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五味子酯甲(Schisantherin A,SCA)是一种天然多酚类物质,具有抗炎、抗氧化和抗癌等药理作用。近几年,低共熔溶剂(Deep eutePF-6463922试剂ctic solvent,DES)已广泛应用于天然产物绿色提取。本研究采用超声波辅助DES高效提取SCA,采用响应面法考察了温度、液料比和超声时间对提取率的影响。最佳提取条件为氯化胆碱/乙酰丙酸摩尔比2:3,含水量20%,提取温度63℃,液料比21:1,超声功率150 W及超声时间63 min,提取率为10.12 mg/g,高于有机溶剂的提取率。由于SCA难溶于水且高度不稳定,导致生物利用率低。纳米载体具有生物相容性,载药量大等优点,易被吸收利用。因此,本实验采用阿拉伯胶(Gum Arabic,GA)作为生物矿化模板分别制备GA-Ca CO_3载体和GA-Ca CO_3-PDA载体,并利用载体表面大量活性基团负载SCA,得到GA-Ca CO_3@SCA和GA-Ca CO_3-PDA@SCA。经扫描电镜、粒径分析仪、比表面积及孔径分析表征发现,GA-Ca CO_3载体和GA-Ca CO_3-PDA载体,表面均有明显的孔道结构,平均粒径为68±0.24 nm和100±0.18 PD-0332991体外nm,比表面积分别为4.45 m~2/g和11.64 m~2/g;傅里叶红外光谱和X射线衍射表征发现,SCA成功负载于纳米载体上;通过吸附试验得到GA-Ca CO_3@SBiodegradable chelatorCA和GA-Ca CO_3-PDA@SCA对SCA吸附量最大可分别达108.25μg/mg和119.84μg/mg;所得载药纳米颗粒具有p H敏感性及缓释作用。稳定性研究结果表明,载药纳米颗粒具有更强的稳定性。与游离SCA相比,GA-Ca CO_3-PDA@SCA纳米颗粒对ABTS自由基清除率、DPPH自由基清除率和还原能力分别提高1.37倍、1.12倍和1.25倍。抑菌试验表明,两种载药纳米颗粒对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最低抑制浓度分别为0.07 mg/m L和0.14 mg/m L。细胞活性试验和凋亡试验结果显示,与游离SCA比较,相同浓度GA-Ca CO_3-PDA@SCA纳米颗粒在细胞水平上表现出更强抗炎效果。本研究不仅为新型绿色低共熔溶剂有效提取天然产物提供了一定的借鉴,也为建立纳米输送体系提高活性化合物的生物利用率提供了参考。

目的:线粒体功能障碍导致的多巴胺能神经元丢失是广泛接受的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)发Organizational Aspects of Cell Biology病机制之一。线粒体动力学是指线粒体通过不断进行分裂和融合,维持线粒体稳态,为细胞提供能量,调节细胞自噬和凋亡的过程。线粒体动力学异常,可导致线粒体功能障碍,与多巴胺能神经元的存活密切相关,可能是线粒体介导PD发病的机制之一。Fbxw7是一种进化保守的F-box蛋白,目前已被广泛认为是一种经典的肿瘤抑制因子。越来越多的证据表明,Fbxw7可以通过调控细胞周期、细胞生长和存活,参与神经退行性变的病理过程,但是Fbxw7在PD中的具体作用及其参与PD的发病机制仍不清楚。另有研究表明Fbxw7能够与STAT3结合影响STAT3的表达和泛素化降解,通过STAT3调控线粒体动力学相关蛋白的表达。基于以上研究背景,本研究将利用PD动物和细胞模型,探讨Fbxw7是否能够通过介导STAT3的活化调控线粒体分裂/融合进而影响PD病理进程,以期阐明Fbxw7在PD发病机制中的可能作用。方法:1.MPTP构建小鼠PD模型。20只雄性C57BL/6J小鼠随机分两组(每组10只):正常对照组(CON组)和疾病组(MPTP组)。