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目的 探讨生理盐水纱布联合保鲜膜包扎法在去除Ⅱ度烧伤患者供皮区创面异种(猪https://www.selleck.cn/products/jnj-42756493-erdafitinib.html)脱细胞真皮基质敷料中的效果。方法 采用前瞻性随机对照观察，选取2021年1月—2021年6月在海南省人民genetic service医院烧伤与皮肤修复外科实施刃厚皮片移植修复手术的60例患者为研究对象，所有患者供皮区底层均采用异种脱细胞真皮基质敷料覆盖；术后1周打开供区外层包扎敷料。采用随机数生成器将所有研究对象随机均分为试验组(n=30)和对照组(n=30NSC 125973纯度)。试验组应用生理盐水纱布联合保鲜膜包扎法，去除覆盖于供皮区创面的异种脱细胞真皮基质敷料，对照组采用保鲜膜包扎法去除供皮区创面异种脱细胞真皮基质敷料。观察两组供皮区创面异种脱细胞真皮基质脱落时间、疼痛程度及患者的满意度。结果 (1)试验组和对照组创面异种(猪)脱细胞真皮基质脱落时间分别为8(6,8)h和36(30,48)h,试验组的脱落时间明显短于对照组，组间差异具有统计学意义(P<0.001);(2)试验组的疼痛率(23.33%)明显低于对照组(86.67%),组间差异具有统计学意义(P<0.001);(3)试验组的满意率为100.00%,明显高于对照组的70.00%,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 应用生理盐水纱布联合保鲜膜包扎法去除供皮区创面脱细胞真皮基质敷料，可促进Ⅱ度烧伤创面愈合，缩短供皮区创面生物敷料覆盖时间，减轻患者痛苦，减少护理工作量，降低患者住院率，提高患者对医护工作的满意度。

目的 探讨左归降糖解郁方治疗糖尿病并发抑郁症的可能作用机制。方法 60只大鼠随机分为正常组、模型组、无翅型MMTV整合位点家族成员5a (Wnt5a)激动剂组、左归降糖解郁方组、左归降糖解郁方+Wnt5a抑制剂组，每组12只。除正常组外，其余各组大鼠采用高脂饲料饲养、链脲佐菌素注射和慢性温和不可预知应激联用法建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型。造模成功后Wnt5a激动剂组大鼠给予双侧海马立体定位注射Wnt5a激动剂Foxy-5各5μl，连续7天；左归降糖解郁方组给予左归降糖解郁方20.52 g/(kg·d)灌胃；左归降糖解郁方+Wnt5a抑制剂组进行灌胃给药和双侧海马立体定位注射Wnt5a抑制剂Box5，给药剂量和注射方法同上。正常组和模型组给予10 ml/(kg·d)生理盐水灌胃。各组灌胃均连续4周。干预结束后采用强迫游泳实验(不genetic information动时间)和旷场实验(活动次数)评价大鼠的抑郁样行为；检测大鼠的血糖和胰岛素含量，并计算胰岛素抵抗指数；采用高尔基染色观察大鼠海马齿状回神经元的树突形态；采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)注射及免疫荧光检测齿状回神经元增殖水平；采用RT-qPCR和Western blot法检测齿状回Wnt5a、Ras同源物基因组成员A (RhoA)和Rho同源物相关卷曲螺旋蛋白激酶1 (ROCK1) mRNA和蛋白表达。结果 与正常组比较，模型组大鼠血糖、胰岛素及胰岛素抵抗指数均显著升高，不动时间显著延长，活动次数显著减少，海马齿状回中Brdu积分光密度值和Wnt5a、RhoA、ROCK1蛋白及mRNA表达均显著降低(P<0.05或P<0.01)；大鼠海马齿状回神经元可见树突分支明显减少或断裂，长度缩短。