S6 kinase 信号通路

背景及目的:肺腺癌是非小细胞肺癌中最常见的亚型,在全世界范围内导致每年超过50万的死亡。尽管目前在分子诊断和靶向治疗领域取得了一些进展,肺腺癌患者的总体预后仍然不容乐观,大多数肺腺癌患者在初诊时即为局部晚期或已经MC3临床试验发生远处转移。铁死亡是由Dixon等人最先提出的有别于自噬和细胞凋亡的一种细胞死亡,其主要特征为铁依赖和活性氧所致的细胞变化,如线粒体嵴的消失、线粒体膜的破裂和浓缩,其机制主要是膜上的脂质过氧化使得膜失去了选择渗透性。近年来,铁死亡逐渐被认为是清除恶性细胞的自适应功能,在抑制肿瘤的发生发展中发挥重要作用。本研究通过生物信息学方法分析了铁死亡相关基因在肺腺癌中的表达情况,并基于这些基因构建了能够预测肺腺癌患者预后的诺曼图,为肺腺癌患者的预后分层和个体化治疗提供新的方法和观点。方法:从公共数据库肿瘤基因图谱(TCGA)中获得肺腺癌患者的基因表达谱、生存资料及临床资料。比较铁死亡基因在肿瘤组织和癌旁正常组织中的表达量,将差异表达的基因纳入残差网络中进行训练,确定了由10个铁死亡基因构成的风险评分公式,根据得分将样本划分为高风险组和低风险组,通过Kaplan-Meier法比较两风险组间的预后差异。利用单因素COX回归和多因素COX回归确定两风险组间的风险比以及风险分组作为预后的预测因子的独立性。根据回归结果构建诺曼图,通过受试者工作特征曲线(ROC)、C指数、校准度分析曲线和临床决策曲线评价诺曼图的预测效能和稳定性。应用基因功能富集分析进一步探索两风险分组之间的生物学差异。结果:(1)在训练集中得到由CYBB,FURIN,DPP4,ETV4,RRM2,NR4A1,EPAS1,GCLC,TNFAIP3和AKR1C1构成的评分公式,根据得分将样本分为高风险组和低风险组,两组间预后有显著差异(p<0.0001),并在验证集中证实此差异(p=0.004)。(2)将风险分组和临床资料做Excisional biopsy单因素COX回归和多因素COX回归,低风险组相对于高风险组的风险更低,在单因素COX回归中的风险比为0.23(p<0.0001),在多因素COX回归中的风险比为0.26(p<0.0001)。(3)应用风险分组、p T分期、p N分期和肿瘤分期构建诺曼图,ROC曲线在训练集中在第1年、第3年和第5年的曲线下的面积(AUC)值为0.81、0.82和0.78;在验证集中第1年、第3年和第5年的AUC值为0.77、0.73和0.70。(4)通过基因功能富集分析发现高风险组在细胞增殖和侵袭的通路更加活跃,低风险组主要富集在和细胞Galunisertib体内清除及免疫反应的通路,高风险组的肿瘤纯度显著高于低风险组的肿瘤纯度(p<0.001)。两风险组间多种免疫细胞浸润程度有显著差异,肿瘤微环境差别较大。结论:(1)本研究通过生物信息学方法获得肺腺癌患者的风险分组模型,该模型是能够预测肺腺癌患者预后的独立因素。(2)从基因功能富集分析结果来看,高风险组较低风险组有更高的侵袭性,为风险分组模型提供分子生物学理论基础。(3)由风险分组及临床资料构建的诺曼图具有重要的预测价值,能够识别肺腺癌患者的风险并预测其预后。

