目的：研究中药热罨包治疗产后子宫收缩痛的效果及对睡眠质量的影响分析。方法：选取2022年9月至2023年6月龙岩人民医院收治的产后子宫收缩痛产妇200例作为研究对象，按照分娩先后顺序分成对照组和lymphocyte biology: trafficking观察组，每组100例。对照组给予常规治疗，观察NN2211试剂组在常规治疗基础上+中药热罨包，比较2组产妇治疗效果、治疗满意度以及睡眠质量。结果：治疗后，观察组患者的治疗有效率为94%,高于对照组的56%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组满意度为99%,高于对照组的75%,差异有统计学意义(P<Trichostatin A体内实验剂量0.05);观察组治疗后的匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)评分低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：中药热罨包能有效治疗产后子宫宫缩痛，减少疼痛，提高母乳喂养成功率，从而提高产妇满意度。因此，中药热罨包利于产妇子宫收缩痛减轻及产后恢复，同时可以有效提升产后的睡眠质量，可推广应用。
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药学干预对青少年抗精神病药物用药依从性的影响
目的 观察青少年抗精神病药用药依从性药学干预效果，为后续开展药学相关服务提供参考。方法 选择2020年9月—2022年3月于广东省江门市第三人民医院门诊就诊或住院治疗，服用至selleckchem少一种抗精神病药物患儿及其家属(监护人)100例为研究对象，采用随机数字表法分为观察组和对照组各50例。对照controlled medical vocabularies组提供常规门诊用药交代等诊疗服务，观察NVP-TNKS656组提供门诊诊疗服务和药学干预服务，干预3、6个月对2组患儿效果进行评估，比较2组用药依从性、药物不良反应、疾病与用药知晓率。结果 观察组患儿干预3个月和6个月用药依从率高于对照组(P<0.05)。观察组干预6个月期间恶心呕吐、腹泻便秘、肝肾功能异常、头晕嗜睡及体质量波动总发生率为6.00%,低于对照组的20.00%(χ~2=4.332,P=0.037)。观察组干预6个月后疾病诊断、发病时长、就诊时长、有无共病知晓率及对疾病了解程度均高于对照组(P<0.05)。结论 药学干预用于青少年抗精神病药物治疗中可提高患儿用药依从性，降低药物不良反应发生率，提高疾病与用药知晓率，值得推广应用。
溶栓候选药物FGFC1溶解脑血栓药理作用特性的研究
脑血管栓塞能采用溶栓疗法实现再通,即使用溶栓药物刺激机体纤溶活性增强从而溶解脑血栓。常用溶栓药物的原理即催化纤溶酶原转化为纤溶酶,纤溶酶溶解纤维蛋白,导致脑血栓失去稳定结构从而被溶解,代表药物有尿激酶、阿替普酶等,属于溶栓生物大分子药物,溶栓后脑血管再通良好,但存在诱发脑出血的危险性。小分子溶栓药物能够克服或消减溶栓生物大分子药物带来的脑出血副作用,其作用于纤溶酶原(Plasminogen,PLG)、纤溶酶原激活物抑制物1(Plasminogen Activator Inhibitor-1,PAI-1)、凝血酶激活的纤溶抑制物(Thrombin-activatable Fibrinolysis Inhibitor,TAFI)、纤溶酶原激活物(Plasminogen Activator,PA)等潜在溶栓靶点,使纤溶系统的PLG转变成纤溶酶(Plasmin,PL)。小分子溶栓药物或者先导化合物诱导的纤溶反应更平稳,将降低脑出血等风险,小分子溶栓先导化合物海洋双吲哚化合物Fungi fibrinolytic compound 1(FGFC1)将被进一步研究脑血栓动物模型的纤溶特性和药理作用特性。采用颈静脉注射异硫氰酸荧光素-纤维蛋白(Fluorescein Isothiocyanate-fibrin,FITC-fibrin)1 m L/kg剂量诱导大鼠产生脑血栓。诱导完成的大鼠取脑组织进行低场核磁共振血栓成像和组织切片评价其血栓形成情况,低场核磁共振血栓成像显示,成模大鼠与对照相比脑组织部位分别为200-250密度单位、50-150密度单位,且24 h仍能维持该结果;制作石蜡组织切片进行HE染色和冰冻组织切片进行荧光定位,能够在石蜡组织切片中观察到明显血管栓塞以及冰冻组织切片中脑血管内荧光亮斑明显,且24 h时该特征仍存在,结果表明FITC-fibrin诱导大鼠脑血栓形成。