与模型组比较，左归降糖解郁方组和左归降糖解郁方+Wnt5a抑制剂组大鼠血糖、胰岛素及胰岛素抵抗指数显著降低(P<0.05或P<0.01);Wnt5a激动剂组和左归降糖解郁方组大鼠不动时间显著缩短、活动次数显著增加、Brdu积分光密度值显著升高，Wnt5a、RhoA、ROCK1蛋白及mRNA表达均升高(P<0.05或P<0.01)，海马齿状回神经元的树突分支数量显著增加、长度延长，树突的复杂性增加。与Wnt5a激动剂组比较，左归降糖解郁方组大鼠血糖、胰岛素及胰岛素抵抗指数显著降低，不动时间显著延长，活动次数显著减少，Brdu积分光密度值显著降低；除左归降糖解郁方LXH254采购组Wnt5a mRNA外，左归降糖解郁方组和左归降糖解郁方+Wnt5a抑制剂组Wnt5a、RhoA、ROCK1蛋白及mRNA表达均降低(P<0.05或P<0.01)。与左归降糖解郁方组比较，左归CX-5461降糖解郁方+Wnt5a抑制剂组Wnt5a、RhoA、ROCK1蛋白及mRNA表达均降低(P<0.05或P<0.01)。结论 左归降糖解郁方可改善糖尿病并发抑郁症模型大鼠的高血糖和抑郁样行为，其抗抑郁作用可能与激活海马Wnt5a/RhoA信号，促进齿状回神经元树突生长有关。

光动力治疗(Photodynamic therapPevonedistat价格y,PDT)是近年来发展的一种非破坏性肿瘤治疗方法,具有时空分辨率高、正常组织损伤小、无耐药性、可反复治疗等优势,已在临床得到应用。光动力治疗的原理是处于三线激发态的光敏剂将能量传递给氧气或其他生物分子,导致高活性氧化物(ROS)的产生,其关键是选择合适的光敏剂(PS)。理想的光敏剂一般要求兼具好的水溶性、大的摩尔吸光系数以及尽可能长的激发波长等。线粒体是细胞内能量合成和供应的重要场所,其在肿瘤细胞凋亡过程中起着关键作用,目前,通过破坏线粒体功能来诱导肿瘤细胞凋亡的光敏剂已被广泛开发,这些光敏剂可以显著提高肿瘤细胞的清除率。氧杂蒽类衍生物由于具有可调的吸收和发射波长、较高的荧光亮度(?×(37))、天然的线粒体靶向性和良好的光稳定性等特点,已广泛应用于荧光技术的各个领域。然而,该类染料却很少被用于光动力光敏剂的开发,因此它们在PDT方面的潜力仍需进一步探索。本论文以硅罗丹明染料(或硒罗丹明染料)作为母体发色团以及电子受体,以吩噁嗪(PXZ)作为电子供体,基于自旋轨道耦合电子转移促进的系间窜越(SOCT-ISC)机理和重原子促进的系间穿越(SOC-ISC)机理,合成了两类新型的氧杂蒽类光动力光敏剂,并将其用于癌细胞的光动力治疗。在论文的第一部分工作中,我们选取在近红购买MDV3100外区具有强吸收的硅罗丹明染料作为母体发色团以及电子受体,以吩噁嗪为电子给体,基于SOCT-ISC机理设计合成了一个无重原子型的光动力光敏剂“硅罗丹明-吩噁嗪(SiR-PXZ)”,该光敏剂具有近红外的吸收波长(>650 nm)、优良的生物兼容性、好的水溶性和光稳定性、低的暗毒性以及相对高的单线态氧产生效率(PBS中为0.16)等特点;此外,鉴于天然的正电荷特性,该光敏剂可迅速靶向到癌细胞的线粒体中,在660 nm的激光照射下有效诱导线粒体膜电位去极化(IC_(50)=1.2μM),因此表现出优异的抗肿瘤效果。在论文的第二部分工作中,我们选取硒罗丹明染料作为母体发色团以及电子受体,以吩噁嗪为电子给体,设计合成了一个光动力光敏剂“硒罗丹明-吩噁嗪(Se R-PXZ)”,通过SOCT-ISC和SOC-ISC的协同作用,提高单线态氧产生效率。经计算,该光敏剂在PBS中的单线态氧产生效率为0.28(565 nm,5 m W/cm~2),对细胞的半致死浓度为0.15μM(560 nm,15 m W/cm~2),因此,Se R-PXZ是一个高效digenetic trematodes的光动力光敏剂,具有潜在的生物应用价值。

