目的:探讨平喘宁通过PERK-elF2α-ATF4-CHOP信号通路改善寒哮大鼠气道炎症的机制,为平喘宁在临床上治疗哮喘提供科学依据。方法:70只3周龄的SD实验大鼠(体重范围100-120 g)随机分成:空白(NC)组、模型(MC)组、平喘宁(PCN)组、GSK抑制剂(GSK)组、平喘宁+GSK抑制剂(PCN+GSK)组、桂龙咳喘宁(GK)组和地塞米松(DEX)组。寒性哮喘大鼠模型复制方法如下:除空白组以外的6组大鼠使用OVA联合冷刺激复制模型。第1天,于大鼠腹腔下注射10%OVA混合液致敏,每只1 m L,第8天重复上述操作。第15～28天,将大鼠放置于专用造模箱内,使用生理盐水调制2%浓度的OVA溶液进行雾化,雾化时保持一定温度的冷刺激,每日雾化30 min。NC组使用生理盐水替代上述操作。造模第29～49天,对各组大鼠雾化结束30 min后进行相应药液灌胃(10 m L/kg),灌胃3周,每天1次。灌胃步骤完成后,空白组和其余6组大鼠分别给予生理盐水和10%OVA溶液进行雾化激发。所有大鼠称重后,按照每只大鼠称重后的数据给予1%戊巴比妥钠0.4 g/kg进行麻醉处理,抽取BALF1～3 m L;剪取肺组织并进行分离,保存备用。实验全程每日观察并记录大鼠的行为表现及大便形态;HE、PAS染色法观察各组大鼠肺组织情况;ELISA法测定IL-5和IgE在各组大鼠BALF中含量;RT-PCR法测定各组大鼠PERK、eIF2α、ATF4、CHOP和GRP78 mRNA的表达;Western blot法测量PERK、eIF2α、ATF4、CHOP、GRP78蛋白在大鼠肺组织中含量。结果:1.HE染色:与NC组大鼠比较,MC组大鼠支气管管腔较狭窄、褶皱明显增多、管腔周围有较多炎症细胞浸润以及分泌物增多;相较于MC组,其余各组大鼠支气管腔狭窄、炎症细胞浸润、分泌物增多等情况均存在不同程selleck合成度改善。2.PAS染色:与NC组比较,MC组大鼠上皮杯状细胞大量增生、黏液分泌较多;与MC组比较,各治疗组大鼠上皮杯状细胞增生和黏液分泌情况均有改善。3.ELISA检测:MC组数据与NC组比较后发现,IL-5、IgE在MC组大鼠BALF中表达更高(P<0.01);5组治疗组检测数据与MC组比较后发现,IL-5、IgE的含量在药物治疗组大鼠BALF中的含量显著降低(P<0.01);相https://www.selleck.cn/products/mrtx1133.html较于PCN组,PCN+GSK组大鼠BALF中IL-5、IgE水平降低最明显(P<0.01)。4.RT-PCR检测:MC组数据与NC组比较后发现,PERK、eIF2α、ATF4、CHOP、GRP78 mRNA在MC组大鼠肺组织中表达均明显增多(P<0.01);5组治疗组检测数据与MC组比较后发现,PERK、eIF2α、ATF4、regeneration medicineCHOP、GRP78 mRNA表达在药物治疗组大鼠肺组织的含量显著降低(P<0.01);相较于PCN组,PCN+GSK组大鼠肺组织中PERK、eIF2α、ATF4、CHOP、GRP78 mRNA水平显著降低(P<0.01)。5.Western blot检测:MC组数据与NC组比较后发现,PERK、eIF2α、ATF4、CHOP和GRP78蛋白在MC组大鼠肺组织水平显著升高(P<0.01);5组治疗组检测数据与MC组比较后发现,PERK、eIF2α、ATF4、CHOP、GRP78蛋白在药物治疗组大鼠肺组织的含量显著降低(P<0.01);与PCN组比较,PCN+GSK组大鼠肺组织中PERK、eIF2α、ATF4、CHOP、GRP78蛋白水平显著降低(P<0.01)。结论:平喘宁可以通过调控PERK-elF2α-ATF4-CHOP信号通路相关蛋白的表达,改善寒哮大鼠气道炎症,发挥治疗哮喘的作用。