目的:(1)研究TGF-β1通过SMAD3下调呼吸道上皮细胞中miR-92b-3p表达水平的具体机制;(2)研究miR-92b-3p靶向抑制ITGAV的具体机制,明确miR-92b-3p在介导上皮间质转化和肺纤维化中发挥的作用。方法:通过TGF-β1刺激呼吸道上皮细胞系A549细胞,建立肺纤维化体外模型,同时收集9例健康成人及7例特发Adavosertib体内实验剂量性肺纤维化患者肺组织,利用q RT-PCR技术检测miR-92b-3p在体内、体外模型中的表达水平。分别将A549细胞和MLE12细胞分为三组:Control组、SMAD3 siRNA组和NC组。Control组为空白对照,不进行任何干预常规培养细胞;SMAD3 siRNA组加入TGF-β1和SMAD3 siRNA,使细胞SMAD3沉默;NC组加入TGF-β1和SMAD3 siRNA的阴性对照序列,在转染后使用q RT-PCR检测miR-92b-3p含量。借助生物信息学技术,预测miR-92b-3p的靶基因,并在A549和MLE12两种细胞系中分别转染miR-92b-3p的模拟物,建立过表达miR-92b-3p的细胞株,最后通过western blot检测对靶基因ITGAV表达的调控作用。通过A549细胞构建体外肺纤维化细胞模型,western blot检测miR-92b-3p对TGF-β1介导的EMT相关基因表达的影响。将40只小鼠随机分成四组:Control组、PBS组、miR-92b-3p组和NC组。其中,Control组小鼠接受常规饲养,PBS组经尾静脉注射PBS,miR-92b-3p组注射r AAV-miR-92b-3p载体;NC组注射r Aanatomopathological findingsAV-GFP阴性空白对照载体。经过r AAV载体注射3天后,PBS组、miR-92b-3p组和NC组均采用BLM诱导肺纤维化小鼠模型,通过HE染色技术观察小鼠肺组织结构形态的变化,通过Masson染色技术检测肺组织内胶原的沉积情况。结果:TGF-β1刺激的A549细胞中miRhttps://www.selleck.cn/products/dorsomorphin-2hcl.html-92b-3p与其他差异性表达的miRNAs相比,表达下降程度最显著,IPF患者的肺组织中也观察到miR-92b-3p的含量下降,大约是健康成人对照组含量的1/4。与阴性对照组相比,在细胞中转染SMAD3 siRNA可使受TGF-β1刺激的呼吸道上皮细胞中miR-92b-3p表达明显上调。转染miR-92b-3p mimic可下调A549和MLE12两种细胞系中的ITGAV蛋白水平。通过在A549细胞中过表达miR-92b-3p,可显著提高上皮标志物E-钙黏蛋白表达水平,而降低了N-钙黏蛋白、波形蛋白、纤连蛋白等间质标志物表达水平。PBS组小鼠肺组织呈纤维化改变,NC组小鼠肺纤维化程度与PBS组相似;与PBS组、NC组相比,miR-92b-3p组小鼠肺组织的纤维化程度明显降低。结论:miR-92b-3p在肺纤维化体外模型和IPF患者中表达均下调,TGF-β1激活后通过SMAD3下调miR-92b-3p的表达,抑制miR-92b-3p对ITGAV的负性调节作用,促进IPF发生发展。过表达miR-92b-3p可拮抗EMT过程,减轻肺纤维化。