目的 探究M1巨噬细胞来源的纳米囊泡(M1-NV)治疗子宫内膜异位症(EMS)的有效性和关键机制。方法 通过差速离心法从巨噬细胞培养上清液中分离细胞外囊泡(EV)。免疫荧光细胞化学染色检测波形蛋白(vimentin)、 CD31和F4/80表达分别鉴定EMS患者子宫内膜基质细胞(EMS-ESC)、人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、极化的腹膜巨噬细胞。通过在0～4℃环境下注射器吸取细胞悬液后，通过(5、 1、 0.4、 0.22)μm聚碳酸酯膜过滤器进行过滤制备M1-NV。流式细胞术分析RAW264.7小鼠腹腔巨噬细胞的体外极化情况、反转录PCR检测其血管内皮生长因子(VEGF)、 CD86、白细胞介素6(IL-6)、 IL-1β和肿瘤坏死因子αimmune restoration(TNF-α)、精氨酸酶1(Arg1)、 CD163、 CD206和IL-10的表达。将PKH67标记的M1-NV在与EMS-ESC、 HUVEC和巨噬细胞共同培养，通过小管形成实验检测M1-NV对HUVEC小管形成的影响、通过Transwell~(TM)侵袭和迁移实验检测EM-ESC在迁移和浸润能力方面的变化。结果 通过对NV内含物的检测发现NV中的蛋白质和其NSC 127716溶解度他生物活性颗粒含量远多于来自相同数量的EV;与EMS-ESC、 HUVEC和巨噬细胞共同培养时，PKH67标记的M1-NV在均被细胞摄取内化。与M0-NV处理相比，20μg/mL M1-NV就能够有效地将M2巨噬细胞重新编码为M1巨噬细胞。与空白组和M0-NV组相比，M1-NV处理后的EMS-ESC侵袭和迁移明显减少、 HUVEC的小管形成减少，而用M2-NV处理的EMS-ESC则相反。结论 M1-NV可以将M2巨噬细胞重新编码为M1巨噬细胞，抑制EMS-ESC的侵袭、迁移并阻碍血管形成，进而点击此处阻碍EMS的发生和发展。

碳量子点(CDs)是荧光碳纳米材料领域冉冉升起的新星。CDs指直径小于10 nm的具有相同表面钝化性质的极小碳纳米颗粒。有毒的金属量子点正在被CDs所取代。由于CDs具有良好的光物理特性、生物相容性、低毒性和易于修饰的特性,在生物传感、生物成像和药物运输等方面具有广阔的应用前景。而与用纯化学物质制备生成的CDs相比,以天然绿色前驱体制备的CDs具有更好的水溶性、高生物相容性和环保性质,因此引起了研究人员的广泛关注。绿色CDs表面的杂原子以胺基、羟基、羧基或硫醇官能团的形式存在,可以改善其物理化学性质,提高其荧光量子产率和可见光吸收的可能性,从而消除了额外的表面钝化的需要。抗坏血酸(AA)又称MRTX849维生素C,是保证机体正常生理功能的必需物质,常被用于身体组织的成长和修复。缺乏AA的摄入会对人体的健康产生巨大的威胁,严重者则会威胁生命。随着我国工业水平大幅进步,六价铬(Cr(VI))是在工业废水中能够检测到的最常Healthcare acquired infection见重金属污染物之一。对人体具有致基因突变和致癌作用,对健康和环境危害性极大。因此,对于环境样品中Cr(VI)的测定具有重要意义,很多国家都将工业废水排放标准以及人们饮用水中的Cr(VI)的含量严格控制微摩尔水平。孔雀石绿(MG)作为一种有效的杀菌剂和杀寄生虫剂,在水产养殖和运输中得到广泛应用。但MG作为一种有毒的三苯基甲烷化合物,对人体的致癌性和致畸性风险增加,因此MG被许多国家限制或禁止使用。然而,各国不法商人仍使用MG用于水产市场,特别是在水产运输过程中MG使用更甚。所以设计具有高灵敏度、快速响应的分析方法及检测物来分别监测AA与Cr(VI)以及MG的含量,是十分必要的。在所有的检测分析方法中,荧光分析方法因其检测便利,是一种非常有前景的检测分析方法。因此为了节约资源,进而达到保护环境的目的,我们以纤维素为基体原料,通过掺杂氮、硫等元素制备了具有不同荧光发射波长的纤维素基碳量子点,并建立了三种新颖且灵敏的荧光检测平台,实现了对上述三种重要物质的检测,具体工作如下:(1)纤维素基碳量子点双模法检测抗坏血酸。以醋酸纤维素为基体前驱体,通过掺杂三聚氰胺以及硫代硫酸钠进而引入氮、硫元素,通过一步水热法成功合成了纤维素基碳量子点。在制备过程中研究了三种前驱体原料间的最佳配比以及制备温度和制备时间,得到了表面富含氨基、羧基以及羟基的蓝绿色荧光的纤维素基碳量子点。