目的 探究运动激发试验(exercise challenge testing, EMK-2206细胞培养CT)对儿童咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma, CVA)的诊断价值。方法 前瞻性纳入2023年1月—2024年1月收治的78例慢性咳嗽患儿,进行ECT,收集临床资料。MCC950细胞培养根据支气管舒张剂治疗效果分为CVA组(n=44)和非CVA组(n=34),分析比较两组治疗前临床特征、肺功能和ECT差异。结果 与非CVA组相比,CVA组男童更多,运动诱发的比例更高,呼出气一氧化氮水平更高,ECT后第1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in one second, FEV1)下降更显著(P<0.05)。二元logistic回归分析显示运动诱发因素和FEV1下降百分比高为慢性咳嗽患儿发生CVA的危险因素(P<0.05)。ECT诊断CVA的最佳切点值为FEV1下降超过8.44%,曲线下面积为0.751 (P<0.05),灵敏度为65.9%,特异度为79.4%。在运动诱发性慢性咳嗽患儿中ECT诊断CVA的最佳切点值为FEV1下降超过8.44%,曲线下面积为0.810(P<0.05),灵敏度为77.1%,特异度77.8%。结论 ECT在儿童慢性咳嗽病因诊断中具有临床应用价值,以FECT-guided lung biopsyV1下降8.44%为诊断CVA的最佳切点值,尤其适用于运动诱发者,可提高灵敏度。[中国当代儿科杂志,2024,26 (12):1288-1293]
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卡氏芽孢杆菌BCH除臭功能分析及在猪粪堆肥中的应用研究
随着人们生活水平的提高,畜禽养殖业发展迅速,但同时也产生了大量的畜禽粪便,带来了环境污染问题。堆肥发酵作为畜禽粪便重要的处置方式,发酵腐熟后产物可作为有机肥施用于农田土壤,提升土壤有机质水平和农产品质量安全。然而,在堆肥过程中存在着周期长、腐BLZ945浓度熟不彻底和恶臭物质释放的问题,影响畜禽粪便资源化处理的速度和质量。畜禽粪便堆肥发酵的相关研究证明,将分离获得的高活性除臭菌株加入畜禽粪便中有利于促进堆肥发酵进程,并减少恶臭物质的排放。本课题组前期在猪粪堆肥中分离纯化获得一株具有除臭效果的芽孢杆菌BCH,对其进行鉴定为卡氏芽孢杆菌(Bacillus cabrialesii),测定其生长温度范围、生长p H范围、产酶能力、氨氮利用率、在猪粪中NH_3和H_2S的去除能力等;在此基础上,对菌株BCH进行三代全基因组测序,利用KEGG和CAZyme等数据库进行序列注释、分析,并对氮硫代谢相关基因进行挖掘;以猪粪为堆肥原料,设置了接种菌株实验组和不接种菌剂对照CK组处理,测定了菌株对于畜禽粪便堆肥的效果,包括温度、p H、种子发芽率、全磷、全钾、全氮、氨氮含量等物质的变化,以及微生物群落的变化特征。主要研究结果和发现如下:(1)除臭菌株的鉴定、除臭能力及产酶特征从发酵猪粪中获得一株除臭芽孢杆菌,通过形态学和分子生物学鉴定为卡氏芽孢杆菌(B.cabrialesii),对其进行了相关除臭能力及产酶特性的研究。在生长特性方面,该菌株在温度30℃~60℃和p H4.0~9.0范围内能正常生长;该菌株在以葡萄糖、果糖、蔗糖为唯一碳源的培养基中产酸,分别使对应培养基p H下降0.90、0.72、1.20。在除臭能力方面,该菌株的氨氮利用率达到45%,在室内猪粪发酵试验中,该菌株对于氨氮的去除率达到27%,对于硫化氢的去除率达到26%。