脑血栓动物模型建立成功后,通过颈静脉注射FGFC1,FGFC1分为高、中、低三个剂量,其注射剂量分别为2.5 mg/kg、5 mg/kg、10 mg/kg;FGFC1高、中、低剂量处理组24 h时大鼠脑组织的低场核磁共振成像分别为50-100、50-150、100-200密度单位,与对照组和阳性对照组大鼠结果相似;FGFC1高、中、低剂量处理组24 h时大鼠脑组织的石蜡组织切片HE染色结果显示大鼠脑血管管壁较薄,无明显栓塞,冰冻组织切片中无明显荧光亮斑存在,与对照组和阳性对照组大鼠结果相似,结果表明FGFC1能够清除大鼠脑血管内的血栓;检测大鼠血浆荧光强度,形成脑血栓的大鼠血浆荧光强度为1503.33-1519.00,FGFC1高、中、低剂量处理组大鼠血浆荧光强度分别在4 h内降至511.33、210.67、100.33,结果表明FITC-fibrin在FGFC1注射后被降解并排出体外;检测大鼠血浆D-二聚体(D-Dimer,D-D)和纤维蛋白降解产物(Fibrin degradation products,FDP)水平,大鼠脑血栓模型形成后,D-D水平升至4 ng/GSK126配制m L左右,FGFC1高、中、低剂量处理组在给药2 h后D-D水平快速升至4.5-6 ng/m L,4 h时则回落至2-2.5 ng/m L;大鼠脑血栓模型形成后,FDP水平升至450 ng/m L左右,FGFC1高、中、低剂量处理组在给药2 h后FDP水平快速升至500-600 ng/m L,4 h时则回落至350-400 ng/m L,D-D水平和FDP水平变化的结果表明FGFC1促进纤维蛋白降解,加速脑血栓的溶解;检测大鼠纤溶系统活性,检测大鼠血浆PLG、组织型纤溶酶原激活物(Tissue Plasminogen Activator,t-PA)、PAI-1、TAFI的水平,大鼠脑血栓模型形成后,大鼠血浆的PLG、t-PA、PAI-1和TAFI的水平为100 IU/L、5 ng/m L、38 ng/m L和32 ng/m L左右,FGFC1高、中、低剂量处理组在给药2 h后各指标水平改变为80 IU/L、25 ng/m L、32 ng/m L和28 ng/m L左右,4 h后恢复至与对照组和阳性对照组相似的水平,结果表明FGFC1会刺激机体纤溶系统活化,其潜在作用靶点为PLG、PA、PAI-1和TAFI受体;检测大鼠凝血系统活性,检测大鼠血浆纤维蛋白原(Fimedicine shortagebrinogen,FIB)、凝血酶原时间(Prothrombin time,PT)、凝血酶时间(Thrombin time,TT)、活化部分凝血活酶时间(Activated partial thromboplastin time,APTT)水平,大鼠脑血栓模型形成后,大鼠血浆FIB、PT、TT和APTT水平分别为200ng/m L、13.5 s、9.3 s和23.2 s左右,FGFC1高、中、低剂量处理组在给药2 h后各指标水平改变为150 ng/m L、17.0 s、11.6 s和27.8 s左右,4 h后恢复至与对照组和阳性对照组相似的水平,结果表明FGFC1会抑制凝血系统活性,阻止脑血栓加重;检测大鼠血栓素B2(Thromboxane B2,TXB2)水平,大鼠脑血栓模型形成后,大鼠血浆的TXBCX-5461 molecular weight2水平升至1200 ng/m L左右,FGFC1高、中、低剂量处理组在给药2 h后TXB2水平降至1000-1100 ng/m L,4 h后回落至900-1000ng/m L,与阳性对照组结果相似,但与对照组结果仍有差异,结果说明FGFC1使TXB2更快恢复至正常水平,前列环素与血栓素A2更快恢复平衡,阻碍脑血栓形成。研究表明FGFC1作用于PLG、PAI-1、TAFI、PA等潜在溶栓靶点,加速纤溶酶原激活,对大鼠脑血栓产生纤溶药理作用,研究结果为FGFC1的临床试验提供了基础。
壳聚糖-氧化石墨烯复合止血材料及深部组织大出血推注式止血装置研究
不可控制性大出血是导致战时或平时各种突发意外事故及创伤性死亡的重要原因。据报道,由各种不可控失血导致的死亡人数占各种突发创伤意外死亡人数的31%,而战场上更是有超过50%的死亡是由不可控制大出血造成的。因此,积极控制战现场大出血,为伤员后送争取宝贵救治时间,是有效降低我军战伤死亡率的重要手段。局部止血敷料及便携式止血装置是战现场及院前急救止血最主要的救治手段,针对新型止血材料和便携式止血装置的研究一直是战创伤救治领域的研究热点。壳聚糖是一种有着良好生物相容性的天然止血材料,其主要止血机制是具有大量游离氨基阳离子,容易与红细胞上所带负电荷相互作用,吸附并聚集红细胞从而促进局部血凝块形成。然而,单纯壳聚糖材料形成的红细胞聚集体不稳定,止血强度不足,对于高压力性动脉出血易发生二次出血;氧化石墨烯是近年来备受关注的一种新型无机止血材料,其主要止血机制是可显著聚集并激活血小板从而促进凝血,具有快速、稳定的优势。然而单纯氧化石墨烯材料细胞毒性较大、生物相容性低,限制了其在止血领域的进一步应用。因此,分别利用壳聚糖和氧化石墨烯化学结构的易修饰性,将这两种具有不同止血特性的材料进行复合,得到止血性能和安全性更优的复合止血材料,为新型局部止血敷料研发提供新思路。肢体结合部位是指腹股沟、腋窝等躯干和四肢连接的特殊解剖部位。现代战争中,由于单兵躯干、头部及四肢等部位个人防护装备研究的迅速发展,这些不易防护的肢体结合部位损伤出血伤情的发生率相对显著增加。据统计,近年来肢体结合部位损伤出血发生率已达以往战争的5倍。因此,针对肢体结合部位深部组织大出血的战现场救治研究重要性也日益凸显。