通过对其性能进行了研究,我们构建了通过荧光法和比色法两种方法并存的AA双模法检测平台,克服了仅一种方法对AA检测的局限性,且相对于现阶段的研究而言此检测平台的检测范围较宽(比色法:9～50μM,荧光法:1～33μM)检出限较低(比色法:0.636μM,荧光法:0.0927μM)。此检测平台已经成功应用于真实水果样品中AA的测定,并取得了令人满意的效果。(2)黄绿色纤维素基碳量子点荧光检测六价铬及抗坏血酸。通过一步水热法,以醋酸纤维素为基体前驱体,通过掺杂含有氮元素的对苯二胺,以超纯水(18.25MΩ·cm~(-1))为溶剂,成功制备了含有羟基、羧基、以及氨基基团的黄绿色荧光纤维素基碳量子点,克服了利用纤维素只能制备出蓝色或绿色GSK1349572 IC50荧光CDs的缺点。通过对其性能进行探究发现,此CDs的斯托克斯位移较大(140 nm),构建了基于内部滤光效应的“turn-off-on”纳米荧光检测平台实现了对Cr(VI)以及AA的成功检测。纳米荧光检测平台对Cr(VI)以及AA具有较高的选择性和灵敏度,其检测范围较宽Cr(VI):(0.01～40μM),AA:(0.1～100μM)。LOD较低Cr(VI):0.0303μM,AA:0.157μM。此纳米平台已成功应用于实际水样环境中Cr(VI)以及实际水果样品中AA的测定,具有优异的检测效果。(3)红色纤维素基碳量子点荧光检测孔雀石绿。由于前两个体系所制备的CDs没有实现真正意义上的红色荧光。所以以醋酸纤维素为前驱体,通过掺杂含有氮元素的三聚氰胺和对苯二胺以及含有硫元素的硫代硫酸钠,以超纯水(18.25MΩ·cm~(-1))为溶剂,通过探究四种前驱体的质量配比以及制备过程中的加热条件,一步水热法制备了具有红色荧光的纤维素基碳量子点,此红色碳量子点的成功制备拓宽了纤维素基碳量子点的荧光发射波长,弥补了该类碳量子点仅有短波长荧光发射的不足。通过荧光共振能量转移效应建立了“turn-off”荧光检测平台,用于孔雀石绿(MG)的定量检测。纳米平台对MG具有较高的选择性和灵敏性,其检测范围较宽(0.02～4.50μmol/L),LOD较低(7.497 nmol/L)。该纳米平台已成功应用于食用鱼类与水产养殖水样等实际样品中MG的测定,结果令人满意。

真菌来源的天然产物结构复杂、骨架新颖、生物活性丰富多样,是小分子药物的主要来源。活性天然产物的发现在很大程度上是一个偶然的过程,这阻碍了药物先导化合物的快速挖掘。近年来随着基因组测序技术的进步,测序费用降低,次级代谢产物基因簇快速发现,在一定程度上促进了天然产物的发现进程。在基因组信息指导下挖掘真菌来源的生物活性物质对开发新的药物先导化合物具有重要意义。海参内生真菌Aspergillus micronesiensis H39和陆地内生真菌Collariella virescens 148.68的HPLC指纹图谱表明其具有催化丰富次级代谢产物的潜力,可在基因组信息指导下挖掘其潜在的生物活性分子。首先对两株真菌进行小规模发酵培养,采用现代色谱分离技术如硅胶柱层析、凝胶柱层析、半制备高效液相色谱、薄层色谱对次级代谢产物进行分离纯化,共分离得到3个新化合物和24个已知化合物,主要种类包括:Hepatoid carcinoma丁烯内酯类、细胞松弛素、色酮类。结合一维核磁共振(1D NMR)、二维核磁共振(~1H-~1H COSY、HMQC、HMBC和NOSEY)和质谱等方法鉴定了27个化合物的化学结构。对27个化合物进行了生物活性测试以及生此网站物合成途径推测。基因组信息显示A.micronesiensis H39有45个次级代谢产物生物合成基因簇,包括12个I型聚酮合酶(T1PKS)基因簇、1个III型聚酮合酶(T3PKS)基因簇、10个非核糖体肽合成酶(NRPS)基因簇、14个NRPS-like基因簇、1个T1PKS/NRPS-like基因簇、1个NRPS-like/NRPS基因簇、1个吲哚(Indole)基因簇、4个萜类(Terpene)和1个倍他内脂类(betalactone)基因簇。