酶活测定发现该菌株表现出了多种降解酶的活性,其中脂肪酶活性为最高为23.99 U/m L,淀粉酶活性最高为2.52U/m L,蛋白酶活性最高为36.44 U/m L,羧甲基纤维素酶活最高为36.52 U/m L,脲酶活性最高为18.02 U/m L,过氧化氢酶活性最高为39.42 U/m L。(2)卡氏芽孢杆菌BCH的三代全基因组测序分析通对菌株BCH进行三代全基因组测序分析,从KEGG、CAZyme、CARD、VFDB数据库分别注释到2822、876、20、21个基因。KEGG数据库显示与代谢相关的通路中,碳水化合物代谢包含了172个基因,共注释到18个基因匹配至氮代谢通路中,20个基因匹配至硫代谢通路中。在碳水化合物活性酶数据库注释到的876个基因,其中糖苷水解酶基因最多(GH)536个,碳水化合物结合模块(CBM)27个,糖基转移酶(GT)169个,碳水化合物酯酶(CE)62个,多糖裂解酶(PL)53个,还有26个具有辅助活性的酶(AA)。氮代谢和硫代谢通路中,分别对hao、sox B两个基因进行蛋白结构预测,HAO氨基酸残基(amino acids)为1032个,proinsulin biosynthesis该蛋白分子质量为83.87 k Da,理论等电点5.11;SOXB氨基酸残基(amino acids)为681个,分子质量为54.68 k Da,理论等电点5.15。(3)卡氏芽孢杆菌BCH菌株在猪粪堆肥发酵中的应用通过添加外源菌株BCH的实验组和CK空白组的各项堆肥指标和菌群分析,堆肥结束后实验组的有机质质量分数(以烘干基计)为64.35%,总养分(N+P_2O_5+K_2O)质量分数(以烘干基计)为4.66%,种子发芽指数(GI)为151.64%,均优于CK空白组对应的理化指标,两组温度趋于一致后,加菌组的臭气释放量低于CK组,总体上实验组的氮损失量少于对照组。对微生物菌群变化分析后发现,门水平上,厚壁菌门(Firmicuselleck化学tes)在堆肥整个时期都为优势菌群;属水平上,在堆肥发酵初期鞘脂杆菌属(Sphingobium)为两组堆肥中的优势菌群,仅在实验组中芽孢杆菌属(Bacillus)的丰度为前十,Ureibacillus等具有硝化能力的细菌和Pseudoxanthomonas等具有硫氧化能力的细菌丰度在实验组中上升。实验组的硝化作用(nitrate reduction)丰度高于CK组、发酵作用(fermentation)丰度高于CK组。本研究中的卡氏芽孢杆菌BCH具有除臭和多种生物酶活性,能在温度30℃~60℃和p H4.0~9.0范围内正常生长,其基因组具有较为完整的氨氮和硫化氢代谢通路;在猪粪堆肥中,加入除臭菌株可促进堆肥发酵的腐熟,减少氨气和硫化氢排放量,并降低堆体内潜在病原菌的相对丰度,使堆肥产品更快达到腐熟标准,研究为畜禽粪便发酵和除臭菌剂提供了依据和资源。
基于16S rDNA测序技术探讨小青龙汤对寒性哮喘小鼠肠道菌群的影响
目的 基于16S rDNA测序技术研究小青龙汤对寒性哮喘模型小鼠肠道菌群的影响。方法 将BALB/C雄性小鼠随机分为空白组、模型组、益生菌组、地塞米松组和低、中、高剂量实验组,每组20只。除空白组外,其余6组均用卵清蛋白+低温环境诱发寒性哮喘小鼠模型。低、中、高剂量更多实验组分别灌胃给予0.24、0.48、0.96 g·mL-1小青龙汤;益生菌组灌胃给予益生菌液0.1 mL;地塞米松组给予腹腔注射3 mg·kg-1·d-1;空白组和模型组均灌胃给予0.01 mbiodiversity changeL·g-1 0.9%NaCl。7组小鼠每天给药1次,连续给药1周。通过16S rDNA测序对各组小鼠肠道群落多样性和菌落组成结构进行分析。