腹股沟、腋窝等肢体结合部位由于解剖特殊无法采用常规止血带等装置按压止血,同时局部有股动脉、锁骨下动脉等多条大动脉分布,一旦发生出血往往出血程度严重,对止血材料活性https://www.selleck.cn/products/Nolvadex.html要求非常高。尤其是战时枪弹伤伤情,往往还具有体表创口非常狭小、体内出血部位深、止血材料难以被导入深部出血位点的难点,因此,积极研发具有良好导入功能同时止血活性优异的便携式肢体结合部位止血装置,是我军战伤救治止血领域亟待解决的重点研究内容。综上,本论文首先采用壳聚糖和氧化石墨烯交联的方式制备得到一种既具有强效止血活性同时安全性良好的新型复合止血敷料;并在试验室前期研究基础上研发了一种可适用于腹股沟、腋窝等肢体结合部位深部组织大出血的新型推注式止血装置,采用标准化小型猪肢体结合部位大出血模型对括壳聚糖-氧化石墨烯复合止血材料及推注式止血装置统一进行止血评价研究。为我军战创伤大出血救治提供了新型止血材料及装置候选品种及标准化大出血动物模型评估技术。一、壳聚糖交联氧化石墨烯复合止血材料研究本章采用戊二醛为交联剂,优化合成了一种壳聚糖与氧化石墨烯交联制备新型壳聚糖-氧化石墨烯复合止血材料(CSGO)的制备工艺,完成了壳聚糖交联氧化石墨烯复合止血海绵的结构和理化性质表征的研究、并对其止血机理、止血活性及安全性进行了系统评价研究。结果显示,壳聚糖及氧化石墨烯水溶液按质量浓度比5:2交联时,所得材料体外凝血时间最短,止血活性最强;傅里叶变换红外光谱及X-射线衍射结果显示壳聚糖和氧化石墨烯成功交联生成复合止血材料;扫描电镜结果显示壳聚糖交联氧化石墨烯复合止血海绵具有明显的多孔三维结构,孔隙率为75.0%,吸液性能测试结果提示壳聚糖交联氧化石墨烯复合止血海绵具有强吸水性能,最大吸生理盐水倍率约为60.0倍。体外凝血机制研究显示,壳聚糖交联氧化石墨烯复合止血海绵与新鲜抗凝全血反应后,可以显著降低体外凝血时间并增强血凝块强度。冷冻电镜显示壳聚糖交联氧化石墨烯复合止血海绵表面可黏附红细胞、血小板等细胞成分,从而促进局部凝血发生。此外,APTT、PT结果表明壳聚糖交联氧化石墨烯复合止血海绵可以同时激活内、外源凝血通路而促进凝血。在大鼠断尾试验和大鼠股动静脉完全更多切断止血试验中显示出壳聚糖氧化石墨烯复合止血海绵对小血管及微小血管出血具有良好的止血性能;在小型猪股动静脉完全切断大出血模型试验中,壳聚糖氧化石墨烯复合止血海绵的按压止血时间显著少于对照材料Celox Gauze,提示壳聚糖氧化石墨烯复合止血海绵具有强止血活性,对大动脉损伤导致的高压力性大出血急救同样有效,且止血后局部血管及组织病理组织HE染色未见明显炎症Direct medical expenditure或病理反应。体外细胞毒性试验、急性毒性试验及溶血试验均未见异常,提示生物安全性良好。二、对新型推注式压缩纤维素止血装置进行了安全性、有效性及稳定性研究课题组自主研发了一种具有深部导入功能的新型推注式压缩纤维素止血装置,该装置主要由外部的导入部件和内部荷载的压缩纤维素止血颗粒组成。外部导入部件主要起存储和导入的作用,内部荷载的压缩纤维素止血颗粒可通过迅速吸收血液中水分、体积膨胀从而有效填充伤腔、对局部损伤血管形成有效压迫而发挥快速强效止血活性。吸液膨胀性能测试结果显示,压缩纤维素止血颗粒在生理盐水体系中可迅速吸液并发生体积膨胀,吸液速率可在3 s即达6.2±0.1倍,最大吸液倍率7.3±0.2倍,最大体积膨胀率为9.0±0.3倍;在体外凝血时间以及血栓弹力图仪分析中可得出,压缩纤维素止血颗粒可显著缩短凝血时间;小型猪腹股沟区深部大出血模型止血试验结果显示,与国外产品CELOX-A~(?)相比,压缩纤维素止血颗粒可以明显缩短按压止血时间及所用产品数量(p<0.05),提示在止血活性和勤务适用性上更优于国外对照材料,且止血前后受试动物的血常规、PT、APTT及损伤部位病理组织测试结果均未见异常,体外细胞毒性试验、溶血时间、急性毒性等生物安全性结果良好。综上,推注式压缩纤维素止血装置有望为特殊肢体结合部位深部组织大出血伤情提供关键救治技术,为我军战伤救治提供一种新型救治药械品种支撑。
基于蛋白代谢多组学探讨参麻益智方治疗高血压合并血管性痴呆大鼠作用机制
血管性认知障碍(Vascular cognitive impairment,VCI)和血管性痴呆(Vascualr dementia,VaD)是指由脑血管疾病的危险因素、显性或非显性脑血管疾病引起的从轻度认知损害到痴呆的一组综合征。在我国人口老龄化进程加速的趋势下,VCI的患病率、发病率和死亡率日益升高,成为当今医疗事业关注的重点之一。VaD是指由脑血管病变引起的或与脑血管病变相关的一种慢性获得性退行性智力损害综合征,,临床表现为智能障碍,包括认知能力、记忆力、判断和思维能力、计算能力和社会生EPZ-6438试剂活能力的减退,伴随着情感、性格的改变。高血压不仅是我国脑卒中发生的首要原因也是VaD、阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)等认知障碍独立的危险因素。