研究背景及目的:胆管癌(Cholangiocarcinoma,CCA)是指来源于胆管上皮细胞的胆道系统恶性肿瘤,分为肝内胆管癌和肝外胆管癌。由于其恶性程度高且预后差,容易发生淋巴结转移及神经和血管侵犯,因此患者的五年生存期较低,且治疗效果较差。胆管癌主要治疗措施是手术根治性切除治疗,但大部分患者由于发现较晚,无法进行手术。阿帕替尼是我国自主研发的抗血管生成药物,目前已在胃癌、小细胞肺癌等恶性肿瘤中的疗效得到验证。免疫检查点抑制剂(Immune Checkpoint Inhibitors,ICIs)作为一种免疫治疗方式目前已成功应用于多种恶性肿瘤如肺癌、肝细胞性肝癌等的治疗中,其效果较传统治疗显著,但在胆管癌二线治疗中目前并无统一的标准方案。因此,我们通过此网站研究评价在晚期胆管癌二线治疗中采用阿帕替尼联合ICIs的有效性和安全性,分析胆管肿瘤微环境中相关免疫因子的表达及阿帕替尼与免疫治疗对晚期胆管癌的相关性,为晚期胆管癌患者的二线治疗提供新思路。方法:选择南昌大学第二附属医院肿瘤科和肝胆外科2018年6月至2022年6月期间确诊为胆管癌并进行一线治疗进展或者不可耐受后接受二线治疗的40例患者为研究对象。根据治疗方案的不同分为联合治疗组(采用阿帕替尼联合ICIs治疗)和化疗组(采用单纯化疗方案),每组各20例。收集两组研究对象病史、一般实验室检查及临床病理资料,并对两组患者治疗后的客观缓解率、疾病控pathology of thalamus nuclei制率、中位无疾病进展生存期和中位生存期等临床效果进行综合评价分析,统计两组患者的药物不良反应发生率。此外,对患者的肿瘤检测其外周血CD3、CD4、CD8、NK细胞及相关肿瘤标志物等的表达,并分析与阿帕替尼和免疫治疗对晚期胆管癌治疗效果的相关性。使用二代测序(Next Generation Sequencing,NGS)技术对联合治疗组中的15例患者进行肿瘤组织基因测序,并对基因测序结果进行评估分析。结果:1、对比分析两组患者的性别、年龄、ECGO评分、转移部位、手术切除史及一线治疗方案等临床基线资料,发现均无显著差异具有可比性(p>0.05)。2、根据研究结果及RECIST 1.1标准评估,联合组无患者达到完全缓解(CR),3例达到部分缓解(PR),16例达到疾病稳定(SD),另有1例出现疾病进展(PD)。客观缓解率(ORR)为15.00%,疾病控制率(DCR)为95.00%。化疗组评价达到CR为0例,无患者达到PR,SD的患者有15例,PD患者5人,ORR为0.00%,DCR为75.00%。联合组患者中位无进展生存期(m PFS)为4.20个月,中位总生存期(m OS)为7.10个月;单独化疗组患者m PFS为3.90个月,m OS为6.80个月,两组的m PFS和m OS比较差异不具有统计学意义(P>0.05)。3、在不良反应方面,联合治疗组发生共有16例患者经治疗后发生不良反应,其中血小板减少11例(55.00%)、白细胞减少11例(55.00%),继发性高血压10例(50.00%)、乏力9例(45.00%),手足综合征6例(30.00%)、蛋白尿5例(25.00%)、厌食5例(25.00%)、口腔黏膜炎4例(20.00%)、贫血4例(20.00%)、皮疹2例(10.00%),此外还有3例出现肝功能异常(15.00%),另有3-4级不良反应3例,包括继发性高血压1例(5.00%)、白细胞减少1例(5.00%))。单独化疗组发生血小板减少9例(45.00%),白细胞减少9例(45.00%),继发性高血压7例(35.00%)、乏力6例(30.00%)、厌食5例(25.00%)、口腔黏膜炎5例(25.00%)、手足综合征4例(20.00%)、蛋白尿4例(20.00%)、贫血2例(10.00%)、皮疹1例(5.00%),此外还有2例出现肝功能异常(10.00%),另有3-4级不良反应7例,包括继发性高血压3例(15.00%)、白细胞减少2例(10.00%)、蛋白尿2例(10.00%)、贫血1例(5.00%)、血小板减少1例(5.00%)。两组在总不良反应发生率及1-2级不良反应发生率两组之间差异无统计学意义(P>0.05),而3-4级不良反应发生率联合治疗组为10.00%,化疗组为45.00%,化疗组显著高于联合组(P<0.05)。4、与治疗前相比,联合治疗组患者治疗后外周血CD3+、CD4+、CRas抑制剂D8+、NK细胞水平显著升高,而肿瘤标志物水平显著下降(P<0.05),且组间相比较联合治疗组免疫因子及肿瘤标志物水平变化显著优于对照组(P<0.05)。5、采用二代基因组检测技术对联合组中的15例患者进行测序,结果发现TP53的突变率达到33.33%,ARIDIA的突变率达到26.27%,BAPI、IDHI和FGFR2的突变率均为20.00%,CDKN2A、BRAF、ERBB2的突变率均为13.33%。采用Kaplan-Meier曲线评估发现,TP53、CDKN2A及ERBB2突变的患者对比野生型患者明显缩短了m PFS,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:1、晚期胆管癌二线中联合使用阿帕替尼和ICIs治疗可使疗效明显改善,延长患者的生存时间。2、阿帕替尼联合ICIs治疗组较单独化疗组在1-2级不良反应比较无显著差异,而在3-4级不良反应的发生率上明显降低,促进患者用药依从性的提高,提高患者生活质量。3、外周血CD3+、CD4+、CD8+、NK细胞水平及血清CEA、CA199、CA125及AFP可以作为阿帕替尼联合ICIs治疗的疗效评价指标。4、基因检测单因素分析CDKN2A、ERBB2及TP53突变可缩短患者PFS。