目的:重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)在临床上属于危Genetic resistance急重症,死亡率很高,死亡原因主要是严重的胰腺感染和全身多器官脏器衰竭。SAP导致的肠黏膜损伤可引起肠道细菌易位,诱发或加重全身感染。SAP引起肠道损伤的病因学已成为研究热点,其潜在机制尚未完全阐明。血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)是一种有效的抗氧化剂和细胞保护剂。HO-1在肠黏膜中具有保护作用,但其在SAP相关的肠黏膜损伤中的保护作用及其机制尚不清楚。本课题旨在探究HO-1对SAP大鼠肠黏膜屏障损伤的作用及机制,为诊治肠粘膜损伤提供新的见解。方法:选取40只健康雄性的SD大鼠。随机分成4组:假手术组(SO)、重症急性胰腺炎组(SAP)、HO-1激活组(SAP+Hemin)、HO-1抑制组(SAP+Znpp),每组10只。SAP大鼠模型通过逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠的方法建立。SO组大鼠胰胆管注射等量生理盐水。HO-1激活组与HO-1抑制组的大鼠分别在建模前24 h腹腔注射Hemin和Znpp,其余组腹腔注射等量生理盐水。术后24h采集下腔静脉血液、肠道、胰腺组织以供后续分析。使用全自动生化分析仪检测大鼠血清淀粉酶(amylase,AMY)、脂肪酶(Lipase,LPS)的水平。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)活性、D-乳酸(D-LA)、脂肪酸结合蛋白2(Fatty acid-binding protein,FABP2)和内毒素水平使用标准诊断试剂盒进行检测;使用标准试剂盒检测回肠组织丙二醛(malondialdehGNE-140生产商yde,MDA)含量以及二胺氧化酶(Diamine oxidase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)的活性水平;苏木精-伊红(HE)染色观察胰腺、回肠的病理变化,同时做病理评分;通过Western blot技术检测HO-1、Occludin、ZO-1、MLCK、MLC、Caspase-3、Bax、Bcl-2在回肠的表达情况;免疫荧光染色HO-1、Occludin及ZO-1在回肠的分布情况;使用TUNEL检测肠上皮细胞的凋亡水平,并计算凋亡率。结果:我们成功建立重症急性胰腺炎肠黏膜损伤大鼠模型。SAP组的大鼠血清AMY、LPS、TNF-α、IL-6、DAO活性以及D-LA、FABP2和内毒素水平明显高于SO组,IL-10显著低于SO组(均P<0.05),SAP组大鼠肠道HO-1的表达水平显著高于SO组(P<0.05)。同时与SO组相比,SAP组表现出严重的胰腺、回肠组织病理损伤。与SAP组相比,SAP+Hemin组显著增加HO-1的表达(P<0.05)并且IL-10、SOD和GPX的水平明显升高(P<0.05)。然而,TNF-α、IL-6、DAO、D-LA、FABP2和内毒素、MDA及肠上皮细胞凋亡的水平显著降低(均P<0.05)。SAP+Hemin组大鼠胰腺和回肠组织表现出较轻的病理损伤及较低的病理学评分。此外,与SAP组相比,SAP+Hemin组大鼠回肠Occludin、ZO-1的表达水平升高(P<0.05),凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3表达水平明显降低(P<0.05),Bcl-2表达水平明显升高(P<0.05),MLCK/p-MLC信号通路相关蛋白MLCK、P-MLC表达显著降低(P<0.05)。相反,与SAP组相比,SAP+Znnp组显著降低了HO-1的表达(P<0.05),TNF-α、IL-6、DAO活性以及D-LA、FABP2和内毒素水平、MDA含量显著增加(均P<0.05),IL-10的水平SOD和GPX的活性明显降低(P<0.05),肠上皮细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。与SAP组相比,SAP+Znpp组大鼠胰腺和回肠组织表现出严重的病理损伤及较高的病理学评分。此外,与SAP组相比,SAP+Znpp组大鼠回肠Occludin、ZO-1的表达水平显著降低(P<0.05),凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3表达水平明显升高(P<0.05),BEntinostat试剂cl-2表达水平明显降低(P<0.05),MLCK/p-MLC信号通路相关蛋白MLCK、P-MLC表达显著升高(P<0.05)。结论:本研究证实上调HO-1的表达可通过抗炎、抗氧化及抗凋亡途径减轻SAP肠粘膜损伤,并且探究了HO-1通过抑制MLCK/p-MLC信号通路保护肠黏膜。我们的实验为HO-1作为防治肠粘膜损伤的潜在靶点提供新的见解。