背景:急性心肌梗死(AMI)是全球主要致死性疾病之一。随着人口老龄化的加剧,AMI发病率将持续升高。经皮冠状动脉介入治疗、静脉溶栓等手段显著降低了 AMI患者的死亡率,但再灌注过程反而会进一步加重心肌损伤,即心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)。MI/RI可导致心律失常、心脏骤停、心肌顿抑等并发症,影响心肌梗死面积。因此,预防和治疗MI/RI是改善AMI患者预后的关键。MI/RI发生机制复杂,主要涉及氧化应激、炎症反应、细胞凋亡等病理生理过properties of biological processes程。芦荟苷具有抗氧化应激、抗炎症反应、抗肿瘤等生物活性,在心血管疾病、肝脏损伤等疾病模型中发挥着保护作用。目前,芦荟苷在MI/RI中的作用和机制尚不明确。目的:本文通过构建心肌细胞模拟缺血/再灌注损伤(SI/RI)模型和大鼠MI/RI模型,探讨芦荟苷在MI/RI中的作用及其可能的机制。方法:1.芦荟苷对心肌细胞SI/RI模型的保护作用及其机制。芦荟苷预处理6 h,三气低氧培养箱缺氧4 h,复氧8 h,建立心肌细胞SI/RI模型。不同浓度(0-100μM)芦荟苷分别处理正常心肌细胞和心肌细胞SI/RI模型,MTT法测定细胞活力,根据结果选择芦荟苷最适浓度。将细胞分组如下:①control组;②SI/R组;③SI/R+Alo50μM组。在各组心肌细胞中用流式细胞分析仪测定细胞凋亡;测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量;超氧化物歧化酶(SOD)活性;测定活性氧(ROS)含量、丙二醛(MDA)含量、白介素-6(IL-6)含量、白介素-1β(IL-1β)含量和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;蛋白质印迹法(Western blot)测定Bcl-2、Bax、Nrf2和HO-1蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)测定 TNF-α、IL-6、IL-1β、Nrf2 和 HO-1 mRNA水平。应用小干扰 siRNA沉默Nrf2的表达,进一步探讨芦荟苷是否通过调控Nrf2/HO-1信号通路发挥对心肌细胞SI/RI模型的保护作用,实验分组为:①control组;②SI/R组;③SI/R+Alo组;④SI/R+Alo+si-con组;⑤SI/R+Alo+si-Nrf2组。检测心肌细胞的细胞活力、LDH释放量、细胞凋亡情况、SOD活性、MDA含量、ROS含量、IL-6、IL-1β、TNF-α含量。2.在大鼠MI/RI模型中进一步验证芦荟苷的保护作用和机制。雌性 Wistar 大鼠随机分为 sham 组、model 组、Alo 20 mg/kg 组和 Alo 40 mg/kg组,Alo+MLselleck385组(Alo 40 mg/kg,ML385 30 mg/kg)。分别给予芦荟苷或相同体积PBS进行灌胃,每日1次。在灌胃给药前1h腹腔注射ML385,每日1次,均连续给药7d。在手术当天,末次给药后1h,对Wistar大鼠的冠状动脉左前降支中上1/3处用手术线进行结扎,缺血时间30 min,再灌注时间4 h,建立大鼠MI/RI模型,观察芦荟苷对大鼠MI/RI的保护作用。测定各组大鼠的心律失常潜伏期、心律失常持续时间、ST段电势差;测定血清中CK-MB、LDH含量;测定心肌组织SOD活性、MDA含量;氯化三苯四氮唑(TTC)和伊文思蓝(Evans Blue)双染色测定心肌梗死区域面积(IA)、心肌危险区域面积(AAR)、心肌保护区域面积(PA);HE染色观察大鼠心肌组织形态学;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡情况;Western blot检测心肌组织Nrf2和HO-1蛋白表达水平。免疫组化(IHC)检测心肌组织中HO-1蛋白阳性表达水平;RT-qPCR技术检测心肌组织中Nrf2、HO-1 mRNA水平。结果:1.