转棒实验、爬杆实验评估小鼠的运动能力。行为学实验证实造模成功后,各组小鼠取中脑,采用Western Blotting技术检测Fbxw7、p-STAT3、线粒体分裂相关蛋白(Drp1)、线粒体融合相关蛋白(Mfn2、OPA1)在两组中蛋白表达水平的变化。2.选用不同浓度(100μmol/L、200μmol/L、400selleck NMRμmol/L、800μmol/L、1200μmol/L、1600μmol/L、1800μmol/L)的MPP~+处理MN9D细胞,CCK8测定细胞活力,选择最适浓度构建PD细胞模型。3.建立稳定表达Fbxw7的MN9D细胞。根据实验2中摸索的MPP~+药物浓度处理细胞,实验分为四组:对照组(CON组)、疾病组(MPP~+组)、疾病+转染空载体组(MPP~++NC组)、疾病+转染过表达Fbxw7质粒组(MPP~++OE组),采用q PCR技术、Western Blotting技术验证转染效率。4.利用DCFH-DA探针检测四组MN9D细胞中ROS的水平,JC-1荧光探针检测四组MN9D细胞中线粒体膜电位的水平。Western Blotting技术观察四组中p-STAT3蛋白和DRP1、OPA1、Mfn2蛋白表达水平的变化。结果:1.与CON组相比,MPTP组小鼠爬杆实验时间明显延长(P<0.05),转棒实验时间明显缩短(P<0.05),MPTP组小鼠存在运动功能障碍,成功构建急性小鼠PD损伤模型。2.与CON组相比,MPTP组小鼠中脑中的Fbxw7蛋白表达明显降低(P<0.05),p-STAT3蛋白表达明显升高(P<0.05);DRP1蛋白表达明显增加(P<0.05),OPA1、Mfn2蛋白表达明显减少(P<0.05),Fbxw7蛋白、p-STAT3蛋白、线粒体动力学相关蛋白表达水平的变化可能与PD相关。3.MPP~+对MN9D细胞的损伤力随着其药物浓度的升高而增加,本实验选取1600μmol/L MPP~+处理后续实验MN9D细胞,此浓度下细胞存活率为72%(P<0.05)。4.与CON组相比,MPP~+组MN9D细胞中的Fbxw7 m RNA和蛋白的表达明显降低(P<0.05),与动物结果一致;与MPP~++NC组相比,MPP~++OE组Fbxw7 m RNA和蛋白的表达明显升高(P<0.05),表明过表达Fbxw7质粒转染成功。5.与CON组相比,MPP~+组MN9D细胞中的DCF荧光强度明显增强(P<0.05);与MPP~++NC组相比,MPP~++OE组MN9D细胞中DCF荧光强度明显减弱,ROS水平明显降低(P<0.05),表明Fbxw7降低了由MPP~+引起的ROS增加。6.与CON组相比,MPP~+组MN9D细胞中的红色荧光减弱,绿色荧光增强,线粒体膜电位明显降低(P<0.05);与MPP~++NC组相比,MPP~++OE组MN9D细胞中红色荧光增强,绿色荧光减弱,线粒体膜电位明显升高(P<0.05),表明过表达Fbxw7升高了由MPP~+导致的线粒体膜电位下降。7.与CON组相比,MPP~+组MN9D细胞中的p-STAT3蛋白的表达明显增加(P<0.05);与MPP~++NC组相比,MPP~++OE组MN9D细胞中p-STAT3蛋白的表达明显降低(P<0.05),表明过表达FbCell Cycle抑制剂xw7降低了由MPP~+引起的p-STAT3蛋白升高。8.与CON组相比,MPP~+组MN9D细胞中的DRP1蛋白表达明显升高(P<0.05),OPA1蛋白和Mfn2蛋白表达明显降低(P<0.05);与MPP~++NC组相比,MPP~++OE组MN9D细胞中DRP1蛋白表达明显降低(P<0.05),OPA1蛋白和Mfn2蛋白表达明显升高(P<0.05),表明过表达Fbxw7恢复了MPP~+导致的线粒体动力学相关蛋白表达异常。结论:1.Fbxw7在PD中发挥保护作用;2.Fbxw7可以调控PD中的线粒体动力学;3.Fbxw7可能通过调节STAT3的活化,调控线粒体动力学,进而在PD中发挥保护作用。