蛋白质组学是以蛋白质为研究对象,通过质谱技术对生物样本中的蛋白质进行检测和分析,通过对VaD模型动物的蛋白质表达水平、翻译后的修饰、蛋白与蛋白相互作用等的研究。而代谢组学技术,是指某一生物或细胞在一特定生理时期内的所有低分子量代谢产物的分析,研究疾病导致机体病理生理过程变化,最终引起代谢产物发生相应的改变关键物质。课题组在前期研究基础上应用防治VaD的中药复方——参麻益智方(SMYZG),获国家新药发明专利(ZL201610565191.5),并批准为北京市医疗机构中药制剂(Z20200005000),由人参、天麻、鬼箭羽、川芎组成,有益气化瘀、平肝潜阳之用。主治气虚血瘀、肝阳上扰证,治疗症见健忘、神情呆滞、智能减退等的VaD。前期动物实验和临床研究表明SMYZG具有改善VCI大鼠的药理作用及多种作用机制,同时能较好改善患者的认知行为和神经功能。课题组拟通过蛋白组学和代谢组学技术分析高血压结合内皮损伤致VaD模型动物的蛋白质表达和代谢产物差异,并进行中药复方SMYZG的干预研究,获得VaD在蛋白质水平上有关疾病发生、细胞代谢等过程的整体且全面的认识。通过分析VaD模型和SMYZG干预后的脑组织代谢产物,寻找VaD的生物标记物,通过标准化和精细化的蛋白质组学、代谢组学及联合组学技术来立体阐释中医药整体观。研究目的:建立自发性高血压大鼠(Spotaneously hypertensive rats,SHR)复合内皮损伤致VaD模型,观察SMYZG对VaD模型大鼠学习记忆能力、海马突触可塑性、血清胆碱能和β-淀粉样蛋白chemical pathology含量的影响。应用蛋白质组学和代谢组学技术,寻找SMYZG干预VaD参与的代谢通路和具有相同变化趋势的差异蛋白、差异代谢物,系统描述SMYZG在生物体内的分子调控机制。研究方法:实验一参麻益智方对SHR结合内皮损伤致认知功能障碍模型的学习记忆和突触可塑性的影响实验动物使用SHR,无特定病原体级别(SPF),雄性,13～14周龄。通过微电流刺激SHR双侧颈动脉形成血栓的方法制备VaD模型,随机分成:VaD模型(ModeL)组、盐酸多奈哌齐组(DNPQ)、SMYZG高剂量组(SMYZG-H)、SMYZG低剂量组(SMYZG-L),每组10只,并给予相应的药物等体积灌胃。选用相同遗传背景的正常血压Wistar-Kyoto大鼠(WKY)作为对照,与ModeL予等体积蒸馏水灌胃,连续8周。采用Morris水迷宫、脑组织病理HE染色、尼氏染色、高尔基银染方法观察SMYZG对大鼠学习记忆功能、海马(CA1、CA3区)病理形态和突触可塑性形态的影响。血清标记物检测采用ELISA法检测炎症因子:白介素(Interleukin,IL)-1 β、IL-6、肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)-α水平;血管活性物质:血管紧张素(Angiotensin,Ang)Ⅱ、内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)、降钙素基因相关肽(Calcitonin gene related peptide,CGRP)水平;痴呆相关病理产物:β-淀粉样蛋白(Amyloid β-protein,Aβ)含量。采用比色法和化学荧光法检测氧化相关指标,诱导型一氧化氮合成酶(Inducible nos,iNOS)和活性氧簇(Reactive oxygen species,ROS)水平。采用比色法检测胆碱能相关指标,乙酰胆碱(Acetyl-choline,Ach)、乙酰胆碱酯酶(Acetyl-cholinesterase,AchE)水平。实验二参麻益智方对SHR结合内皮损伤致认知障碍模型的蛋白组学研究采用液质联用iTRAQ/TMT标记定量蛋白质组研究的方法,通过TMTpro 16标试剂标记SMYZG干预模型大鼠基因组表达的全部蛋白质,利用标记报告的离子丰度对蛋白进行精确鉴定和定量。数据分析采用Proteome Discoverer软件的搜索引擎Sequest HT检索Uniport蛋白组数据库,获取蛋白质序列信息。开展SMYZG对血管性认知障碍的蛋白质组学研究,以寻找差异蛋白和药物靶标。实验三参麻益智方对SHR结合内皮损伤致认知障碍模型的代谢组学研究应用TM1000靶向代谢组学技术方法,从代谢物层面分析SMYZG干预模型大鼠脑组织代谢物变化及其作用机制。实验四参麻益智方对SHR结合内皮损伤致认知障碍模型的联PD0325901体内合组学研究将蛋白组学与代谢组学数据通过R4.0.1和cytoscape3.8.2进行生物信息学分析、代谢物与蛋白酶对应、代谢-蛋白联合分析KEGG代谢通路富集、共有KEGG分析、网络分析(Network)等。研究结果:1.SMYZG对VaD模型大鼠记忆学习能力的影响与WKY组比较,Model穿台次数显著减少(P<0.05),目标象限寻找时间减少(P<0.05),目标象限总路程减少(P<0.05);与Model比较,SMYZG-L、SMYZG-H组穿台次数显著增加(P<0.05,P<0.05),目标象限寻找时间增加(P<0.05,P<0.05),目标象限总路程显著增加(P<0.05,P<0.05)。