结果 (1)操作分类单元(OTU)分析:低、中、高剂量实验组和地塞米松组、益生菌组、模型组、空白组的总OTU分别为4 932.78±1 739.08、4 306.21±1 230.21、3 409.33±965.06、4 662.16±1 355.75、5 278.59±1 159.12、3 832.56±1 041.98和4 511.50±1 603.32,特异性OTU分别为3 274.47±838.66、2 648.53±741.36、1 751.50±502.49、3 004.50±749.08、3 620.86±848.90、2 174.86±754.46和2 853.89±878.51;(2)α多样性指数:低、中、高剂量实验组和地塞米松组、益生菌组、模型组、空白组的Chao1指数分别为1 828.57±655.92、1 792.67±387.52、1 619.37±232.23、1 566.95±395.95、1 837.23±443.00、1 544.52±297.37和1 605.37±368.66,Shannon指数分别为7.66±0.60、7.74±0.43、7.79±0.63、7.18±0.91、7.79±0.63、7.55±0.37和7.61±0.53。在门水平上,各组均以拟杆菌门、厚壁菌门、变形菌门、螺旋菌门和脱硫杆菌门为主(总丰度>98%);在属水平上,各组均以普雷沃菌属、鼠杆菌属、拟杆菌属、乳酸菌属和粪杆菌属为主(总丰度>44%)。结论 小青龙汤可以调节哮喘小Torin 1浓度鼠肠道菌群的相对丰度、Chao1丰富度指数和Shann…
卡泊三醇软膏联合糠酸莫米松乳膏治疗慢性湿疹及神经性皮炎的临床效果
目的 观察卡泊三醇软膏联合糠酸莫米松Exosome Isolation乳膏治疗慢性湿疹及神经性皮炎的临床效果。方法 选取2022年7月—2024年1月钟祥市人民医院收治的慢性湿疹及神经性皮炎患者120例,采用随机数字表法分为联合用药组(患者予以卡泊三醇软膏联合糠酸莫米松乳膏治疗)和单一用药组(患者予以糠酸莫米松乳膏治疗),每组60例。2组均用药4周。比较2组用药前后皮损面积、皮肤屏障功能指标[角质层含水量(SCH)、经皮肤水分丢失值(TEWL)、皮肤湿LBH589 molecular weight度、皮肤油脂水平]、临床症状评分、血清炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-17(IL-17)、白介素-23(IL-23)]及免疫调节因子[P物质(SP)、组胺(HA)、β内啡肽Secretase抑制剂(β-EP)、5-羟色胺(5-HT)、瘦素(LP)、CC趋化因子配体17(CCL17)],不良反应。结果 用药4周后,2组皮损面积减小,SCH、皮肤湿度、皮肤油脂增加,TEWL降低,且联合用药组改善幅度大于单一用药组(P<0.01);2组丘疹、红斑、苔藓化评分与血清TNF-α、IL-6、IL-17、IL-23、SP、HA、β-EP、5-HT、LP、CCL17水平降低,且联合用药组低于单一用药组(P<0.01)。联合用药组不良反应总发生率与单一用药组比较无统计学差异(10.00%vs. 6.67%,χ2=0.436,P=0.509)。结论 卡泊三醇软膏联合糠酸莫米松乳膏治疗慢性湿疹及神经性皮炎可显著缓解临床症状,增强皮肤屏障功能,减轻炎性反应,提高免疫功能,且安全性较高。
围术期结膜下注射曲安奈德和地塞米松滴眼液预防白内障术后炎症和黄斑水肿的疗效及安全性比较
