部位黏膜(除贲门部)视野清晰度评分、胃黏膜整体视野清洁度评分,试验组均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);胃黏膜形态上、萎缩和肠化状态判定、微小病灶在微表面形态、微血管结构及边界判定上及早期胃癌检出率方面,试验组均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);精查胃镜冲洗次数、精查胃镜检查时间、医生对精查胃镜检查效果满意度,试验组均优于对Software for Bioimaging照组,差异有统计学意义(P<0.05);患者用药后的不良反应发生率,差异无统计学意义(P>0.05);首次进行精查胃镜患者重复原方案的意愿,试验组明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.链霉蛋白酶颗粒在Hp感染老年患者精查胃镜中祛泡祛黏液效果全面,可以提高患者胃内视野清晰度、清洁度,增加胃内微小病变、癌前病变及早期胃癌的检出率,有效缩短精查时间,提高患者满意度。2.链霉蛋白酶颗粒是一种理想、高效、安全Alpelisib的胃粘膜清洁剂,在Hp感染老年患者精查胃镜检查中具有较高的应用价值,值得临床推广应用。