黄芪甲苷通过调控AMPK/ULK1信号通路减轻高糖诱导的大鼠H9c2细胞损伤

目的：探讨黄芪甲苷（Astragaloside IV,ASIV）对高糖（high glucose,HG）环境下大鼠心肌H9c2细胞系自噬水平的调控作用及相关机制。方法：高浓度（33.3 mmol/L）葡萄糖对H9c2细胞进行干预，建立HG体外损伤模型。将细MRTX1133研究购买胞分为低糖（5.5 mmol/L葡萄糖）对照（control）组、HG组、HG+ASIV(100μmol/L)组和HG+ASIV(100μmol/L)+Compound C(5μmol/L)组。CCK-8法检测H9c2细胞活力；乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）试剂盒检测Chemically defined medium细胞损伤；Western blot检测微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)-I、LC3-II、beclin-1、p62及AMPNaporafenib活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）/Unc-51样激酶1(Unc-51-like kinase 1,ULK1)信号通路相关蛋白的表达变化；免疫荧光法检测LC3B表达。结果：100μmol/L ASIV可显著抑制HG诱导的心肌细胞活力下降（P<0.05），减少HG条件下LDH释放（P<0.05）;ASIV可显著逆转HG诱导的心肌细胞LC3-II/LC3-I比值、beclin-1蛋白表达水平及AMPK和ULK1磷酸化水平的下降，以及p62蛋白的高表达（P<0.05），使HG条件下受到抑制的LC3B荧光强度增加。ASIV促进自噬以及增加AMPK和ULK1磷酸化的作用可被AMPK抑制剂Compound C阻断。结论：ASIV可能通过调节AMPK/ULK1信号通路提高大鼠心肌H9c2细胞自噬水平，从而减轻心肌细胞的HG损伤。