目的 比较围术期单次球结膜下注射曲安奈德(TA)与地塞米松(DEX)滴眼液预防白内障术后眼部炎症和黄斑水肿的有效性、安全性和耐受性。方法 回顾性分析2022年1月至2024年1月在山西省怀仁市光明眼科医院诊治的100例白内障手术患者,按治疗方法将患者分为TA组和DEX组,每组50例患者。TA组患者术后结膜下注射TA混悬液;DEX组患者接受常规局部DEX滴眼液治疗。术前及术后7、28和90 d进行相关检查。采更多用激光耀斑仪检测房水闪辉评估眼部炎症活动度;采用频域光学相干断层扫描评估中央视网膜厚度(CRT)。此外,同时检测2组患者眼压和矫正远视力。结果 在术后90 d,DEX组房水闪辉增加,TA组恢复到正常水平,2组差异有统计学意义(P<bioconjugate vaccine0.05)。术后7 d、PF-03084014体内28 d和90 d,DEX组CRT增加,TA组没有增加,差异有统计学意义(所有P<0.05)。2组患者眼压和矫正远视力变化相似。眼耐受性良好,未观察到严重不良事件。结论 围术期结膜下注射TA可有效预防白内障术后眼部炎症反应和黄斑水肿的发生。
鼻中隔矫正术治疗合并鼻中隔偏曲变应性鼻炎的效果
目的:在鼻中隔偏曲合并变应性鼻炎患者中应用鼻中隔矫正术进行治疗,分析该方式的效果。方法:选取2021年12月~2023年1月天津市东丽医院收治的100例鼻中隔偏曲合并变应性鼻炎患者为观察对象,经抛硬币方式将其划分为对照组50例、观察组50例。分别给予side effects of medical treatment常规治疗、鼻中隔矫正术,并对两组患者所获取的效果进行有效分析。结果:观察组总有效率ABT-263高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观CL13900 IC50察组治疗后鼻痒、喷嚏以及鼻塞积分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后白细胞介素(IL)-17、IL-25、EOS数据水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后生活质量水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗后观察组并发症发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在确诊为鼻中隔偏曲合并变应性鼻炎患者的治疗中展开鼻中隔矫正术可获取良好效果,该方式的实施能够显著优化治疗有效率,缓解疾病相关症状,降低炎性因子水平以及并发症发生率,改善个人生活质量。
发酵豆粕对断奶仔猪生长性能、消化酶及肠道菌群结构的影响
【目的】本试验旨在探讨发酵豆粕(FSBM)对断奶仔猪生长性能、消化酶活性及肠道菌群结构的影响。【方法】试验选取48头21日龄断奶仔猪(杜×长×大,6.88 kg±0.13 kg),随机分为对照组和试验组,每组4个重复,每个重复6头猪。对照组饲粮为基础饲粮,试验饲粮用6%FSBM等量替代基selleckchem CP-690550础饲粮中的豆粕。试验期为20 d。试验期间记录采食量和体重。试验第21天,每个重复选取2头猪屠宰,收集回肠食糜测定消化酶活性和肠道菌群结构,并对两者进行相关性分析。【结果】(1)饲喂FSBM可显著提高断奶仔猪的终末体重和平均日增重(average daily gain, ADG),并显著降低了料重比(feed/gain, F/G)(P<0.05);(2)FSBM组断奶仔猪回肠中的胰蛋白酶和淀粉酶活性显著提高(P<0.05);(3ZD1839化学结构)饲喂FSBM显著提高了断奶仔猪回肠食糜中拟杆菌门、普雷沃氏菌科NK3B31类群、厌氧弧菌属、瘤胃菌科UCG-005、普氏菌属2、巨型球菌属、副杆菌属、Solobacterium及毛螺菌科UCG-004的相对丰度,显著降低了链球菌属的相对丰度(P<0.05);(4)相关性分析显示,胰蛋白酶活性与颤螺菌属、瘤胃菌科UCG-005的相对丰度呈显著正相关(P<0.05),而与Subdoligranulum、萨特氏菌属的相对丰度呈显著负相关(P<0.05);淀粉酶活性与普雷沃氏菌科UCG003、柔嫩梭菌属的相对丰度呈显著正相关(P<0.05),而与琥珀酸弧菌属、罗姆布茨菌属的相对丰度呈显著负相关(P<0.05);脂肪酶活性与柠檬酸杆菌属的相对丰度呈显著负相关(P<0.05)。【结论】饲喂FSBM可改变断奶仔猪回肠菌群结构,增加断奶仔猪回failing bioprosthesis肠胰蛋白酶和淀粉酶活性,并提高其生长性能。