芦荟苷对心肌细胞无明显毒性。在心肌细胞SI/RI模型中,50 μM芦荟苷能够显著提高细胞存活率,选取芦荟苷50 μM作为最佳浓度。2.在心肌细胞SI/RI模型中,芦荟苷预处理能够呈剂量依赖性增加心肌细胞活力,沉默Nrf2后抑制了芦荟苷增加心肌细胞活力的作用。3.在心肌细胞SI/RI模型中,芦荟苷预处理能够减少细胞凋亡,降低Bax蛋PUN30119白表达、升高Bcl-2蛋白表达。沉默Nrf2后抑制了芦荟苷的抗细胞凋亡作用。4.在心肌细胞SI/RI模型中,芦荟苷预处理增加了心肌细胞的SOD活性,显著减少ROS生成,降低LDH释放量和MDA含量。沉默Nrf2后明显抑制了芦荟苷抗氧化应激的作用。5.在心肌细胞SI/RI模型中,芦荟苷预处理显著降低TNF-α、IL-6和IL-1β含量及mRNA水平,沉默Nrf2后抑制了芦荟苷的抗炎作用。6.在心肌细胞SI/RI模型中,芦荟苷预处理显著上调Nrf2及HO-1的表达。7.在大鼠MI/RI模型中,ST电势差升高,TTC和Evans Blue双染色测定心肌梗死面积明显增加。血清中CK-MB、LDH含量升高,表明大鼠MI/RI模型构建成功。芦荟苷预处理能够减小心肌梗死面积,增加心肌保护区面积,降低血清CK-MB、LDH含量。ML385处理后抑制了芦荟苷在大鼠MI/RI模型中的心肌保护作用。8.在大鼠MI/RI模型中,芦荟苷预处理能够增加心肌SOD活性,减少ROS生成,减少MDA含量。ML385处理后抑制芦荟苷在大鼠MI/RI模型中的抗氧化应激作用。9.大鼠MI/RI模型中,TUNEL染色结果显示细胞凋亡率显著增加,芦荟苷能够降低细胞凋亡率活性。ML385抑制了芦荟苷在大鼠MI/RI模型中抗细胞凋亡的作用。10.大鼠MI/RI模型中,芦荟苷预处理可以上调Nrf2、HO-1表达,ML385处理后抑制了芦荟苷上调Nrf2、HO-1表达的作用。结论:1.芦荟苷可以通过抑制细胞凋亡、抗氧化应激、减轻炎症反应,减轻心肌缺血再灌注损伤。2.芦荟苷可以通过激活Nrf2/HO-1信号通路抑制细胞凋亡、抗氧化应激、减轻炎症反应,从而改善心肌缺血再灌注损伤。

目的：观察行气化滞方治疗乳腺增生症的临床疗效及乳腺增生中医分型与血清因子的相关性。方法：选取乳腺增生症患者120例作为治疗组，按辨证分型分为3组，选取健康体检女性40例为对照组。治疗组予行气化滞方加减治疗，4周为1个疗程。结果：肝郁气滞组69例，总有效率为94.20%；痰瘀互结组23例，总有效率为91.30%；冲任失调组28例，总有效率为89.29%；各Liproxstatin-1使用方法组间疗效比较差异无统计学意义（P﹥0.05）。治疗前，MDA水平：冲任失调组﹥痰瘀互结组﹥肝郁气滞组﹥对照组（P﹤0.05）,SOD水平：肝郁气滞组﹥痰瘀互结组﹥冲任失调组﹥对照组（P﹤0.05）,GSH-Px水平：肝郁气滞组﹥痰瘀互结组﹥对照组（P﹤0.05），冲任失调组与对照组比较无统计学差异（P﹥0.05streptococcus intermedius），各证型组T-AOC水平均低于对照组（P﹤0.05），各证型组组间比较无统计学差异（P﹥0.05）。治疗后治疗组MDA水平低于治疗前，SOD、GSH-PX、T-AOC水平均高于治疗前，差异均有统计学意义（P﹤0.05）。结论：FG-4592基于“治乳不离气”理论采用行气化滞方治疗乳腺增生症患者，能够有效减轻患者乳房疼痛，缩小乳房肿块。