自A.micronesiensis H39发酵粗提物中系统分离鉴定了11个化合物。包括1个新化合物aspernolide M(1),及10个已知化合物aspernolide C(2)、aspochalasin I(3)、aspochalasin H(4)、aspochalasin J(5)、aspochalasin M(6)、rosellichalasin(7)、asperphenamate(8)、ergosterol(9)、epicoccolide B(10)和epicoccone(11)。通过生物信息学分析,位于scaffold 000002F的NRPS-like基因簇负责丁烯内脂类化合物1和2的生物合成。化合物1-11没有对耐药细菌和真菌表现出抑制活性,化合物1和2也没有在斑马鱼模型中表现出抑制血管生成活性。C.virescens 148.68次级代谢产物生物合成基因簇共有26个,其中T1PKS基因簇12个,T3PKS基因簇1个,NRPS基因簇7个,NRPS-like基因簇2个,betalactone基因簇2个。从C.virescens 148.68发酵粗提物中分离出16个化合物,主要为色酮类天然产物,包括2个新化合物chaetosemin F(1)和chaetosemin G(3),14个已知化合物chaetosemin E(2)、amycolachromone C(4)、chaetoquadrin D(5)、eugenitin(6Emricasan研究购买)、6-hydroxymethyleugenin(7)、12.4 6-methoxymethyleugenin(8)、chaetoquadrin G(9)、chaetoquadrin H(10)、sterigmatocystin(11)、chaetochromin A(12)、3-methylglutaconic acid(13)、3-[(1-carboxyvinyl)oxy]benzoic acid(14)、p-hydroxybenzoic acid(15)和5-hydroxy-2-hydroxymethyl-4H-pyran-4-one(16)。通过生物信息学分析,推测了硫代色酮类化合物3、4和5的生物合成途径。化合物7、9和12对常见细菌展现出由弱到中等的抑制活性,特别是化合物12对藤黄微球菌的MIC值为80μg/m L。

目的 探讨亚低温联合苯巴比妥对新生儿窒息患儿血气指标和心肌功能的影响。方法 选取南通大学附属妇幼保Hepatosplenic T-cell lymphoma健院2019年9月至2023年6月接诊的新生儿窒息患儿162例，采用随机数字表法将其分此网站为对照组（81例）和观察组（81例）。对照组患儿采用苯巴比妥治疗，观察组患儿在其基础上联合亚低温治疗，两组均于治疗3 d后评估临床效果。比较两组患儿治疗3 d后临床疗效、临床指标，治疗前与治疗3 d后急性生理学与慢性健康状况评分LXH254核磁系统Ⅱ（APACHEⅡ）与心肌功能指标及血气指标。结果 观察组患儿治疗3 d后临床总有效率高于对照组，临床症状消失时间、呼吸恢复时间、住院时间均短于对照组；与治疗前比，治疗3 d后两组患儿APACHEⅡ评分、血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、脑钠肽（BNP）水平及动脉血二氧化碳分压（PaCO_2）水平均降低，且观察组低于对照组，而治疗3 d后两组患儿动脉血氧分压（PaO_2）、动脉血氧饱和度（SpO_2）水平均升高，且观察组高于对照组（均P <0.05）。结论 在苯巴比妥的基础上联合亚低温治疗新生儿窒息，可提高患儿临床治疗效果，改善临床指标，调节其血气指标，同时可缓解心肌损伤，促进心肌功能恢复。