无氰成腈:化学—酶法合成有机腈化合物研究
腈类化合物在很多领域都发挥着重要的作用,而传统合成腈的方法大多存在不足,如反应过程中涉及剧毒金属氰化物或HCN,从而引发的严重安全隐患。为此,本研究开发了安全、高效且条件温和的化学-酶法合成腈类化合物。基于醛肟脱水酶的催化特性,以醛和胺为底物,经历醛肟中间体,催化合成腈类化合物。为了提高醛肟脱水酶的催化性能,采用半理性设计策略,对结合口袋和底物通道中关键氨基酸进行突变,筛选出最佳突变体。同时,设计特定的标签肽段,通过谷氨酰胺转胺酶(MTG)介导的生物正交方法,将醛肟脱水酶聚合体共价固定在树脂上,实现“一步法”聚合-纯化-固定目标酶蛋白,提升其工业应用前景。首先,通过基因组挖掘策略筛选获得来源于霉菌Aspergillus ibericus CBS121593基因组中的醛肟脱水酶Oxd Asp。选择p ET28a构建重组质粒,在E.coli BL21(DE3)中实现功能表达。以肉桂醛肟(Cin Ox)为底物对重组Oxd Asp的酶学性质进行了表征,其最佳反应温度为30℃,最适反应p H为6.0,在30和35℃下的半衰期分别为3.5 h和1.6 h。以Cin Ox底物,其K_m和V_(max)分别被确定为3.55m M和1.54μmol min~(-1)mg~(-1)。通过selleckchem CCRG 81045多序列比对,Oxd Asp已报道的醛肟脱水酶序列同源度,约20~30%,且不具备传统的催化三联体。同时,构建Oxd Asp同源结构模型,并将Cin Ox对接入催化口袋,考察底物结合情况。基于关键残基的丙氨酸扫描,进一步预测了Oxd Asp的催化机理。底物进入催化口袋后,羟基被Glu192固定,相邻的Arg141极化Tyr138中的酚基质子,然后质子化的Tyr138捐献一个质子脱去醛肟中的水分子后产生腈。其次,对Pseudomonas putida F1中的Oxd F1进行半理性的蛋白质设计,构建一种化学-酶顺序催化苄胺合成芳香腈化学品。通过基于蛋白质结构的CAVER分析表明,Met29、Ala147、Phe306和Leu318位于Oxd F1底物隧道入口附近,Leu145的疏水侧链可能会影响催化袋中底物的结合方向。经过两轮突变,突变体L318F和L318F/F306Y对苯甲醛肟的催化活性显著提高,约2.86μmol min~(-1)mg~(-1)。同时,来自Candida antarctica lipase type B的CAL-B在E.coli中功能表达,以UHP作为反应体系中的氧化剂,选择性地将苄胺氧化为醛肟,并优化了该选择性氧化反应。最佳反应条件为在Et OAc溶剂中,6 mAMG510g冻干的全菌体细胞以及2倍当量UHP,在7 h内转化率约为91%。又通过使用含有50 m M无水Na_2SO_3的水溶液(氧化反应体积的1/5)还原方法,组合氧化和脱水两个反应过程,催化苄胺合成芳香腈化学品。对于不同的底物,无需分离中间体,可获得约60%的产率。最后,使用MTG介导的生物正交方法,将Oxd F1聚合后共价固定在树脂上,提升酶蛋白的工业应用属性。重组大肠杆菌K-Oxd F1-L318F-Q,在MTG的催化下两个残基之间优先发生分子内交联,酶活力并未得到提高。重组大肠杆菌K-Oxd F1-L318F-K和Q-Oxd F1-L318F-Q,在MTG的催化下聚集,酶活力得到明显的提高,约6.89 U/mg。综上所述,本文基于醛肟脱水酶的催化特性,成功开发了从胺和醛出发合成腈的化学酶合成方法。该方法为高效、稳定合成腈提供了思路,持续推进高附加值腈化学品的绿色制造技术升级和迭代。同时,通过半理性蛋白设计和共价固定化提高了醛system medicine肟脱水酶的催化性能,为酶的定向改造提供了参考,加快了酶工业化的脚步,具有较高的理论意义和应用价值。