疲劳是一种持续的疲倦、虚弱或乏力的主观体验,可能是生理上的、精神上的、或两者都有。随着社会的进步和不断发展,人们的工作方式和生活节奏发生了明显改变,竞争所带来的生理和心理上的压力、以及不健康的生活方式均会导致机体的疲劳。现今疲劳已是一种普遍存在的健康问题,会严重影响人们的生活质量和工作效率。然而目前市场上缓解疲劳的药物并不充足,更加安全有效的抗疲劳药物和保健品亟需开发。此外,我国目前执行的缓解体力疲劳保健食品功能评价技术规范中所采用的评价方法是直接以正常动物给药后通过负重游泳造成急性体力疲劳,不能反映人们因长期遭受压力而产生的疲劳。莲须是睡莲科植物莲(Nelumbo nucifera Gaertn.)的干燥雄蕊,具有悠久的药用历史,在2020版《中国药典》中记载其功能与主治为“固肾涩精,用于遗精滑精,带下,尿频”,具有潜在的抗疲劳功效。然而,迄今为止对莲须的抗疲劳功效却没有相关研究报道,并且对莲须的化学成分亦鲜有研究报道。因此,本研究建立了一种采用慢性束缚应激(chronic restraint stress,CRS)来模拟人们由于长期遭受压力而导致的体力疲劳小鼠模型,并对其可能的发生机制进行了研究。并采用CRS小鼠疲劳模型、皮质酮所致小鼠肌肉功能障碍模型、地塞米松所致C2C12肌管细胞萎缩模型和急性运动性小鼠疲劳模型研究莲须抗体力疲劳的功效及作用机制。同时,采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole time of flight-tandem mass spectrometry,UPLC-QTOF/MS)和高效液相色谱-紫外(high-performance liquid chromatography-ultraviolet,HPLC-UVDecitabine)技术对莲须的化学成分进行分析。本研究的主要内容如下:1 CRS致小鼠体力疲劳模型的建立及相关机制研究对ICR小鼠分别进行0、5、10和15天,每天8小时的CRS,应激结束后进行空场、前肢抓力和负重游泳测试。之后测定与疲劳相关的生化指标如肌糖原、肝糖原、及血清中的血糖、乳酸、尿素、乳酸脱氢酶和谷草转氨酶水平,从而确定CRS诱导疲劳的造模条件,并应用该条件对C57BL/6N和BALB/c小鼠进行适用性验证。采用转录组测序技术分析对照组与CRS造模15天小鼠的腓肠肌样本在基因表达上的差异。通过H&E染色和免疫组化染色观察腓肠肌纤维。采用电镜和Western blot等方法评价腓肠肌线粒体数量和功能、线粒体发生和线粒体自噬情况,对其可能的上游AMPK/mTOR信号通路进行研究,揭示CRS导致疲劳发生的可能机制。并通过给予小鼠自噬抑制剂氯喹验证CRS小鼠的疲劳与自噬间的关系。结果显示,与对照组相比,随着CRS时间的延长ICR小鼠的疲劳表现更加明显,共15天(每天8小时)的CRS可以造成小鼠稳定的空场自主活动、前肢抓力和负重游泳耐力降低等疲劳表现。在该条件下C57BL/6N和BALB/c小鼠也均表现出负重游泳耐力显著降低等疲劳表现,表明本条件可适用于多种品系小鼠的研究。15天的CRS可导致小鼠腓肠肌肌纤维萎缩和Ⅰ型肌纤维减少,使乳酸、乳酸脱氢酶和谷草转氨酶显著升高,尿素、肝糖原和血糖显著降低,说明CRS造成了小鼠体内代谢产物堆积、能源物质耗竭和组织损伤。腓肠肌转录组测序研究共发现了 239个差异表达基因,KEGG和GO富集分析显示,CRS可以引起小鼠能量代谢紊乱、并且可能与线粒体受损、自噬受阻和AMPK信号通路有关。进一步研究发现,CRS小鼠腓肠肌中的线粒体相关蛋白CYT-C、TOMM20、OXPHOS和MYH7降低,自噬相关蛋白PINK1和LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ表达降低,p62升高,表明线粒体受损和数量减少,且自噬受阻。