2.SMYZG对VaD模型大鼠海马CA1-CA3区域突触可塑性的影响与WKY组比较,Model组大鼠海马CA1-CA3区HE染色可见细胞排列无规则,细胞核变形固缩,染色加深;尼氏染色可见尼氏体粉末状改变,数量减少,细胞水肿和溶解;高尔基银染可见树突长度变短,树突棘密度降低,可见不成熟神经元;和Model组比较,DNPQ、SMYZG-H、SMYZG-L组海马病理形态有不同程度的改善,尤其SMYZG-H组神经细胞突触密度显著增加。3.SMYXG对于VaD模型大鼠血清学标志物的影响与 WKY 组相比,Model 组 IL-1 β、IL-6、INOS、ROS、TNF-α 含量均显著升高(P<0.05,P<0.05),Ang Ⅱ、ET-1、Aβ、AchE含量均显著升高(P<0.05,P<0.05),CGRP、Ach 含量下降(P<0.05);与 Model 组比较,SMYZG-L 组、SMYZG-H 组:IL-1 β、IL-6、iNOS、ROS、TNF-α 含量均降低(P<0.05,P<0.05),AngⅡ、ET-1、Aβ 含量降低(P<0.05,P<0.05),CGRP、Ach、AchE 含量上升(P<0.05)。4.SMYZG对VaD模型大鼠蛋白质组学的影响筛选SMYZG改善VaD的潜在信号通路与生物标志物,其潜在作用靶蛋白为:表皮生长因子受体(Egfr)、关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1(Rock1)、原癌基因Pik3ca、RAS相关病毒(Rras)、Ⅲ型β微管蛋白3(Tubb3)、细胞色素C氧化酶亚型5A(Cox5a)、非转移性细胞1基因(Nme1),具有改善血管内皮功能、保护神经元、改善认知功能。神经退行性疾病、阿尔茨海默病的关键通路为:AMPK/PGC-1 α/UCP2/ATP5A、HIF/VEGF、VEGF/Flk-1/p8 MAPK,具有血管内皮保护、神经元保护功能。5.SMYZG对VaD模型大鼠代谢组学的影响研究发现SMYZG可影响VaD模型大鼠认知功能作用的差异代谢物质谱,结果显示在代谢物层面的显著标志物为:酪氨酸(Tyr),麦角硫因(ET),鲱精胺(AGM),甲基烟酰胺(MNA),维生素B6(VB6)以及“精氨酸和脯氨酸代谢”、“辅助因子的生物合成”、“氨基酸的生物合成”作用通路。SMYZG与DNPQ在治疗VaD的代谢层面主要差异标记物为:胞嘧啶(Cytosine),一氧化氮合酶抑制剂(L-NMMA),硫酸吲哚酚(Indoxyl Sulfate)以及“神经活性配体与受体”、“辅助因子的生物合成”。6.SMYZG对VaD模型大鼠的联合组学研究研究发现VaD发病与SMYZG起效的共同信号是通路神经退行性疾病-多疾病通路、缝隙链接(Gap junction)、ErbB 信号通路(ErbB signaling pathway)。研究结论:SMYZG可以改善高血压合并血管内皮损伤所致血管性痴呆大鼠的学习记忆功能;蛋白组学和代谢组学研究显示涉及“Egfr,Rock1,Pik3ca,Rras,Tubb3,Cox5a,Nme1”差异蛋白与“Tyr,ET,AGM,MNA,VB6”差异代谢物是 SMYZG改善血管性痴呆的潜在生物标志物。从整体性、时空性和复杂性的分子角度阐释VaD模型的高血压和内皮损伤特征,为探索中药复方防治VaD相关机制提供了新视角。
SD大鼠股静脉不同血流状态及其红外热成像表达特性研究
第一部分构建血流缓慢大鼠模型及其红外热成像表达特性研究目的:本研究旨在建立血流缓慢大鼠模型,探讨相应的红外热成像表达特性,为早期深静脉血栓诊断提供理论依据。材料与方法:选取12只SD大鼠,随机分为两组:肾上腺素组和生理盐水组(空白对照组)。肾上腺素组每次注射1mg/ml肾上腺素,空白对照组注射等量生理盐水,前后共两次,首次注射后2h,将大鼠置于冰水中游泳5 min。建模前后使用红外热成像技术采集两组大鼠两侧股三角区域温度,加压超声观察两侧股静脉内有无血栓形成,建模完成后腹主动脉采血检测血液流变学、血凝指标及IL-6,取右侧股静脉进行HE染色及NF-κB p65免疫组化。结果:1.肾上腺素组大鼠全血粘度低切(P=0.024)及血浆粘度(P=0.004)较生理盐水组升高;肾上腺素组活化部分凝血活酶时间APTT(P=0.001476)、凝血酶时间TT(P=0.0037)较生理盐水组明显缩短;IL-6水平高于生理盐水组(P=0.02)。2.两组大鼠超声检查提示股静脉均未见明确血栓形成;两组大鼠股静脉切片血管形态结构正常,未见明确血栓形成;免疫组化NF-κB p65未见明确阳性表达,平均光密度值(IOD)未见统计学差异。3.肾上腺素组大鼠股三角区域建模前最高温为35.34±0.47℃,建模后为36.57±0.94℃,肾上腺素组大鼠建模前后温度存在统计学差异(P=2.67×10~(-4));生理盐水组大鼠股三角区域建模前最高温为35.27±0.59℃,建模后为35.20±0.60℃,生理盐水组大鼠建模前后温度无统计学差异(P=0.292)。肾上腺素组大鼠股三角区域建模后最高温高于生理盐水组(P=3.68×10~(-4))。