建立了同时测定5种不同基质类型化妆品中8种替丁类药物的超高效液相色谱-三重四极杆质谱法（UHPLC-MS/MS）。不同基质类型化妆品样品经水-乙腈（2∶8，体积比）涡旋混匀、超声提取后过滤上机分析。选用YMC-Triart C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,3.0μm），以0.2%甲酸溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱分离，质谱分析采用电喷雾正离子模式和多selleck NMR反应监测模式。实验表明，8种替丁类药物在各自质量浓度范围内线性关系良好，相关系数（r2）为0.997 5～0.998 6，检出限为0.06～0.3μg/L，定量下限为0.2～1.0μg/L。在3个不同加标水平下，水剂类、膏霜类、乳液类、凝胶类和粉剂类样品的平均回收率分别为80.7%～106%、90.1%～102%、82.6%～101%、82.0%～Lab Automation110%和86.6%～101%；相对标准偏差为0.70%～7.9%。该法前处理过程简点击此处单高效，易操作，灵敏度高，适用于上述5种类型化妆品中8种替丁类药物的同时快速定性定量分析。

【目的】构建柑橘黄化花叶病毒（citrus yellow mosaic virus,CYMV）侵染性克隆，为深入研究其分子特性及致病机理打下基础。【方法】利用In-Fusion同源重组技术将分段扩增的CYMV基因组序列与三元表达载体pCY重组连接，构建该病毒1.4倍基因组全Video bio-logging长DNA克隆并开展序列分析。将所获克隆通过农杆菌介导接种尤力克柠檬实生苗，通过分子检测、症状和病毒粒子观察及再嫁接实验鉴定其侵染性。利用所获侵染性克隆接种不同的柑橘品种及草本植物，通过RT-PCR检测确定侵染率，观察不同柑橘品种受侵染后的症状差异。基于侵染性克隆构建ORFⅠ和ORFⅡ分别替换为绿色荧光蛋白基因（green fluorescent protein,gfp）的突变体，分析突变对病毒侵染性的影响。【结果】利用In-Fusion同源重组技术获得CYMV 1.4倍基因组全长DNA克隆7个。其中，CYMV-Raf抑制剂3与已登录GenBank的9个CYMV分离株基因组相应核苷酸序列一致性为90%—100%，与分离株CYMV-SO(AF347695)同源性最高并在遗传进化树上聚为一簇。侵染性鉴定结果表明，CYMV-3接种的14株尤力克柠檬植株中有4株呈RT-PCR阳性，并观察到点状褪绿症状；提取侵染植株系统新叶DNA,PCR扩增获得预期的覆盖CYMV基因组全长的特异性片段；以CYMV-3侵染显症植株为毒源嫁接接种粗柠檬实生苗，通过RT-PCR在90 dpi可检测到CYMV特异性条带；取CYMV-3侵染显症植株的新叶进行固定切片并电镜观察，可见大小约130 nm×30 nm的杆状病毒粒子，说明CYMV-3为CYMV侵染性克隆。将CYMV-3通过农杆菌介导真空浸润接种10个柑橘品种，注射接种5个柑橘品种并进行RT-PCR检测，结果显示前者侵染率为11.11%—100.00%，后者侵染率为63.16%—90.00%，部分柑橘品种出现黄化、花IACS-10759溶解度叶、斑块状黄化等CYMV侵染症状。通过农杆菌介导注射接种本氏烟、玉米、豇豆和高粱，结果显示仅高粱检测到RT-PCR阳性植株，且系统叶片沿叶脉周边出现条状褪绿带，表明CYMV可以侵染高粱。构建了CYMV-3 ORFⅠ和ORFⅡ分别替换为gfp的突变体，通过农杆菌介导注射接种粗柠檬，RT-PCR检测结果均为阴性，且无侵染症状。【结论】成功构建了CYMV的侵染性克隆，通过农杆菌介导注射可高效接种柑橘植株，侵染症状在不同品种上具有差异。

