目的:本实验拟通过建立大鼠AMI模型,观察蒙药当贡-3对AMI大鼠Bax、Bcl-2和Caspase-3因子表达的调控,以明确蒙药当贡-3保护AMI大鼠心肌的分子机理,为进一步探讨蒙药当贡-3在AMI中的应用奠定基础。方法:100只SPF级SD雄性大鼠,随机取80只采用冠脉结扎法建立AMI模型,将建模成功的50只大鼠随机分为模型组(Model)、当贡-3高剂量组(DG·3-H)、当贡-3中剂量组(DG·3-M)、当贡-3低剂量组(DG·3-L)、氟伐他汀组(Fluvastatin),每组10只;另取10只大鼠作为假手术组(Sham),剩余10只留作空白对照(Blank),各组于术后24小时开始分别灌胃相应药物,DG·3-H、DG·3-M和DG·3-L分别灌胃当贡-3 3.80g/kg、1.90g/kg、0.95 g/kg的混悬液,Model、Sham和Blank组灌胃等体积的蒸馏水,Fluvastatin组每天给予30 mg/kg氟伐他汀灌胃,每日1次,连续灌胃4周。试验结束后取材,采用试剂盒检测各组大鼠心肌组织SOD,CAT,GSH-Px,MDA及血清LDH、CPK的含量;TUNEL法检测大鼠心肌细胞凋亡指数;HE染色观察心肌组织病理形态学变化;荧光定量PCR法检测Bax、Bcl-2、Caspase-3 m RNA表达水平;Western blotting法检测Bax、Bcl-2、Caspase 3蛋白的表达。结果:1.心肌组织SOD,CAT,GSH-Px,MDA及血清LDH、CPK的含量:与Sham相比,Model组大鼠的血清中LDH、CPK的含量升高,心肌组织中SOD、GSH-Px和CAT活性降低,MDA含量升高,上述指标差异均具有统计学意义(P<0.05)。与Model比较,DG·3-H、DG·3-M、DG·3-L组及Fluvastatin组大鼠的血清中LDH、CPK的含量降低,心肌组织中SOD、GSH-Px和CAT活性增强,MDA含量减少,上述指标差异均具有统计学意义(P<0.05)。2.心肌细胞凋亡指数:与ShamCL 318952试剂组比较,Blank组大鼠心肌细胞凋亡比例变化无统计学意义(P>0.05),而Sham组与Model组比较,Model组大鼠心肌细胞凋亡比例明显增加(P<0.01);与Model组比较,DG·3-H、DG·3-M和DG·3-L组大鼠心肌细胞凋亡数目明显减少(P<0.01);与DG·3-H组比较,Fluvastatin组大鼠心肌细胞凋亡比例无明显变化(P>0.05),且DG·3-H组大鼠心肌细胞凋亡比例显著低于DG·3-M和DG·3-L组(P<0.01)。3.大鼠心肌组织病Religious bioethics理学HE染色:Sham组与Blank组大鼠的心肌组织完整,心肌纤维排列整齐,未见炎性细胞浸润;Model组大鼠的心肌纤维排列松散紊乱,部分心肌纤维扭曲断裂,间质内存在大量炎性细胞浸润等病理损伤;DG·3-H、DG·3-M和DG·3-L组大鼠的心肌组织较Model组有不同程度的改善,改善最明显的尤以DG·3-H、DG·3-M组大鼠最为显著。4.PCR法检测Bax、Bcl-2、Caspase-3 m RNA表达水平:Sham组与Blank组大鼠Bax、Bcl-2、Caspase-3 m RNA表达的差异无统计学意义(P>0.05);与Sham组比较,Model组Bax、Caspase-3 m RNA相对表达明显升高(P<0.01),Bcl-2 m RNA相对表达明显降低(P<0.01);与Model组比较,Fluvastatin组及DG·3-H、DG·3-M、DG·3-L组Bax、Caspase-3 m RNA相对表达明显降低(P<0.01),Bcl-2 m RNA相对表达明显升高(P<0.01);与Fluvastatin组比较,DG·3-M、DG·3-L组Bax、Caspase-3m RNA相对表达较高(P<0.05),Bcl-2 m RNA相对表达较低(P<0.05)。5.Western blotting法检测Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达:Sham组大鼠心肌组织Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达与Blank组比较无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。与Sham组比,Model组大鼠心肌组织Bcl-2蛋白表达明显下降(P<0.01),Bax、Caspase-3蛋白表达明显升高(P<0.01)。连续灌胃4周当贡-3后,与Model组比,DG·3-H、DG·3-M、DG·3-L组Bcl-2蛋白表达明显上升(P<0.01),Bax、Caspase-3蛋白表达明显下降(P<0.01)。与DG·3-M、DG·3-L组比,DG·3-H组Bcl-2蛋白表达明显上升(P<0.01),Bax、Caspase-3蛋白表达明显下降(P<0.01)。与Fluvastatin组比较,Dhttps://www.selleck.cn/products/epz-6438.htmlG·3-M、DG·3-L组Bax、Caspase-3蛋白表达较高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达较低(P<0.05)。结论:蒙药当贡-3可有效减少AMI大鼠心肌组织中的MDA含量、升高SOD、CAT及GSH-Px相关酶的活性,降低血清中LDH、CPK含量,这种作用可能与当贡-3抑制心肌组织过度氧化应激反应、降低心肌损伤程度,发挥保护心肌细胞作用有关;同时蒙药当贡-3可通过下调Bax、Caspase-3的表达,上调Bcl-2的表达,来减少心肌细胞凋亡,发挥对AMI大鼠心肌细胞的保护作用。