结论:通过反复大鼠皮下注射肾上腺素及冰水游泳可成功构建血流缓慢模型,全血粘度、血浆粘度增高反映的血液流变学改变以及APTT、TT缩短反映的血液高凝状态,证实了肾上腺素组大鼠目前处于血流缓慢状态。血流缓psychiatry (drugs and medicines)慢模型构建成功后,与生理盐水组相比,其红外热成像表达特性为高温表达,这与血流缓慢导致的热辐射增加相关。第二部分构建大鼠血流停滞状态及其红外热成像表达特性研究目PD0325901使用方法的:本研究通过结扎大鼠一侧股静脉造成局部血流停滞,观察血流停滞后一系列病理生理变化及静脉血栓形成情况,并通过红外热成像观察不同时间点的红外表达特性,为红外对DVT早期发现及应用提供实验依据。材料与方法:选取24只SD大鼠,随机分为两组:结扎组18只和非结扎组6只,结扎组根据时间节点又分为三个亚组:结扎后6h、25h、72h。所有结扎组大鼠均结扎右侧股静脉,左侧予单纯假手术处理(分离股三角,但不结扎股静脉)。而非结扎LGK-974化学结构组则两侧均行假手术处理。结扎前、结扎后即刻及结扎后6h、25h、72h观察时间点使用红外热成像技术采集两组大鼠两侧股三角区域温度,加压超声观察两侧股静脉内有无血栓形成。最后观察时间点完成后腹主动脉采血检测血液流变学、血凝指标及IL-6,取右侧股静脉进行HE染色及NF-κB p65免疫组化。结果:1.超声CDFI示股静脉结扎处见血流中断,未见明确血流信号;股静脉未探及明显血栓形成。2.病理HE染色显示,股静脉结扎后6h、25h、72h可见不完全血栓形成,血栓内可见炎细胞,且血流停滞时间越长血栓形成率越高(结扎72h后2/3股静脉发生DVT);非结扎组切片血管形态结构正常,管壁未见炎细胞浸润。3.结扎组大鼠各个观察时间节点血液流变学相关指标较非结扎组未见明确统计学差异;结扎后6h、25h、72h凝血酶原时间PT较非结扎组均出现不同程度的缩短(P<0.05),以结扎后25h为著;结扎后6h、25h、72h IL-6水平较非结扎组出现不同程度的升高(P<0.05),以结扎后25h为著。4.静脉NF-κB免疫组化显示,结扎后6h、25h、72h可见血管内皮有少许棕黄色颗粒染色,而非结扎组未见阳性表达。结扎后6h、25h的NF-κB p65的IOD高于非结扎组(P<0.05)。5.结扎大鼠股静脉导致血流停滞早期红外表达特性:(1)结扎前两侧温度对称性分布,结扎后即刻、2.5 h及6h结扎侧温度低于非结扎侧,结扎后25、72h结扎侧温度恢复,两侧温度大致呈对称性表达。(2)各检测时间点温度比较,结扎后25h最高,与结扎前相比,具有统计学差异(P<0.05)。结论:单纯结扎大鼠股静脉可以导致凝血酶原时间PT缩短、局部及全身轻度炎症反应,逐渐发生DVT,并可发现局部红外热成像表达特性改变。
抑郁症患者外周血Th17/Treg平衡变化及其与疾病严重程度的关系
目的 探究抑郁症患者外周血辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)平衡变化及其与疾病严重程度的关系。方法 以2021年1-12月淮安点击此处市第三人民医院84例抑郁症患者为抑郁组,根据汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分将患者分为轻度BMS-907351 MW组(8～17分)(n=30)、中度组(18～24分)(n=35)、重度组(≥25分)(n=19),以同期健康体检者58人为对照组。比较不同程度抑郁症患者及对照组的外周血Th17/Treg相关指标,分析其对抑郁症严重程度的评估价值及与病情程度的相关性;所有抑郁症患者给予针对性治疗,根据临床疗效将患者分为有效组及无效组,分析外周血Th17/Treg相关指标对抗抑郁治疗疗效的评估价值。结果 对照组、轻度、中度和重度抑郁症患者Th17细胞比例[(1.38±0.17)%vs.(1.52±0.19)%vs.(1.71±0.15)%vs.(1.89±0.18)%]及Th17/Treg比值[(0.23±0.05)vs.(0.26±0.05)vs.(0.31±0.06)vs.(0.37±0.06)]随病情严重程度biological barrier permeation的加重呈升高趋势,Treg比例[(6.08±0.31)%vs.(5.79±0.39)%vs.(5.43±0.47)%vs.(5.17±0.41)%]呈降低趋势,差异均有统计学意义(F=54.436、38.720、36.743,P均<0.05)。Th17/Treg相关指标联合检测评估抑郁症严重程度的AUC为0.854,大于Treg比例单独检测的0.681,差异有统计学意义(P<0.05)。Th17细胞比例及Th17/Treg比值与抑郁严重程度成正相关(r=0.396、0.415,P均<0.001),Treg比例与抑郁严重程度成负相关(r=-0.262,P<0.05)。无效组Th17细胞比例及Th17/Treg比值[Th17:(1.89±0.29)%vs.(1.59±0.31)%,Th17/Treg:(0.37±0.07)vs.(0.28±0.05)]高于有效组,Treg细胞比例[(5.08±0.52)%vs.(5.69±0.49)%]低于有效组,差异均有统计学意义(t=4.181、6.708、5.176,P均<0.05);Th17/Treg相关指标联合检测评估抗抑郁治疗疗效的ROC曲线下面积(AUC)为0.898,大于Th17、Treg的0.738、0.725(P<0.05)。结论 抑郁症患者存在外周血Th17/Treg比例失衡现象,且联合检测对抑郁严重程度及抗抑郁治疗疗效具有评估价值,并与病情严重程度具相关性。