经颈静脉肝内门体分流术中辐射暴露的影响因素分析:基于125例患者的回顾性研究
目的 评估armed conflict患者和手术相关因素对经颈静脉肝内门体分流术(TIPS)的累积透视时间,手术时长,总剂量面积乘积(DAP),累积剂量的影响。方法 回顾性的收集Vorinostat NMR2022年11月至2024年5月西安交通大学第一附属医院的125例经颈静脉肝内门体分流术(TIPS)病例。收集透视时间,手术时长,总剂量面积乘积(DAP)和累积剂量的数据资料,同时包括人口统计学,肝硬化相关症状,门脉情况及曲张静脉情况,以及术中程序的资料作为自变量,所有统计学均在SPSS统计软件中完成,P值小于0.05为有意义。结果 共收集125例患者的信息,其中男性82名,女性43名,平均年龄52.44岁,平均BMI 22.69 kgRSL3体内实验剂量/m2,平均手术时长80.32分钟,平均透视时间25.77分钟,平均总DAP 306.81mGy.cm2,平均累积剂量775.67 mGy。66岁及以上(P=0.021),BMI>24.9(P=0.049),有先天性分流道(P<0.001),栓塞2条曲张静脉(P=0.002)是透视时间的独立影响因素。女性(P=0.048),有先天性分流道(P<0.001),栓塞2条曲张静脉(P=0.022)和栓塞4条曲张静脉(P=0.047),上午手术(P=0.003)及使用弹簧圈栓塞数量(2~3个)(P=0.025)是手术时长的独立影响因素。女性(P=0.002),66岁及以上(P=0.049),有先天性分流道(P=0.038),栓塞2条曲张静脉(P=0.004),门静脉及肠系膜上静脉血栓(P=0.012)是总DAP的独立影响因素。女性(P=0.002),66岁及以上(P=0.021),有先天性分流道(P=0.028),栓塞2条曲张静脉(P=0.004),门静脉及肠系膜上静脉血栓(P=0.008)是累积剂量的独立影响因素。结论 TIPS术中辐射暴露受多种因素共同影响,其中年龄、性别、BMI、先天性分流道、曲张静脉数量及血栓情况为关键变量。透视时间与辐射剂量高度相关,可作为评估和监控暴露强度的简明指标。优化术前评估和术中操作,有助于有效控制患者和术者的辐射风险。
脂质水解对肉品品质及风味影响的研究进展
在肉制品贮藏和加工过程中,脂质水解是影响肉制品质量和风味的重要影响因素之一。脂质水解主要是由于CP-690550采购脂肪酶的作用,不同的内源性脂肪酶作用于不同的脂质位点,进而使得脂质水解形成不同的醛类、醇类、酯类、烃类等物质,这也在很大程度上影响肉制品风味。适当的水解有利于改善肉制品的风味,但是过度水解会导致肉制品的品质下降,出现蛋白氧化、哈喇味等现象。同时,脂质水解和脂质氧化之间具有一定的联系,脂质水解所形成的游离脂肪酸会发生氧化,导致肉制品的品质下降,风味物质减少。控BYL719纯度制脂质水解程度有利于提高肉制品的品质,确定更加有利于肉制品贮藏和加工的条件。脂质水解对不饱和脂肪酸影响较大,脂肪酶对脂质位点的作用也受到众多学者的关注。本文综述肉及肉制品中脂质水解及其发生bio-orthogonal chemistry机制、肉品中脂质水解所导致的化学变化、脂质水解对肉及肉制品品质和风味的影响。