【目的】构建柑橘黄化花叶病毒（citrus yellow mosaic virus,CYMV）侵染性克隆，为深入研究其分子特性及致病机理打下基础。【方法】利用In-Fusion同源重组技术将分段扩增的CYMV基因组序列与三元表达载体pCY重组连接，构建该病毒1.4倍基因组全Video bio-logging长DNA克隆并开展序列分析。将所获克隆通过农杆菌介导接种尤力克柠檬实生苗，通过分子检测、症状和病毒粒子观察及再嫁接实验鉴定其侵染性。利用所获侵染性克隆接种不同的柑橘品种及草本植物，通过RT-PCR检测确定侵染率，观察不同柑橘品种受侵染后的症状差异。基于侵染性克隆构建ORFⅠ和ORFⅡ分别替换为绿色荧光蛋白基因（green fluorescent protein,gfp）的突变体，分析突变对病毒侵染性的影响。【结果】利用In-Fusion同源重组技术获得CYMV 1.4倍基因组全长DNA克隆7个。其中，CYMV-Raf抑制剂3与已登录GenBank的9个CYMV分离株基因组相应核苷酸序列一致性为90%—100%，与分离株CYMV-SO(AF347695)同源性最高并在遗传进化树上聚为一簇。侵染性鉴定结果表明，CYMV-3接种的14株尤力克柠檬植株中有4株呈RT-PCR阳性，并观察到点状褪绿症状；提取侵染植株系统新叶DNA,PCR扩增获得预期的覆盖CYMV基因组全长的特异性片段；以CYMV-3侵染显症植株为毒源嫁接接种粗柠檬实生苗，通过RT-PCR在90 dpi可检测到CYMV特异性条带；取CYMV-3侵染显症植株的新叶进行固定切片并电镜观察，可见大小约130 nm×30 nm的杆状病毒粒子，说明CYMV-3为CYMV侵染性克隆。将CYMV-3通过农杆菌介导真空浸润接种10个柑橘品种，注射接种5个柑橘品种并进行RT-PCR检测，结果显示前者侵染率为11.11%—100.00%，后者侵染率为63.16%—90.00%，部分柑橘品种出现黄化、花IACS-10759溶解度叶、斑块状黄化等CYMV侵染症状。通过农杆菌介导注射接种本氏烟、玉米、豇豆和高粱，结果显示仅高粱检测到RT-PCR阳性植株，且系统叶片沿叶脉周边出现条状褪绿带，表明CYMV可以侵染高粱。构建了CYMV-3 ORFⅠ和ORFⅡ分别替换为gfp的突变体，通过农杆菌介导注射接种粗柠檬，RT-PCR检测结果均为阴性，且无侵染症状。【结论】成功构建了CYMV的侵染性克隆，通过农杆菌介导注射可高效接种柑橘植株，侵染症状在不同品种上具有差异。

目的 探讨红外光电离子辐射联合心理护理干预在乳腺小叶增生症患者中的应用效果。方法 选择2019年1月—2021年1月医院收治的乳腺外科门诊治疗的93例乳腺小叶增生症患者为研究对象。根据组间基本资料匹配原则分为对照组46例和观察组47例。对照组采用常规护理，观察组在对照组基础上采用红外光电离子辐射联合心理护理干预。比较两组中医症状积分、心理状态、生活质量、不良反应及半年内复发率。结果 采用红外光电离子辐射联合心理护理干预后，两组患者乳房肿块、乳房胀痛、月经情况、胸闷太息评分均降低，但观察组明显低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。护理干预Wnt-C59核磁前两组患者心理状态评porous medium分及生活质量总评分比较差异无统VX-765纯度计学意义（P>0.05）；干预后，观察组患者心理状态评分低于对照组，生活质量总分高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 红外光电离子辐射联合心理干预能有效改善乳腺小叶增生症患者临床症状与心理状态，并能提高生活质量，降低复发风险。