新型MnO_2修饰的孪晶纳米片通过多模式策略对抗牙周细菌生物膜的实验研究
研究背景:牙周病是一种最常见的口腔慢性疾病,它由牙齿表面附着的菌斑引起,受宿主自身调节,最终导致口腔结缔组织破坏,骨组织吸收,严重时可导致牙齿脱落。由于菌斑是牙周病发生发展的始动因素,因此牙周病防护的首要目标是抑制在牙体表面聚集滞留的牙周病相关细菌生物膜。然而口腔作为一个复杂的多细菌共生环境,其自身的特性导致实现这一目标变的更加困难。对于顽固的细菌生物膜,传统的治疗方法为应用抗生素和机械清创治疗。由于特殊的生理结构如深的牙周袋或是不平整的根面结构,使得机械清创的效果达不到预期。同时,由于抗生素的滥用,细菌耐药Torin 1浓度性的增强使牙周病的治疗更加困难。因此,纳米药物及新兴的抗菌策略如光动力治疗(Photodynamical Therapy,PDT),化学动力治疗(Chemodynamical Therapy,CDT)等的出现极大促进了牙周病的防护与治疗。但单一模式的抗菌策略在对抗细菌生物膜都有自身的缺陷。例如,单一光动力治疗可以产生多种活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS),表现出很好的杀菌作用,但对于成熟的细菌生物膜而言,ROS很难深入其内部从而起到杀菌作用。虽然单一的化学动力治疗可以使羟基自由基(·OH)作用于细菌生物膜内部,但在应对顽固的细菌感染时同样受到限制,比如炎症环境中H_2O_2的浓度较低,从而无法高效的催化羟基自由基的产生,严重阻碍了其对细菌感染的治疗寻找更多效果。因此,迫切需要开发一种将多模式抗菌策略集成于一体的纳米药物,达到高效的抗细菌生物膜及杀灭游离细菌的效果,从而更有效的治疗顽固的牙周疾病。实验目的:制备一种由硫化铜(Cu S)与硫化锰(Mn S)形成的孪晶纳米粒子(Cu S/Mn S)作为核心,并在外包覆二氧化锰(Mn O_2)形成复合纳米粒子(Cu S/Mn S@Mn O_2)。通过体内和体外实验研究其在牙周细菌感染性疾病的治疗中抗细菌生物膜及杀灭游离细菌的效果。实验方法:1.采用改良一步水热法合成六方形片状孪晶纳米粒子(Cu S/Mn S),并通过氧化还原反应对其进行修饰从而包覆二氧化锰(Mn O_2)。2.通过扫描电子显微镜(SEM),透射电子显微镜(TEM),紫外光谱,X射线衍射图(XRD),X射线光电子光谱学(XPS),紫外可见分光光度仪(UV-Vis)等手段对纳米复合物进行表征。3.通过体外实验(红外光热相机,电感耦合等离子体光谱发射光谱学,荧光染色和溶氧仪)评价了Cu S/Mn S@Mn O_2的材料性能,包括光热转换能力,·OH生成能力,以及产氧能力。4.通过体外实验(CCK-8,细胞染色法和RTCA),体内实验(重要组织器官苏木精伊红染色法)和血溶性实验评价了Cu S/Mn S@Mn O_2的生物安全性和细胞毒性。5.通过体外实验(活/死染色,菌落形成单位计数,生物膜代谢活性和荧光原位杂交)探究了Cu S/Mn S@Mn O_2对多种细菌(致病菌牙龈卟啉单胞菌10(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis),具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,F.nucleatum)和非致病菌戈登链球菌(early life infectionsStreptococcus gordonii,S.gordonii))所形成的多菌种生物膜及内部细菌的杀灭能力。通过荧光染色实验评价了Cu S/Mn S@Mn O_2对细菌胞外DNA的清除作用。通过实时聚合酶链式反应(Real Time-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)评价Cu S/Mn S@Mn O_2的对细菌毒力因子的调控作用。6.通过体内实验(牙龈组织苏木精伊红染色,马松染色,免疫荧光染色)评价了Cu S/Mn S@Mn O_2对于牙周病的治疗效果及通过杀菌引起的炎症因子的变化。结果:1.Cu S/Mn S孪晶中铜,锰均匀分布在六方形框架内,二氧化锰(Mn O_2)均匀的包覆在六方形孪晶外层,形成了稳定的复合纳米结构。2.Cu S/Mn S@Mn O_2具有良好的光热性能,光热转换率高达37.4%。并且,可以通过Mn~(2+)触发CDT过程生成高水平的·OH。重要的是,光热作用展现出对CDT过程良好的促进作用。