本文研究了铜对草鱼幼鱼的生产性能、肠道结构完整性以及肌肉生长发育的影响及其作用机制,比较研究了柠檬酸铜与五水硫酸铜的使用效果,并且确定了草鱼幼鱼的铜需要量。试验随机挑选1080尾健康的草鱼幼鱼,设为6个处理(每个处理3个重复),组间初始体重(11.16±0.01 g)差异不显著(P>0.05),分别饲喂5种水平的有机铜(柠檬酸铜,0.99、2.19、4.06、6.15和8.07 mg/kg)和无机铜(五水硫酸铜,3.15 mg/kg)9周。生长试验结束后,考察铜对草鱼幼鱼生产性能,肠道结构完整性(抗氧化和顶端连接复合体(AJC))的影响以及对肌肉生长发育(胶原蛋白合成和肌纤维生长发育)的影响及可能的作用机制,并确定草Epigenetics抑制剂鱼幼鱼铜(以柠檬酸铜为铜源)的需要量。结果显示,与铜缺乏组(0.99 mg/kg饲粮)相比,适宜水平的铜(4.06 mg/kg)提高了草鱼幼鱼增重率(PWG)、采食量(FI)、饲料效率(FE)和特定增长率(SGR)(P<0.05),表明铜能够提高草鱼的生产性能。适宜水平的铜显著提高了草鱼幼鱼血清铜蓝蛋白(Cp)活性,下调了草鱼幼鱼肝胰脏、肠道和肌肉中铜转运ATP酶1(ATP7A)的m RNA水平,改善了血清、肝胰脏和肌肉铜的营养状态(P<0.05)。此外,适宜水平的铜降低了草鱼幼鱼肠道中丙二醛(MDA)和蛋白质羰基(PC)的含量,上调了铜锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn SOD)、锰超氧化物歧化酶Mn SOD、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(1a、4a、4b)(Gpx(1a、4a、4b))和核因子E2相关基因2(Nrf2)的m RNA水平(P<0.05),下调了Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1a和1b(Keap1a和1b)(P<0.05)的基因水平,增加了核内Nrf2的蛋白表达,表明铜能提高草鱼幼鱼肠道抗氧化损伤能力。进一步发现,适宜水平的铜上调了草鱼幼鱼肠道中紧密连接相关蛋白ZO-1、Occludin、claudin(-b、-c、-f、-7a、-7b、-11)和粘附连接相关蛋白E-cadherin、α-catenin、β-catenin、nectin和afadin的m RNA水平(P<0.05),下调了claudin-12、-15a和肌球蛋白轻链激酶(MLCK)(除了claudin-15b)的m RNA水平(P<0.05)以及MLCK的蛋白水平,表明铜能改善草鱼幼鱼肠道结构完整性。同时,铜增加了草鱼肌肉中的胶原蛋白含量,这可能是由于以下途径:(1)激活了CTGF/TGF-β1/Smads信号通路调节胶原蛋白的转录;(2)上调了La核糖核酸蛋白域6家族(LARP6)m RNA水平(P<0.05)调节翻译起始;(3)增加了脯氨酸羟化酶(PHD)、赖氨酸羟化酶(LH)和赖氨酸氧化酶(LOX)酶活性(P<0.05)来调节翻译后修饰。另外,适宜水平的铜使草鱼幼鱼肌肉的肌纤维直径和肌纤维>50μm的频率增加,可能与肌肉中细胞周期蛋白B、D、E、(cycline B、D、E)、增殖细胞合抗原(PCNA)、生肌决定因子(Myo D)、生肌因子5(Myf5)、肌细胞生成素(Myo G)、肌源性调节因子4(MRF4)和肌球蛋白重链(My HC)的m RNA水平上调和肌生长抑制素(MSTN)m RNA水平的下调(P<0.05)以及鱼肌肉中Myo D、Myo G和My HC的蛋白水平增加(P<0.05)有关。此外,根据PWG、血清Cp活性、肠道MDA含量和肌肉中的胶原蛋白含量,确定草鱼幼鱼对铜的需要量分别为4.74、4.37selleckchem SAG、4.56和4.62 mg/kg饲粮(柠檬酸铜作为铜源)。最后,根据PWG和Cp活性,柠檬酸铜的效价分别是五水硫酸铜的131.80%和115.38%。综上所述,适宜Self-powered biosensor水平的铜能提高草鱼幼鱼的生产性能;改善鱼体铜的营养状态;可能通过Keap1/Nrf2信号途径提高抗氧化酶活力从而提高鱼肠道抗氧化损伤能力;可能通过抑制MLCK信号途径调控肠道上皮顶端连接复合体的结构,改善肠道结构完整性;可能通过激活CTGF/TGF-β1/Smads信号通路途径和生肌调节因子促进草鱼肌肉胶原蛋白沉积和肌纤维增殖分化,进而促进肌肉生长。最后,分别以PWG、血清Cp、肠道MDA含量、肌肉胶原蛋白含量为标识,确定的11-173 g草鱼幼鱼铜需要量为4.74、4.37、4.56和4.62 mg/kg。