目的:百草枯(paraquat,PQ)是一种广泛应用的除草剂,尽管在农业生产中能够提高农作物的产量,但是其本身对于人而言是剧毒。PQ一旦摄入体内就迅速会产生大量氧化应激物,它们能够破坏细胞结构的完整,诱导细胞迅速死亡。PQ中毒的主要病理表现为急性肺损伤,晚期转变为肺部纤维化,最终,病人因为呼吸衰竭而死亡。目前,百草枯中毒对肺损害的发病机制尚未完全阐明,由于没有特效解毒剂,百草枯中毒的病死率极高。铁死亡(Ferroptosis)是一种新型的程序性细胞死亡,与传统的细胞死亡方式(如细胞坏死、凋亡和自噬)不同,目前研究已经证实其在许多系统疾病当中发挥作用。Ferrostatin-1(Fer-1)是第一个被证实能够抑制铁死亡的人工合成试剂,它的主要作用方式是通过抑制脂质过氧化减少铁死亡的发生。在PQ诱导急性肺损伤模型中,除主流认为的细胞凋亡为主导细胞死亡方式,我们猜想还存在其他死亡方式,因此,假设铁死亡或许参与其中。同时,我们还利用体内外实验探究Fer-1对PQ诱导急性肺损伤的作用影响。研究方法:本实验研究的实验对象为雄性C57BL/6小鼠和人A549细胞。在体内实验中,将健康的雄性SPF级C57BL/6小鼠随机地分为四组(n=6),分别设置正常对照(CON)组、百草枯中毒(PQ)组、百草枯中毒+Fer-1治疗(PQ+Fer-1)组和单独使用Fer-1组。我们先通过腹腔注射2.5u M/kg Fer-1预处理2h,然后,我们使用30mgwww.selleck.cn/products/pexidartinib-plx3397/kg PQ的剂量建立急性肺损伤模型,在PQ染毒72h后,采集小鼠的肺组织。然后H&E染色观察小鼠肺泡结构的病理变化,肺湿/干重比反应肺组织的炎性肺水肿程度,评估氧化损伤程度的变化采用肺组织当中的MDA含量和SOD酶活性,还测定了肺组织中TNF-α和IL-1βm RNA水平,Westernblot法检测铁死亡标志性分子TFR1、ACSL4、SLC7A11和GPX4的蛋白表达水平。在体外研究方面,我们使用400u M PQ对A549细胞进行染毒,分为正常对照(CON)组、百草枯中毒(PQ)组、百草枯中毒+Fer-1治疗(PQ+Fer-1)组和单独使用Fer-1组。在细胞铺板24h后,先进行0.1u M Fer-1药物预处理作用6h后,再给予PQ进行染毒。首先,我们使用CCK-8技术检测细胞染毒后的活性。然后,我们继续造模铺板,收集细胞的上清及细胞,进行WB和PCR试验,以及一些表型现象(如ROS的表达水平、MDA的含量和SOD的酶活性)的检测。结果:HE染色结果显示,PQ染毒组小鼠的肺泡结构破坏,肺泡壁增厚,大量炎性渗出。普鲁士蓝染色显示,PQ组相比CON组出线蓝Trichostatin A配制色染色区域。与CON组相比,PQ组肺组织W/D比值也明显增大,PQ组的TNF-α、IL-1βGenetic resistance和PTGS2的m RNA水平明显升高;其次,MDA含量增高、SOD的活性降低,ROS水平显著增大。TFR1和ACSL4蛋白水平升高,SLC7A11和GPX4的蛋白表达水平降低。使用了Fer-1,结果都有所回复,小鼠的肺损伤也有所减轻。结论:在我们的研究中,我们从体内和体外两个维度证实了铁死亡在百草枯诱导的急性肺损伤中产生作用,加重了组织的损伤;Fer-1能够减轻百草枯引起的炎症和氧化应激损伤,在百草枯诱导急性肺损伤中起到保护性作用。