同时,生理条件下通过Mn O_2层分解过氧化氢释放大量氧气。3.Cu S/Mn S@Mn O_2具有优异的生物相容性,当药物浓度低于15μg m L~(-1)时,不具有明显的细胞毒性。4.在体外抗菌实验中,Cu S/Mn S@Mn O_2实验组CFU降低约四个数量级。同时,对多菌种生物膜表现出良好的清除作用。5.在体内牙周病模型实验中,Cu S/Mn S@Mn O_2纳米复合物可以有效杀死细菌病原体,促进宿主自身免疫调节,缓解局部炎症状态。结论:本研究开发了一种多功能协同集成纳米平台(Cu S/Mn S@Mn O_2)。核心Cu S/Mn S孪晶可以有效地实现光热转换和原位热量传递。光热效应不仅消散了细菌生物膜,还增强了Mn~(2+)介导的CDT过程。同时,产生的·OH可以破坏细菌生物膜的重要成分(e DNA),并与PTT形成有效的协同效应以消除顽固的细菌生物膜。此外,外壳Mn O_2层可以通过产生大量O_2缓解局部缺氧微环境并调节口腔微生物的菌种变化。这项工作为PTT/CDT/O_2协同治疗牙周炎提供了新的策略,并可能在其他厌氧菌引起的感染性疾病中表现出优异的潜力。
蜜蜂携菌授粉对梨火疫病传播影响及其脱毒和行为干扰剂的筛选
为明确蜜蜂授粉和人工授粉后对花器危害影响,筛选出对携菌蜜蜂安全低毒的脱毒药剂以及对意大利蜜蜂具有行为干扰能力的活性化合物。本研究通过“蜜蜂+病原菌”和“花粉+病原菌”授粉方式以明确梨火疫病原菌对花器的危害影响;在室内采用连续摄入法和接触法测定了7种杀菌剂对意大利蜜蜂的急性毒性,并结合危害熵值对所选脱毒药剂进行相关毒性评价;采用顶空固相萃取和GC-MS技术对意大利蜜蜂纳氏腺粗提取物的样品组分进行鉴定分析,最终通过触角电位和嗅觉反应测定了6种挥发化合物对意大利蜜蜂的行为干扰影响。主要研究结果如下:1、蜜蜂授粉和人工授粉后对3种蔷薇科果树花器危害影响试验结果表明,在一定条件下,蜜蜂携菌授粉相对花粉混菌人工授粉对花器危害影响更为严重。库尔勒香梨、红富士苹果和杜梨蜜蜂授粉后花器发病率分别为87.5%、60%和80%,病情指数分别为62.5、46和57.1;人工授粉后花器发病率分别为80%、51.25%和75%,病情指数分别为66.7、39.4和53.5。因此,结合花器发病情况,初步判定花器是Medical cannabinoids (MC)梨火疫病原菌最易侵染的部位之一,同时蜜蜂授粉比人工授粉对梨火疫病传播速率更高,是病原菌主要的传播途径。2、急性毒性测定结果表明,45%中生菌素原药、85%春雷霉素原药和4%春雷霉素水剂对蜜蜂的急性经口和接触毒性(48-LC_(50)/LD_(50),下同)分别为208、253、247 mg a.i.·L~(-1)和412、2434、223μg a.i.·bee~(-1),3-MA体内均为低毒;0.3%四霉素水剂对蜜蜂的急性经口和接触毒性分别为45 mg a.i.·L~(-1)和2.86μg a.i.·bee~(-1),均为中毒;3%中生菌素可溶液剂、3%噻霉酮微乳剂和47%春雷·王铜可湿性粉剂对蜜蜂的急性经口毒性为110、65、107 mg a.i.·L~(-1),均为中毒,急性接触毒性为193、22、480μg a.i.·bee~(-1),均为低毒。风险评价结果表明,3%噻霉酮微乳剂和0.3%四霉素水剂对蜜蜂危害熵值(HQ)分别为75和342.6,均在50
生理盐水纱布在去除Ⅱ度烧伤患者供皮区创面敷料中的应用效果
目的 探讨生理盐水纱布联合保鲜膜包扎法在去除Ⅱ度烧伤患者供皮区创面异种(猪https://www.selleck.cn/products/jnj-42756493-erdafitinib.html)脱细胞真皮基质敷料中的效果。方法 采用前瞻性随机对照观察，选取2021年1月—2021年6月在海南省人民genetic service医院烧伤与皮肤修复外科实施刃厚皮片移植修复手术的60例患者为研究对象，所有患者供皮区底层均采用异种脱细胞真皮基质敷料覆盖；术后1周打开供区外层包扎敷料。采用随机数生成器将所有研究对象随机均分为试验组(n=30)和对照组(n=30NSC 125973纯度)。试验组应用生理盐水纱布联合保鲜膜包扎法，去除覆盖于供皮区创面的异种脱细胞真皮基质敷料，对照组采用保鲜膜包扎法去除供皮区创面异种脱细胞真皮基质敷料。观察两组供皮区创面异种脱细胞真皮基质脱落时间、疼痛程度及患者的满意度。结果 (1)试验组和对照组创面异种(猪)脱细胞真皮基质脱落时间分别为8(6,8)h和36(30,48)h,试验组的脱落时间明显短于对照组，组间差异具有统计学意义(P<0.001);(2)试验组的疼痛率(23.33%)明显低于对照组(86.67%),组间差异具有统计学意义(P<0.001);(3)试验组的满意率为100.00%,明显高于对照组的70.00%,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 应用生理盐水纱布联合保鲜膜包扎法去除供皮区创面脱细胞真皮基质敷料，可促进Ⅱ度烧伤创面愈合，缩短供皮区创面生物敷料覆盖时间，减轻患者痛苦，减少护理工作量，降低患者住院率，提高患者对医护工作的满意度。