通过给予小鼠自噬抑制剂氯喹发现当自噬受阻时会降低运动耐力,证明了 CRS小鼠的疲劳部分与自噬受阻有关。进一步发现CRS导致了小鼠腓肠肌p-AMPK、PGC-1α 和 TFAM 降低,p-AKT、p-mTOR 和 p-ULK1(Ser757)增加,表明CRS可以抑制AMPK/PGC-1α信号通路而导致线粒体生物发生受阻,并且导致mTOR/p-ULK1(Ser757)激活而抑制线粒体自噬,从而导致疲劳。2莲须对CRS所致小鼠体力疲劳的改善作用及机制研究连续15天灌胃给予ICR小鼠莲须(0.5和1.0g/kg)和阳性对照红景天,同时施以15天、每天8小时的CRS。随后通过检测小鼠前肢抓力和负重游泳耐力、小鼠体成分、腓肠肌H&E染色、血清乳酸、葡萄糖和乳酸脱氢酶水平评价莲须对CRS所致疲劳的改善作用及对腓肠肌的保护作用。并通过转录组测序、电镜、Western blot和RT-qPCR技术研究小鼠腓肠肌线粒体功能、线粒体发生、线粒体自噬和抗氧化应激水平等,阐明莲须改善疲劳的作用机制。结果显示,莲须给药后可以显著保护肌纤维,改善CRS所致的小鼠前肢抓力降低和负重游泳耐力降低,并且可以降低血清乳酸和乳酸脱氢酶水平、升高血糖水平。体成分及转录组测序提示了这与代谢途径、脂质生物合成过程和肌肉发育途径等多条通路的显著变化有关。莲须可以升高CRS小鼠腓肠肌MYH7、OXPHOS、PGC-1α、TFAM和TOMM20表达,从而提高线粒体数量和功能;还可以改善CRS小鼠腓肠肌 PINK1、LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ和 Beclin-1 的降低,改善 p62、p-ULK1(Ser757)和 p-mTOR的升高,从而促进线粒体自噬发生。而这些改变与莲须选择性地促进Sesn2表达而激活Sestrin2,进一步激活下游AMPK信号通路有关。此外,莲须还可以升高CRS小鼠腓肠肌Nrf2并抑制Keap1,进而上调NQO1、HO-1和Mn-SOD等抗氧化酶水平,降低氧化应激产物蛋白质羰基和MDA水平,从而降低氧化应激损伤。综上,莲须通过上调Sestrin2水平来激活AMPK和Nrf2,从而促进线粒体发生和线粒体自噬,增强抗氧化应激水平,改善CRS所致的体力疲劳功效。3莲须对糖皮质激素所致肌肉功能障碍和体力疲劳的改善作用研究首先测定莲须给药后的CRS小鼠皮质酮水平,探究莲须对CRS小鼠皮质酮紊乱的保护作用。并通过腹腔注射给予CRS小鼠皮质酮合成抑制剂美替拉酮,证明内源性皮质酮紊乱与疲劳发生的关系。皮下注射给予正常小鼠皮质酮,并灌胃给予莲须(1.0 g/kg生药),BMN 673 MW通过电镜、H&E染色和Western blot等对小鼠腓肠肌纤维及线粒体情况进行研究,探究莲须对皮质酮注射所致小鼠体力疲劳的改善作用。在体外,将C2C12小鼠成肌细胞分化成肌管细胞,添加地塞米松(80 μM)24h后造成肌管细胞萎缩并研究莲须(0.1、0.2和0.4 mg/mL)的改善作用,采用Western blot研究S estrin2等蛋白的表达情况。结果显示,莲须改善CRS所致的小鼠疲劳与调节皮质酮内源性紊乱有关。且莲须(1.0g/kg)可以显著改善外源注射皮质酮所致的小鼠疲劳,并通过升高皮质酮注射小鼠腓肠肌Sestrin2、TFAM、Nrf2和Mn-SOD水平而促进线粒体生物发生和提高抗氧化应激水平。莲须(0.1、0.2和0.4 mg/mL)对地塞米松(80 μM)诱导的C2C12肌管细胞活力均无影响,且能改善肌管细胞萎缩。莲须可以通过改善地塞米松所致的Sestrin2、Nrf2和TOMM20降低而改善线粒体功能障碍。综上表明,莲须对糖皮质激素所致的肌肉功能障碍和疲劳具有良好的改善作用。4莲须对急性运动所致小鼠体力疲劳的改善作用研究连续15天灌胃给予正常小鼠莲须0.5和1.0 g/kg(水提取物Cedar Creek biodiversity experiment88 mg/kg和176 mg/kg,下同)和阳性对照红景天,通过前肢抓力和负重游泳运动测试,评价了莲须对急性运动所致的体力疲劳的改善作用。