目的 研究巨噬细胞去整合素金属蛋白酶8(ADAM8)过PR-171价格表达对血管平滑肌细胞去分化的影响。方法利用生物信息学筛选小鼠腹主动脉瘤和人胸主动脉夹层差异表达基因。巨噬细胞转染ADAM8过表达质粒，并收集巨噬细胞培养基处理血管平滑肌细胞。qPCR和Western blotting检测细胞ADAM8表达水平；细胞划痕实验、Edu染色实验分别检测血管平滑肌细胞迁移能力和增殖能力。qPCR检测过表达ADAM8的巨噬细胞培养基对血管平滑肌细胞分化标志基因表达水平的影Kidney safety biomarkers响。结果 ADAM8基因在人胸主动脉夹层和小鼠腹主动脉瘤病变过程中显selleck激酶抑制剂著上调(P<0.05),且在脂多糖诱导巨噬细胞炎症反应过程中也显著增加(P<0.05)。巨噬细胞过表达ADAM8诱导细胞炎症反应和基质金属蛋白酶(MMP)表达，同时过表达ADAM8的巨噬细胞培养基促进血管平滑肌细胞的迁移和增殖能力，但显著抑制血管平滑肌细胞分化标志基因α-actin和α-tropomyosin的表达水平(P<0.05)。结论 巨噬细胞ADAM8促进炎症因子和MMP表达并诱导血管平滑肌细胞的去分化。

蚕豆(Vicia faba L.,2n=12)是一种重要的豆科作物,栽培历史悠久。中国作为世界蚕豆主产区之一,蚕豆在我国大部分地区均有所种植,长江以北地区主要以春播为主,长江以南地区以秋播为主。豆象作为影响蚕豆生产及仓储的重要害虫,严重制约了蚕豆的生产和发展。筛选抗豆象材料对于蚕豆育种以及遗传改良具有重要意义。目前,国内外对于蚕豆的分子研究落后于其他作物,关于蚕豆抗豆象方面的遗传研究严重不足,蚕豆可利用的SSR分子标记数量较少,开发新的SSR标记以及对蚕豆相关研究具有重要意义。本研究采用人工接虫试验对80份蚕豆种质资源进行了绿豆象抗性鉴定,并基于蚕豆转录组测序(RNA-Seq)数据开发的SSR分子标记对80份蚕豆种质资源进行遗传多样性分析。主要研究结果如下:1.蚕豆种质资源对绿豆象抗性鉴定:采用室内人工接虫的方式对80份蚕豆种质资源进行了对绿豆象抗性鉴定。根据每份材料的受害粒数,计算种子被害率,评价每份材料的抗性等级。其中,免疫(I)材料26份,高抗(HR)材料41份,中感(MS)材料1份,高感(HS)材料9份,感(S)材料3份。9份高感材料中被害率为100%的蚕豆资源有7份,种子被害率低于10%的抗性材料共计67份。2.课题组两个蚕豆品种Y134和Y078种子样本的转录组测序数据包含207506个转录本,序列总长约为241 Mb。利用MISA程序搜索所有Unigene序列中的SSR位点。发现16170条Unigene序列中存在18868个SSR位点,其中2203条Unigene序列含有多个SSR位点,1077条携带有复合SSR位点。SSR核苷酸基序重复类型丰富,二Classical chinese medicine至六核苷酸重复类型均存在,以二核苷酸和三核苷酸重复为主。利用Primer3.0设计SSR引物,并从中随机挑选出400对SSR引物进行验证。3.利用开发的400对蚕豆SSR引物在80份蚕豆抗豆象种质资源DNA中进行PCR扩增,328对引物成功扩增出产物,有效扩增率为82%,其中89对SSR引物扩增条带表现出多态性,占有效扩增引物的27.13%,占所设计总引物的22.25%。利用筛选的89对SSR标记分析80份蚕豆资源的遗传多样性,发现89对SSR引物中有6对SSR引物等位基因数为1,PIC值为0,这可能是由于它们的等位基因数目以及出现频率低有关,不具有实际利用价值。其余83对SSR引物在80份蚕豆抗豆象材料中共检测到428个等位基因位点变异,每个位点的等位基因数目范围为2～21个,平均每个位点5.16个等位基因,平均每个位点的有效等位Docetaxel小鼠基因数为2.37。多态信息量(PIC)的变化范围为0.02～0.82,平均值为0.46。PIC值小于0.25的低多态性引物有16KD025 MW个,占多态性引物的19%。PIC值在0.25～0.50之间的中度多态性引物有29个,占多态性引物的35%。