轻链淀粉样管型肾病的临床病理学特征分析以及肾局部组织蛋白表达谱特征

目的:轻链淀粉样管型肾病(light chain amyloid casts,LCAC),包括单纯LCAC(isolated light chain amyloid casts,I-LCAC)和 LCAC 合并轻链淀粉样变性肾病(light chain amyloid casts with light chain amyloid nephropathy,LCAC&AL),属于罕见病,现有的文献多集中在个案报道中,尚缺乏对病例队列的研究,该病的发生率、病理学和临床意义知之甚少,鉴别诊断时也缺乏特异genetic monitoring性的蛋白标志物,非常容易造成漏诊和误诊,对患者的生命健康造成严重的后果。本研究通过回顾性病例对照研究,探讨该疾病的发生率及临床病理联系,同时探寻LCAC肾病患者的蛋白标志物,协助对该病做出准确的诊断和鉴别诊断,为患者更精准的治疗奠定基础。方法:本研究将LCAC的病例分为单纯LCAC(isolated light chain amyloid casts,I-LCAC)组和LCAC合并轻链淀粉样变性肾病(light chain amyloid casts with light chain amyloid nephropathy,LCAC&AL)组,所有病例均进行了光镜、免疫荧光、电镜和免疫电镜检查,对两组患者的病理学检查进行半定量评分进行分析,评估两组患者的临床病理学特征。对I-LCAC组肾病组与轻链管型肾病(light chain cast nephropathy,LCCN)组的病例进行激光显微切割质谱分析,鉴定两组患者组织学上的差异表达蛋白,通过生物学信息分析对差异表达蛋白进行筛选,查阅文献后找出候选蛋白标志物。结果:2018年1月至2021年6月广州金域医学检验中心诊断为轻链管型肾病(LCCN)的患者共131例,其中15例诊断为LCAC(11.5%),包括I-LCAC组10例和LCAC&AL组5例;LCAC有9例临床确诊为多发性骨髓瘤,其中I-LCAC组7例,LCAC&AL组2例,两组差异无统计学意义;与LCAC&AL组相比,I-LCAC组患者血肌酐水平(766.1 μmol/L vs 82.8 μ mol/L)和发生贫血的比例(100%Vs 40%)更高(P<0.05)。I-LCAC组患者的肾组织内每平方毫米的平均淀粉管型数(7.3 vs 0.3)显著多于LCAC&AL组(P<0.05),管型的轻链类型以λ型多见;每平方毫米的平均淀粉管型数与患者的血肌酐水平呈正相关(R2=0.593)。在13个组织样本(I-LCAC组的selleckchem GSK J49例样本和LCCN组的4例样本)的质谱结果中鉴定到889个蛋白,其中差异蛋白有37个,I-LCAC组相较于LCCN组的患者有27个上调蛋白,10个下调蛋白。综合生信分析结果并查阅差异蛋白信息表,选取LCAC组与LCCN组中表达量比例(LCAC/LCCN ratPD-0332991纯度io)较高的上调差异蛋白,结合文献,最终拟定中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(Neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL),基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9),血清淀粉样蛋白P成分(Serum amyloid P-component,SAP)可以作为潜在的候选蛋白标志物。结论:LCAC的病因以多发性骨髓瘤最常见,具有独特的病理形态特征和染色特性,I-LCAC病理类型患者较LCAC&AL组更容易肾功能损伤,每平方毫米的平均淀粉管型数越多肾功能越差,该病的诊断需要依靠免疫病理检查。NGAL、MMP-9和SAP可能是LCAC肾病发病机制的调节蛋白,成为LCAC肾病的潜在蛋白标志物。