并通过对小鼠体成分、肌糖原和肝糖原、及血清尿素、乳酸、乳酸脱氢酶和谷草转氨酶水平的检测对其抗疲劳的机制进行初步研究。结果显示,莲须给药后小鼠的前肢抓力和负重游泳耐力明显提升,且肌糖原和肝糖原水平升高,血清中的尿素、乳酸、乳酸脱氢酶和谷草转氨酶水平降低。结果表明,莲须可以通过增强小鼠能源物质储备、降低代谢产物积累、降低心肌和骨骼肌损伤,从而发挥抗体力疲劳的功效。5莲须的化学成分分析采用UPLC-QTOF/MS技术在负离子模式下对莲须提取物的化学成分进行分析鉴定,并采用HPLC-UV法在360 nm波长下对莲须所含的主要黄酮类化合物的含量进行测定。结果共鉴定出44种成分,其中有机酸类化合物6种,黄酮类化合物20种,单萜苷类化合物6种,长链脂肪酸类化合物12种。含量测定结果显示莲须中芦丁、金丝桃苷、紫云英苷、檞皮素和山柰酚的含量分别为86.57、60.13、231.34、62.88和146.28 mg/100g。该研究为莲须未来的开发和应用提供了更为明确的物质基础。综上,本研究建立了 CRS所致的小鼠体力疲劳模型,并揭示了其发生与线粒体稳态失衡有关;采用CRS小鼠疲劳模型、皮质酮所致小鼠肌肉功能障碍模型、地塞米松所致C2C12肌管细胞萎缩模型和急性运动性小鼠疲劳模型首次发现了莲须具有良好的抗体力疲劳的功效,并从线粒体稳态和抗氧化应激角度揭示了其抗疲劳的机制。本研究为缓解压力所致体力疲劳的功效产品筛选提供了一个稳定的动物模型和机制上更深的认识,并为莲须开发为抗体力疲劳药物或保健食品奠定了坚实基础。

目的:探究高迁移率族蛋白1(HMGB1)在类青光眼引流阀植入术后瘢痕组织中的动态表达,揭示HMGCobimetinib使用方法B1在青光眼术后瘢痕化中的作用及其可能的作用机制。方法:将60只新西兰大白兔随机分为空白对照组(n=20)、模型组(n=20,结膜囊下硅胶植入)、模型给药组(n=20,硅胶植入联合5-氟尿嘧啶注射)。分别于术后4、8 wk取球结膜组织,采用HE染色和Masson染色检测结膜组织中成纤维细胞和胶原纤维增生及分布情况;免疫组织化学染色检测结膜组织中HMGB1、转化生长因子(TGF)-β1、Smad3、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的分布及变化情况;RT-PCR和Western blot检测结膜组织中HMGB1、TGF-β1、Smad3、α-SMA mRNA及蛋白的表达。结果:HE染色和Masson染色结果显示,4、8 wk模型Th2 immune response组较空白对照组结膜组织中炎症细胞、成纤维细胞及胶原纤维增生明显,而4、8 wk模型给药组结膜组织中成纤维细胞及胶原纤维增生相对于同时期模型组明显减少。免疫组织化学染色结果显示,4、8 wk模型组结膜组织中可见HMGB1、TGF-β1、Smad3、α-SMA蛋白表达,呈棕褐色染色,8 wk模型组染色更深,而4、8 wk模型给药组较同时期模型组阳性染色程度下降。4、8 wk模型组结膜组织中HE染色成纤维细胞数与免疫组织化学染色HMGB1的表达水平均呈正相关(r=0.602、0.703,均P<0.05)。RT-PCR和Western blot结果显示,4、8 wk模型组结膜组织中HMGB1、TGF-β1、Smad3、α-SMA mRNA及蛋白表达量显著高于空白对照组(均P<0.05),4、8 wk模型给药组结膜组织中HMGB1、TGF-β1、Smad3、α-SMA mRNA及蛋白表达量显著低于同时期模型组(均P<0.05)。模型组和模型给药组中HMGB1与TGF-β1、Smad3的mRNA表达水平具有正相关性(均P<0.05)。结论:类青光眼引流阀植入术后随时间延长HMGB1表达升高,HMGB1在青光眼术后具有致瘢痕形成Lapatinib试剂的作用,并可能通过TGF-β/Smad信号通路参与瘢痕化的发生发展。