目的：探讨安罗替尼对卡瑞利珠单抗在治疗进展期非小细胞肺癌（NSCLC）中引起反应性毛细血管增生症（RCHs）的缓解作用。方法：纳入136例使用卡瑞利珠单抗治疗的进展期NSCLC患者，随机分为卡瑞利珠单抗+安罗替尼组（观察组，73例）和卡瑞利珠单抗+安慰剂组（对照组，63例）。两组均随访25周，每用药2个周期（42天）评价一次疗Z-IETD-FMK研究购买效和安全性，主要指标包括发病时间、持续时间和严重程度。结果：79例（58.09%）患者出现RCHs，其中观察组31例（42.47%），对照组48例（76.19%），观察组RCHs发生率显著低于对照组，差异有统计学意义（Pantibiotic-related adverse events<0.001）。观察组RCHs的出现时间迟于对照组，消退时间则短于对照组，差异有统计学意义（P<0.001）。两组RCHs严重程度比较，差异无统计学意义（P=0.721）。结论：RCHs是卡瑞利珠单抗治疗的进展期NSCLC患者中常见的皮肤毒性反应，联合安罗替MS-275尼可降低卡瑞利珠单抗相关RCHs的发生率并诱导其快速消退。

【目的】探究肺癌患者化疗与脑区血脑屏障通透性及认知水平的关系,为肺癌患者化疗相关认知障碍寻找神经病理解剖定位。【材料与方法】前瞻性收集昆明医科大学第三附属医院2021年4月-2022年5月共89个参与者的临床资料和颅脑磁共振动态增强影像资料,参与者包括肺癌化疗组31名、肺癌非化疗组36名、基线情况相似的健康对照组22名。在磁共振扫描前患者完成认知水平评估。采用Patlak药代动力学模型计算BBB通透性。测量各参与者双侧额中叶、海马旁回、前扣带和旁扣带回、内侧和旁扣带回、后扣带回、楔前叶脑区的BBB通透性。比较各组间各脑区的BBB通透性及认知水平。将单因素线性回归分析有统计学意义的因素纳入多因素线性回归以确立影响脑区BBB及认知功能的独立因素。分析脑区BBB通透性与蒙特利尔认知评估量表(Mo CA)评分、简易精神状态检查量表(MMSE)评分的相关性。【结果】相比于健康对照组或肺癌非化疗组,肺癌化疗组右楔前叶的BBB透性均显著性增高(Z=2.756,P=0.018;Z=2.480,P=0.039),肺癌非化疗组与健康对照组右楔前叶BBB通透性的差异无统计学意义(Z=0.593,P=1.000)。相比于健康对照组,肺癌化疗组左后扣带回的BBB透性显著性增高(Z=2.612,P=0.027),而肺癌非化疗组左后扣带回的BBB通透性与之差异无统计学意义(Z=2.054,P=0.120);与肺癌非化疗组相比,肺癌化疗组左后扣带回的BBB通透性差异SAHA半抑制浓度无统计学意义(Z=0.703,P=1.000)。相比于健康对照组或肺癌非化疗组,肺癌化疗组的Mo CA评分均显著性减低(Z=-3.640,P=0.001;Z=-2.686,P=0.022),肺癌非化疗组与健康对照组间Mo CA评分差异无统计学意义(Z=-1.317,P=0.563)。相比于健康对照组,肺癌化疗组的MMSE评分显著性降低(Z=-2.466,P=0.041),而肺癌非化疗组MMSE评分与之差异无显著性(PEG300Z=-0.430,P=1.000),肺癌化疗组与肺癌非化疗组的MMSE差异无统计学意义(Z=-2.330,P=0.059)。肺癌化疗组患者认知障碍表现为视觉空间执行功能、延迟记忆力、抽象能力及注意力的下降(P<0.05)。在肺癌患者中,单因素及多因素线性回归分析表明化疗、BMI、肿瘤位置对右楔前叶BBB通透性的影响有统计学意义(P<0.05),化疗、学历水平对Mo CA评分的影响有统计学意义(P<0.05)。单因素与多因素线性回归表明各因素对左后扣带回的影响无统计学意义(P>0.0CRISPR Knockout Kits5)。肺癌化疗组右楔前叶BBB通透性与Mo CA评分、MMSE评分呈负相关(r=-0.539,P=0.002;r=-0.417,P=0.020)。【结论】1、化疗会引发肺癌患者右楔前叶BBB功能及认知功能损伤。2、右楔前叶BBB通透性与肺癌化疗患者认知水平呈负相关。