PIC值大于0.5的高多态性引物有38个,占多态性引物的46%。Shannon信息指数范围为0.04～2.31,平均值为0.89。4.基于非加权组平均法(UPGMA)对80份蚕豆抗豆象种质资源进行聚类分析,在相似系数0.80处将80份蚕豆抗豆象材料分为两大类。第Ⅰ类包含67份蚕豆种质,其中I材料25份,HR材料39份,HS材料2个,S材料1个,占供试蚕豆种质资源的83.75%;第Ⅱ类包含13份蚕豆种质,占供试蚕豆资源的16.25%。其中I品种(系)1个,HR品种(系)2个,MS品种(系)1个,HS品种(系)7个,S品种(系)2个。

核酸适体由于其高特异性、低免疫原性、化学结构易修饰和广泛的生物靶点等优势,成为构建抗肿瘤药物靶向递送系统的优越配体。核酸适体与药物偶联形成的核酸适体-药物偶联物(Aptamer-Drug Conjugate,Ap DC),可以高效地将药物靶向递送至肿瘤细胞,从而提高药物的治疗效果,降低副作用,在开发新型靶向抗肿瘤药物领域展现出巨大潜力。在精准医疗时代,针对特定细胞器的高度敏感和精确治疗的策略受到越来越多的关注,亚细胞器成为肿瘤治疗的理想靶标。本论文将Ap DC与细胞器靶向策略相结合,旨在开发“肿瘤细胞器靶向”和“药物可控释放”的一体化智能响应型Ap DC药物,以期实现药物的精准靶向递送与靶向释放。具体内容如下:(1)肿瘤的代谢异常表现为重要酶、生物小分子的Medical Scribe上调表达,可作为标志物用于肿瘤诊断和治疗。本工作对肿瘤细胞系数据库内的多组标志基因、蛋白和代谢物数据进行分析,筛选了五种具有化学反应活性的肿瘤生物标志物,分别是羧酸酯酶、细胞色素P4502J2酶、脯氨酸氨肽酶、活性氧和谷胱甘肽,考察这五个标志物相关基因在30种不同肿瘤的1000多种细胞的分布图谱,在器官、细胞水平对其分布和基因表达量进行深入研究,为本论文肿瘤微环境响应连接子的设计提供理论支撑和设计思路。(2)设计、合成了九种结构类似、反应活性相同的环境响应型可裂解连接子,分别响应紫外、过氧化氢、次www.selleck.cn/products/Gefitinib氯酸、乙酰胆碱酯酶、细胞色素单氧酶、酯酶、硝基还原酶、脯氨酰氨基肽酶、偶氮还原酶。连接子结构灵活、组装快捷,为多种化疗药物的接入提供了结合位点。连接子尾部的炔基可与修饰叠氮基团的生物靶向配体共价偶联,为后续模块化组装Ap DC提供分子结构基础。可裂解连接子合成路线操作简单、反应效率高,九种可裂解连接子平均总收NN2211 IC50率约为60%,其中硝基还原酶响应可裂解连接子总收率高达83%,表明连接子在实际合成中副反应少、产率高,实际操作性强,有望构建其他肿瘤生物标志物敏感的连接子。(3)本文以可裂解连接子作为桥键,将内质网、溶酶体和线粒体定位基团分别与药物依喜替康缩合,组装成具有细胞器靶向的前药分子。最后通过点击化学将靶向c-Met的核酸适体和前药分子共价偶联成同时具有细胞靶向和细胞器靶向的Ap DC药物。双靶向的Ap DC能特异性识别肿瘤细胞上过表达的c-Met受体,并通过受体介导的内吞作用进入细胞,从核内体中逃逸后积聚在特定的细胞器上控制药物释放。在细胞水平上进行三种Ap DC药物的性能研究,流式细胞术实验结果显示Ap DC药物与He La和A549细胞具有特异性结合,小分子前药修饰显著增强了核酸适体的靶向结合能力;细胞共定位实验显示Ap DC药物通过核酸适体成功内化进入癌细胞,并且通过细胞器定位基团精准靶向细胞器,实现了从肿瘤细胞到细胞器的靶向定位以及药物递送;体外药物释放实验和细胞毒性实验证明了核酸适体对靶细胞的特异性识别、高亲和力结合以及可裂解连接子的响应断裂能力对提高Ap DC药物的抗肿瘤细胞增殖能力至关重要。本论文发展了新型的可裂解链接子砌块库,用于构建偶联核酸适体、细胞器靶向分子和化疗药物,通过靶向递送与靶向释放,实现肿瘤精准治疗。本工作为Ap DC等智能药物和材料的开发提供了一体化的设计新思路,有助于推动Ap DC药物在肿瘤治疗、药物递送等领域的应用与发展。