目的 研究香芹酚(carvacrol, CA)对毒死蜱(chlorpyrifos,CPF)诱导的大鼠脑损伤保护作用及作用机制的初步探讨。方法 将70只SD大鼠随机分为对照组、CPF染毒组、依达拉奉干预组、解磷定干预组、低中高3种不同剂量CA干预组(12.5、25和50 mg/kg),皮下注射含CPF 18selleck LY2157299 mg/kg橄榄油溶液建立脑损伤模型，1 h后再分别给予依达拉奉、解磷定、低中高剂量CA处理，连续28 d。通过检测血清中乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase, AChE)活性判断造模情况；通过Morris水迷宫和矿场实验测试大鼠学习记忆和自主探索能力。比较血清和脑组织丙二醛(malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活力衡量氧化应激水平；通过Nissl染色观察大鼠海马体DG区神经元胞体中Nissl小体数量；采用免疫组织化学测定Nrf2蛋白的表达，检测脑组织Na~+-K~+-ATP酶、活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平判断线粒体损伤情况。结果 与对照组相比，CPF损伤组AChE活性明显下降(F=260.00,P<0.01);与模型组相比，经CA给药后，大鼠在矿场实验中穿越中心次数明显增加(F=9.79,P<0.01),运动距离明显缩短(F=3.40,P<0.01);在Morris水迷宫实验中逃避潜伏期明显缩短(F=43.68MRTX849,P<0.01),穿越平台次数明显增加(F=15.77,P<0.01)。Nissl染色中，CA给药后神经细胞相比CPF损伤组明显增加(F=45.36,P<0.01)。血清中SOD和GSH-Px活性明显升高(F=15.08,F=20.72,P<0.01),MDA水平明显降低(F=27.21,P<0.01);脑组Enteric infection织中SOD和GSH-Px活性明显升高(F=5.88,F=1.81,P<0.01),ROS和MDA水平明显降低(F=13.95,F=5.06,P<0.01),Na~+-K~+-ATP酶活力明显升高(F=6.77,P<0.01)。免疫组化结果提示，Nrf2蛋白质含量较Model组明显增加(F=2.10,P<0.01)。结论 CA可用于改善CPF诱导的大鼠脑损伤，其机制可能通过激活Nrf2信号通路发挥抗氧化作用。

本实验探究了在不同丁香酚浓度下(0PS-341使用方法、0.012 5、0.025 0、0.037 5和0.050 0μL/mL)的模拟运输实验对高体鰤(Seriola dumerili)幼鱼造成的应激反应和免疫指标的变化。结果显示：经过8 h运输后，各组高体鰤幼鱼成活率均为100%;实验组幼鱼血清中鱼促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、鱼促肾上腺皮质激素(ATCH)、鱼皮质醇(COR)浓度均高于D25和D50组(P<0.05);高体鰤幼鱼肝、鳃中血红素加氧酶(HO-1)、糖皮质激素(GR)、热休克蛋白(HSP70、HSP90)基因的表达量呈显著差异(P<0.05),结合珠蛋白Drug immediate hypersensitivity reaction(HP)基因表达量的降低与其他指标一起维持高体鰤幼鱼体内的动态平衡。高体鰤体内溶菌酶(Lyz)、铁调素(Hep)、核因子κB1(NF-Kb1)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)基因的表达量随着丁香酚浓度的增加总体呈先升高后降低的selleckchem LGK-974变化趋势，补体3(C3)、转化生长因子β1(TGF-β1)、白介素10(IL-10)基因表达水平的升高反映了运输时胁迫应激导致机体产生了大量的有害物质，组织相容性复合物1(MHC-1)、干扰素-γ(IFN-γ)基因表达水平随着丁香酚浓度的增加呈先降低后升高的变化趋势。