目的:制备具有马尔堡病毒(Marburg virus,MARV)中和活性的单克隆抗体(monoclonal antibodies,m Ab),为马尔堡病毒可能引发的大规模感染提供治疗性药物。方法:将AF-03和MARV GP质粒利寻找更多用瞬时转染CHO-S细胞,经过纯化后得到单抗AF-03和蛋白MARV EPZ-6438GP,利用BCA定量法测定浓度,经SDS-PAGE鉴定纯度。通过VSV和HIV假病毒系统,评价抗体对MARV假病毒的中和作用。建立感染MARV假病毒的小鼠模型,在小鼠体内评价抗体的作用。通过计算机模建和分子对接获得抗体与GP相互作用的位点,将其进行点突变鉴定抗体表位。用岩藻糖基因敲除宿主细胞系CHOK1-AF表达单抗AF-04,经过糖型分析、ELISA、SDS-PAGE等实验鉴定,经过在NK细胞和Jurkat-CD16a-NFAT-Luc细胞活化实验验证与FcγRⅢ结合作用。结果:(1)成功获得纯度较高的AF-03、AF-04及MARV GP。(2)AF-infected false aneurysm03体外评价中体现出较强的中和能力。(3)AF-03在MARV假病毒感染小鼠模型上显示良好的阻断作用。(4)通过分子对接预测AF-03的表位(Q128-N129,Q204-T205-Q206,Y218,K222,C226)并通过结合和中和实验进行验证。(5)AF-03能阻止体外GP酶解的EBOV、SUDV和BDBV假病毒感染细胞。(6)AF-04具有更强的与FcγRⅢα的亲和力和激活NK细胞功能。结论:AF-03在小鼠体内和细胞中均能有效抑制MARV假病毒进入宿主细胞,且对EBOV等假病毒有交叉中和作用;岩藻糖敲除的单克隆抗体AF-04 ADCC活性增强。