连翘脂素(Phillygenin,PHI)属于木脂素类单体化合物主要来源于连翘叶和桂花,具有多种药理活性功能,包括其较好的抗氧化活性、抗炎活性、抗高血脂以及抗肿瘤活性等。本文主要是以帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型线虫为研究对象,利用连翘脂素较好的抗氧化活性研究连翘脂素帕金森病的治疗效果,并对其作用的分子机制进行了探讨。主要研究内容及结果如下:(1)基于网络药理学研究了连翘脂素对PD模型秀丽隐杆线虫的影响。利用Pharm Mapper数据库和Gene Gards数据库平台分析得到连翘脂素和帕金森病的156个交集靶点蛋白。经过String数据分析平台和Cyto Scape3.6.0软件中的MCODE插件进一步分析后得到IGF1、MAPK1、MAPK14和SOD2等核心靶点蛋白。对PHI和PD交集靶点蛋白GO功能和KEGG通路的分析是利用DAVID数据库平台做了进一步的富集分析,结果可知连翘脂素调节帕金森病的主要分子途径可能genetic marker是通过寿命途径中的胰岛素信号通路完成的。(2)以PD模型秀丽隐杆线虫为研究对象,研究了连翘脂素对PD模型线虫生理指标的影响。将不同浓度的连翘脂素(www.selleck.cn/products/kd025-(slx-2119)0、10、20、40μg/m L)作用NL5901线虫后,结果显示其中的20μg/m L和40μg/m L连翘脂素显著延长了线虫的寿命并且改善了线虫的运动能力,增加了线虫体内脂肪含量的积累,降低了线虫体内突触核蛋白的积累,增强了BZ555线虫的食物感知行为和多巴胺能神经元的表达。研究结果表明连翘脂素可以改善PD模型线虫的病理特征。(3)连翘脂素对PD模型线虫分子机制的研究。将不同浓度的连翘脂素(0、10、20、40μg/m L)作用TK22线虫后发现,其中的20μg/m L连翘脂素可以延长氧化应激敏感型TK22线虫的寿命。首先用胡桃醌诱导NL5901线虫体内发生急性氧化应激状态,接着用连翘脂素处作用该状态下的线虫后发现,其中的20、40μg/m L连翘脂素可以延长急性氧化应激状态下NL5901线虫的存活时间,表明连翘脂素可以提高线虫抗氧化应激的能力。利用MK-2206价格检测ROS和抗氧化酶活性的试剂盒检测了连翘脂素作用线虫后线虫体内的ROS和抗氧化酶的含量,结果表明连翘脂素可以降低线虫体内ROS的含量,促进抗氧化酶的转录表达。20μg/m L的连翘脂素作用TJ356和LD1线虫后发现连翘脂素可以促进DAF-16和SKN-1的核转位,q-PCR的实验结果表明连翘脂素提高了daf-16、skn-1、gst-4、gcs-1和sod-3的基因转录水平的表达量,降低了daf-2基因转录水平的表达量。利用分子对接软件分析了连翘脂素与DAF-2、DAF-16、SKN-1、SOD-3、GCS-1、GST-4的结合情况,结果发现结合能均未超出-5k J/mol,证明连翘脂素作用于这些靶点的可能性较高。综上所述,连翘脂素通过调节胰岛素信号通路中的关键转录因子的基因表达量从而提高PD模型线虫的抗氧化应激能力,减弱ROS对机体蛋白稳态的损害程度从而减弱帕金森病对机体造成的病理损害。