综上所述，丁香酚在高体鰤幼鱼运输中应激和免疫方面的作用主要表现为抑制氧化应激和炎症从而引起免疫相关基因的变化，并且在D50组内高体鰤幼鱼应激反应最小，免疫状态最佳。因此，丁香酚适宜作为运输高体鰤幼鱼的麻醉剂，在密封袋密闭充氧运输模式下丁香酚浓度应以0.025 0μL/mL为宜。[中国渔业质量与标准，2023,13(3):18-25]

【目的】探究单核细胞增生性李斯特氏菌Listeria monocytogenes tatD基因缺失对小鼠Mus musculus毒力和肠道菌群的影响，为tatD在单核细胞增生性李斯特氏菌与宿主互作中的作用及减毒疫苗研究提供参考。【方法】采用Bliss法将亲本菌株(LM10403s)、缺失菌株(LM10403sΔtatD)和互补菌株(LM10403sCΔtatD)口服感染小鼠，确定菌株对小鼠的半数致死量(LD50)。LM10403sΔtatD以1.00×105 CFU口服免疫小鼠观察其免疫保护效果。将40只6周龄雌鼠随机平均分为对照即磷酸缓冲盐溶液组(PBS)、LM10genetic perspective403s组、LM10403sΔtatD组和LM10403sCΔtatD组，PBS组小鼠灌胃200μL无菌PBS，实验组分别灌胃200μL含1.00×106selleck HPLC CFU的菌液。灌胃24 h后剖杀各组小鼠，收集肠道内容物，采用Illumina Hiseq测序技术测定各处理小鼠盲肠样品微生物16S rRNA V3～V4区序列，并比较分析其微生物群落结构、多样性和信号通路富集。【结果】Etoposide体外LM10403sΔtatD的LD50为8.11×107 CFU，毒力低于LM10403s。同时LM10403sΔtatD口服免疫小鼠后对单核细胞增生性李斯特氏菌亲本菌株的攻毒能提供80%保护率。Chao1和Observed species指数显示：PBS与LM10403sΔtatD处理组差异不显著，但LM10403s组和LM10403sCΔtatD处理组相比于PBS处理组显著下降(P<0.05)。在门水平上，LM10403sΔtatD处理组的厚壁菌门Firmicutes相对丰度高于LM10403s和LM10403sCΔtatD处理组，而在属水平上，乳杆菌属Lactobacillus相对丰度高于LM10403s和LM10403sCΔtatD处理组。功能预测分析显示：LM10403s处理组在细胞过程、环境信息处理和新陈代谢等信号通路的富集程度高于LM10403sΔtatD处理组。【结论】tatD基因缺失后单核细胞增生性李斯特氏菌的毒力降低，并具有一定的免疫保护效果。tatD基因缺失菌株感染小鼠对肠道菌群失调影响减小，且有益菌增多。图6表1参21

<正>GSI-IX NMR高血压治疗的几点疑问Z-VAD-FMK溶解度患者：药师，我得了高血压，是只要进行药物治疗就可以吗？药师：无论是否选择药物治疗，都要保持良好的生活方式。包括：健康饮食、规律运动、戒烟限酒、改善睡眠和注意保暖。患者：服用降压药物是不是在一天中的任意时间段都可以呢？药师：当然不是！血压会根据生活节律产生波动，正常人的血压是夜间低白天高，每天上午8点和下午4点是一天中的血压高峰值，到了夜间血压会适当降低。所以绝大多数患者应该于清晨起床后半小时内服用降压药。为了让药物尽快吸收发挥作用，空腹服用效果最佳。患者：所有人都是genetic swamping在早上空腹服用降压药物吗？药师：当然也有例外。大多数人的血压波动是遵循白天升高，晚上降低的规则。但是有少数一部分人群正好相反，他们的血压夜间不降低甚至高于白天，对于这些特殊的高血压患者，推荐晚上8点左右服药，来达到良好的降压效果。

