线粒体抗病毒信号蛋白MAVS是先天免疫系统中维甲酸诱导基因Ⅰ（RIG-Ⅰ）信号通路唯一的接头蛋白，该蛋白对Ⅰ型干扰素（IFN-Ⅰ）的激活以及促炎因子的表达至关重要。因人源MAVS抗体不能识别马MAVS（eqMAVS）蛋白，限制了对马属动LY2835219生产商物病原体调控RIG-I信号通路的研寻找更多究。为了制备eqMAVS单克隆抗体（MAb），本研究利用PCR方法克隆缺失跨膜域的eqMAVS（eqMAVS ΔTM）并构建重组蛋白表达质粒pET32a-eqMAVS ΔTM-his、pGEX-6p-1-eqMAVS ΔTM-GST，转化大肠杆菌Rosetta（DE3）并经IPTG诱导后，分别利用His和GST亲和层析柱纯化，结果获得eqMAVS ΔTM-his蛋白7 mg、eqMAVS ΔTM-GST蛋白6 mg。用eqMAVS ΔTM-his蛋白做免疫抗原免疫6周龄BALB/c小鼠，经常规免疫程序后进行杂交瘤细胞融合，并使用eqMAVS ΔTM-GST蛋白作检测蛋白进行杂交瘤细胞的筛选，共获得两株阳性杂交瘤细胞（4E9、3C4）。选用4E9制备腹水并进行抗体纯化后，利用SDS-PAGE鉴定纯化的MAb，Immune exclusion结果显示，制备的MAb包含重链、轻链，表明MAb纯化成功。对MAb进行亚型鉴定，结果显示重链均为IgM型，轻链均为kappa型。间接ELISA检测MAb效价表明1 mg/mL MAb的效价可达2×10~(5)。将其应用于Western blot检测马单核巨噬细胞eMDM和马胎皮肤细胞NBL-6的内源性MAVS和在HEK293T细胞中过表达的eqMAVS；另外，MAb应用于Western blot检测EIAV感染NBL-6后内源性eqMAVS蛋白的表达变化。结果显示，该MAb能特异性识别NBL-6细胞和eMDM细胞内源性表达的eqMAVS蛋白，以及能特异性识别HEK293T细胞中过表达的eqMAVS蛋白。EIAV感染实验结果表明，随着EIAV感染滴度的增加，内源性eqMAVS蛋白的表达量递减。上述结果表明，本研究制备了eqMAVS的MAb，并利用该MAb首次证明EIAV对eqMAVS的表达具有负调控作用，该MAb为研究EIAV对抗马源RIG-I信号通路的作用机制提供了重要的研究工具。