造血系统损伤可能会导致骨髓造血功能异常,引发骨髓增生异常综合征、再生障碍性贫血、白血病等血液系统疾病。随着电离辐射(Ionizing radiation,IR)在医学诊断和肿瘤放疗领域的广泛应用,人类意外暴露的风险不断Ipatasertib分子式增加。放射性接触是导致造血功能异常的重要因素,其主要原因是IR诱导大量活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的产生,从而导致造血系统内的细胞和蛋白质受到损伤。目前,治疗方法主要依赖于造血生长因子和干细胞移植。然而,高水平的ROS病理微环境限制了细胞因子和干细胞的功能发挥。基于现状,我们提出了将抗氧化治疗与细胞因子、干细胞治疗相结合的策略,旨在改善氧化微环境的同时刺激造血,促进造血系统的恢复。本研究首先以刺激响应性高分子材料为药物载体,联合抗氧化治疗和造血生长因子改善辐射诱导的造血系统损伤。鉴于辐射后病理微环境ROS水平较高,本研究引入可在过氧化氢(Hydrogen peroxide,H2O2)下发生断裂的过氧草酸酯键,合成了三臂聚(乳酸-共乙醇酸)-聚(乙二醇)(3s-PLGA-PO-PEG),由此构建了ROS响应性促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)纳米递送系统(EPO NPs)。该递送系统一方面提高了生物大分子药物生物利用度,延长EPO体内作用时间;另一方面清除体内过量ROS,避免了进一步氧S63845小鼠化损伤,并提供更好的药物作用环境。研究构建了辐射诱导造血系统损伤模型,EPO NPs可明显降低IR诱导的骨髓细胞ROS水平,重建骨髓造血。该研究结果表明,抗氧化治疗和造血生长因子的联合应用可多方位促进造血恢复,是一种有前景的治疗策略。本研究进一步将抗氧化治疗与干细胞移植相结合。间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)具有多重功能,能够迁移至损伤部位,促进造血细胞增殖分化,支持造血重塑,并通过分泌多种细胞因子发挥免疫调节作用,促进损伤组织的修复。研究使用表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin-3-gallate,EGCG)和镁离子(Mg2+)在MSCs表面形成金属有机框架涂层(E-Mg@MSC),增强MSCs对不利环境的抵抗力。此外,E-Mg涂层通过EGCG清除acute alcoholic hepatitis过量ROS,并提供镁来促进MSCs的成骨分化,从而创造了有利的修复条件。同时,E-Mg@MSC能够持续分泌造血生长因子,并调节MSCs向辐射敏感组织迁移。体内实验显示,E-Mg@MSC显著加快了造血系统的恢复速度,并保护了多个器官免受IR损伤。进一步的机制探索发现,辐射损伤的降低可能与E-Mg@MSC减少IR触发的ROS、细胞凋亡和铁死亡有关。研究结果表明该系统提供了一种多功能涂层策略,可用于细胞表面工程推进辐射损伤的治疗。总之,本研究针对辐射诱导造血损伤的ROS微环境,结合目前细胞因子和干细胞移植的局限性,设计了 ROS响应性载体递送细胞因子或干细胞,从而改善氧化微环境,促进造血恢复,为辐射诱导的造血系统损伤提供新的治疗思路。