目的 探讨自我意识、情绪在儿童注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder, ADHD)家庭环境与症状严重程度中的中介效应，以期为减轻儿童ADHD症状严重程度及针对性临床干预提供参考。方法 选取2020年3月—2022年5月139例儿童ADHD患者(ADHD组)及139例正常儿童(对照组),分别采用儿童自我意识量表(Piers-Harris Children’s Self-Concept Scale, PHCSS)、儿童焦虑性情绪障碍筛查表(Screen for Child Anxiety Related Emotionscreening biomarkersal Disorders, SCARED)、中文版家庭环境量表(Family Environment Scale, FES-CV)、中文版注意缺陷多动障碍父母评定量表第4版(Swanson AZD1152-HQPANolan and Pelham, Version IV Scale-Parent Form, SNAP-Ⅳ)评估自我意识、情绪、家庭环境、症状严重程度，应用Pearson分析自我意识、情绪、家庭环境与症状严重程度的关系以及自我意识、情绪、家庭环境之间的关系，采用依次检验法检验自我意识、情绪在儿童ADHD家庭环境和症状严重程度GDC-0973试剂中的中介效应，并用Bootstrap法进行验证。结果 139例ADHD儿童SNAP-Ⅳ评分为(49.65±6.90)分；ADHD组FES-CV评分、PHCSS评分低于对照组，SCARED评分高于对照组(P<0.05);Pearson分析显示，PHCSS评分与SNAP-Ⅳ评分呈负相关(r=-0.768,P=0.000),SCARED评分与SNAP-Ⅳ评分呈正相关(r=0.806,P=0.000),FES-CV评分与SNAP-Ⅳ评分呈负相关(r=-0.768,P=0.000);Bootstrap检验提示，情绪、自我意识对症状严重程度的中介效应显著，其中情绪对症状严重程度的中介效应为-0.358,占总效应的26.44%,自我意识对症状严重程度的中介效应为-0.189,占比13.96%,两变量联合中介效应-0.148,占比10.93%,且家庭环境对症状严重程度的直接效应为-0.659,占比48.67%。结论 ADHD儿童症状严重程度较高，且受自我意识、家庭环境、情绪等因素影响，可通过对患儿家庭环境的改善直接或间接减轻其症状程度。

目的 观察阿利沙坦酯联合前列地尔治疗糖尿病伴微量白蛋白尿（MAU）的效果。方法 选取2020年2月至2022年7月赣州市人民医院收治的80例确诊为2型糖尿病伴MAU的患者，且均伴高血压，采用随机数字表法分为A组、B组，各40例。在常规治疗基础上，A组用阿利沙坦酯治疗，B组经阿利沙坦酯联合前列地尔治疗，治疗2周。于治疗前、治疗2周，比较两组尿微量白蛋白（mAlb），估算的肾小球滤过率（eGFR），血压水平，炎性因子高敏C反应蛋白（hs-CRP）以及血凝变化[凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）]。结果 治疗2CL13900临床试验周，两组m Alb、eGFR显著下降，且B组低于A组，差异有统计学意义（P<0.05）；两组血压显著下降，但两组间比较差异无统计学意义（P>0.05）；两组hs-CRP水平显著下降，且B组低于A组，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗前、后，两组APTT、PT比较，差异无统计学意义（P>0寻找更多.05）。结论 阿利沙坦酯联合前列地尔应用于糖尿病伴MAU患者中，可降低血清hs-CRP、mAlb、eGFR水平，且对凝血功能无External fungal otitis media影响。