核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)引起的大豆菌核病是一种土传性病害,在世界各个大豆种植区均有发生,严重危害大豆的产量和品质,是影响大豆生产的关键因素之一。随着人们环保意识的加强,对生物防治研究不断深入,植物内生菌剂不仅可以避免对土壤和环境造成污染,病原菌抗药性的增强、生态平衡被破坏、农药残留产生的毒害寻找更多等问题,还具有促进植物生长、降低成本、改良土壤等功能,具有良好的应用前景。本文根据大豆对核盘菌抗性的差异对大豆植株进行内生菌的分离,筛选出可用于防控大豆菌核病的生防菌株,并初步探究生防菌株的作用机理,研究结果如下:1.大豆对菌核病的抗性评级及生防菌的分离。通过叶片接种法,不同的大豆的菌核病抗性存在差异,利用聚类分析方法,将供试材料分为抗病、中抗和感病三组。选取各组中的大豆进行内生菌的分离,共分离得到283株微生物,其中真菌22株,细菌261株。通过平板对峙筛选,初步发现菌株SSd145和SSd232对核盘菌等病原真菌具有广谱抑菌性。2.生防菌SSd145的鉴定及生防功能。菌株SSd145对核盘菌抑菌率为73.2%,对其他7种植物病原菌具有良好的抑制效果Oral relative bioavailability。菌株SSd145进行形态学观察、分子生物学聚类分析及生理生化鉴定,SSd145为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。菌株SSd145防效测定及温室防效评价试验表明,在实验室环境和温室环境中菌株SSd145可以帮助大豆抵御核盘菌的侵染及病情的扩散,具有良好的应用前景。菌株SSd145可以形成强生物膜,覆盖在植株表明保护植株受到植物病原菌的侵染。大豆根部浸泡SSd145菌液后培养,在大豆根内部观察到菌株的繁殖和蔓延,是菌株实现生物防治的关键途径。经过SSd145处理的大豆超氧化物歧化酶的活性上调。经过菌株SSd145处理后的大豆种子播种后测定其鲜重、株高和根长,三个指标均显著升高,表明菌株SSd145对大豆植株具有促进生长的作用。菌株SSd145在有机磷培养基上生长,菌落周围形成透明圈,表明SSd145具有溶磷作用,是其具备促生能力的因素之一。3.生防菌SSd232的鉴定及生防功能。菌株SSd232对核盘菌抑菌率为72.1%,对其他7种植物病原菌具有良好的抑制效果。菌株SSd232进行形态学观察、分子生物学聚类分析及生理生化鉴定,菌株SSd232鉴定为橄榄链霉菌(Streptomyces olivaceus)。菌株SSd232防效测定及温室防效评价试验表明,在实验室环境中及温室环境中菌株SSd232可以帮助大豆抵御核盘菌的侵染及病情的扩散。菌株SSd232可以形成强生物膜,覆盖在植株表明保护植株受到植物病原菌的侵染。大豆根部浸泡SSd232菌液后培养,在大豆根内部观察到菌株的繁殖和蔓延。经过SSd232处理诱导大豆超氧化物歧化酶的活性上调。经过菌株SSd232处理后的大豆种子播种后测定其鲜重、株高和根长,三个指标均显著升高,表明菌株SSd232可以促进大豆的生长。本研究发掘大豆内生细菌作为生防资源,为大VE-822浓度豆菌核病防治奠定理论基础和技术支持。