糖尿病患者伤口难愈合是亟asthma medication待解决的临床问题。糖尿病患者的胰岛素分泌减更多少,血糖的代谢能力下降,进一步使伤口愈合过程复杂化,形成慢性伤口,导致愈合停滞。巨噬细胞是主要的免疫效应细胞,在组织稳态和损伤中起着至关重要的作用。研究发现,在糖尿病的病理状态下,伤口中的巨噬细胞处于持续的炎症状态,进而释放促炎因子,严重影响了伤口愈合从炎症期到增殖期的过渡,导致炎症期延长。因此,调控巨噬细胞从促炎表型(M1)向抗炎表型(M2)极化,对促进糖尿病伤口的愈合具有重要的意义。川芎嗪(Tetramethylpyrazine,TMP)是从川芎中提取的一种生物碱单体,具有活血化瘀、抗炎的功效及促进伤口愈合的潜力。中药单体直接作用于伤口会降低药效,而采用药物载体能够有效提高疗效。近年来,水凝胶因为具有均匀的多孔结构及合适的溶胀率,同时可以作为药物缓释的载体,在再生领域受到越来越多的关注。在本研究中,拟通过透明质酸水凝胶载体局部递送TMP,通过调控巨噬细胞促进糖尿病伤口愈合。首先,本研究通过MTT实验检测TMP对细胞活力的影响,证实了TMP不会对皮肤相关细胞产生毒性。接下来通过流式细胞术证实了TMP在一定浓度下具有调控巨噬细胞表型的能力,即在降低M1型巨噬细胞(主要受STAT1信号通路的调控)的比例的同时,提高了M2型巨噬细胞(主要受STAT6信号通路的调控)的比例。通过实时荧光定量PCR(real time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)、酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)、蛋白质印迹法(Western Blotting,WB)等实验进行了TMP调控巨噬细胞极化作用机制的研究,表明TMP可以上调与M1型巨噬细胞相关的细胞因子的释放水平、关键基因的mRNA表达及标志性蛋白的表达量,同时下调与M2型巨噬细胞相关的细胞因BMN 673研究购买子的释放水平、关键基因的mRNA及标志性蛋白的表达量。其次,为了提高TMP在糖尿病伤口愈合方面的成药性,拟采用透明质酸水凝胶进行后续的研究。有文献报道,不同分子量的透明质酸水凝胶具有不同的理化性质。本研究采用三种不同分子量的透明质酸用高碘酸钠(Na IO_4)进行氧化,然后加入交联剂已二酸二酰肼(Adipic dihydrazide,ADH)进行化学交联,并通过溶胀率测定、缓释性测定、抗酶解能力测定筛选出理化性质最优的水凝胶。最后,构建糖尿病小鼠皮肤损伤模型,将载川芎嗪的透明质酸水凝胶(TMP-HA)应用于该模型。通过对皮肤组织进行RT-qPCR、ELISA、WB、免疫组织荧光染色、HE染色及Masson染色等实验,证实TMP-HA可以通过调控伤口中的巨噬细胞极化,促进糖尿病伤口愈合。本研究证明载川芎嗪透明质酸水凝胶具有调控巨噬细胞极化的能力,有望成为一种新型治疗方法,并在糖尿病伤口愈合的临床实践中应用。