天牛止眩胶囊调控CaMKIIδ改善H9C2心肌细胞肥大模型的作用

目的:分析天牛止眩胶囊对H9C2心肌细胞、LncRNA H19/miR-675/CaMKⅡδ信号通路的影响;探讨天牛止眩胶囊对H9C2心肌细胞肥大模型在一定时间内的影响。方法:1.采用CCK8法对天牛止眩胶囊进行适应性浓度测定,选取细胞存活率最佳的药物浓度进行实验。2.选取一定数量的H9C2心肌细胞,将其随机分为四个组,分别为空白血清组,模型对照组,天牛止眩组及依那普利组。空白血清组中不加入任何药物,模型对照组中加入血管紧张素Ⅱ(1.0μg/L)建立心肌细胞肥大模型并培养24小时,并采用实时荧光定量PCR法检测心肌细胞中ANP的m RNA表达确定造模是否成功;在天牛止眩组中加入血管紧张素Ⅱ(1.0μg/L)建立心肌细胞肥大模型培养24小时后,加入10%天牛止眩胶囊含药血清分别培养6小时、24小时、48小时;在依那普利组中加入血管紧张素Ⅱ(1.0μg/L)建立心肌细胞肥medical worker大模型培养24小时后,加入10%依那普利含药血清分别培养6小时、24小时、48小时。3.用实时荧光定量PCR法检测心肌细胞中LncRNA H19、miR-675的表达,Western Blot法检测心肌组织中CaMKⅡδ的表达。4.采用SPSS及统计学分析方法对相关数据进行分析,得出结论。结果:1.药物对细胞存活的影响:与其他浓度的天牛止眩胶囊含药血清相比,得出在10%天牛止眩胶囊含药血清的条件下,细胞存活率最佳,故选定该浓度的天牛止眩含药血清进行后续实验。2.基因的表达:与模型对照组比较,天牛止眩组和依那普利组心肌细胞中LncRNA H19表达升高(p<0.05),且天牛止眩组明显升高(p<0.05);与模型对照组相比,天牛止眩组和依那普利组心肌细胞中miR-675表达升高(p<0.05),且天牛止眩组明显升高(p<0.05)。3.蛋白的表达:和模型组相比,天牛止眩组和依那普利组中CaMKⅡδ的表达均下调(p<0.05),且天牛止眩组下调更明显(p<0www.selleck.cn/products/ch-223191.05)。结论:1.天牛止眩胶囊在体外通过上调心肌细胞中LncRNA H19的表达,使miR-675的表达升高,从而下调CaMKⅡδ的表达,起到抑制心肌细胞肥大的作用。2.天牛止眩胶囊在体外MDV3100抑制剂对心肌细胞肥大模型的改善作用在一定时间内并无明显差异。3.天牛止眩胶囊与依那普利相比,在LncRNA H19/miR675/CaMKⅡδ通路中对心肌肥大细胞的改善作用更显著。