近年来由于饮食结构的改变,导致人群营养过剩而引起www.selleck.cn/products/imidazole-ketone-erastin代谢功能障碍,其中脂质代谢障碍会对机体产生脂毒性。营养干预对于许多代谢功能障碍具有改善作用,常见的方式是利用天然的生物活性效应物进行干预,从而起到调控作用。脂毒性的毒性作用通常与氧化应激反应的激活有关,因此使用具有调节应激反应的活性物质进行营养干预可能是改善脂毒性的有效手段。前期研究表明米糠肽KF-8具有良好的抗氧化活性。基于此,推测使用米糠活性肽进行营养干预可以改善应激反应的过度激活,缓解脂毒性。本文使用脂肪酸诱导构建了秀丽隐杆线虫和HepG2细胞的脂毒性模型,以米糠活性肽为效应物进行营养干预,探究了米糠活性肽对脂毒性的调控作用及其作用机理,主要研究结果如下:1、不同的米糠活性肽清除DPPH、ABTS自由基的能力、氧自由基吸收能力和CAA值都随浓度的增加而相应增加,筛选出KE-7和KF-8两条肽较其他四条更具有改善应激反应过度激活的优势。2、饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸都controlled infection能诱导脂毒性的产生,但相较于油酸和亚油酸,1 mM棕榈酸不仅能使秀丽隐杆线虫的脂滴表达显著增多,而且能使氧化损伤标志物ROS的表达水平明显升高。3、3 mM的棕榈酸诱导秀丽隐杆线虫形成脂毒性的模型更稳定,其不仅能使脂滴表达和甘油三酯水平升高,更能引起持续的氧化损伤。棕榈酸使ROS、MDA表达水平上升,抗氧化酶(SOD、CAT)活性下降且总抗氧化能力下降。棕榈酸还能引起由脂毒性带来的寿命缩短,并且使爬行和头部摆动频次下降。研究发现给予KE-7和KF-8都能显著降低脂质堆积,并使ROS和MDA的表达水平显著下降,且能显著增加抗氧化酶的活性,使线虫正常行为学指标得到改善。4MEK抑制剂、棕榈酸诱导HepG2细胞形成脂毒性,发现100μM的棕榈酸就能显著引起脂毒性。而在给予50μg/mL的KE-7和KF-8后都能显著降低脂滴的形成、甘油三酯、总胆固醇的表达。此外,还能显著减少ROS和MDA的表达量,同时提高SOD、CAT的酶活力和总抗氧化能力。5、在使用两种不同模型后,对其机理进一步研究。棕榈酸通过下调SCD1使饱和脂肪酸不能进行去饱和,而进入脂质积累途径,DGAT表达升高,脂质堆积。脂质过度积累会引起脂质分解进行代偿性变化,PPAR表达上升,脂质进入脂肪酸氧化途径。但同时CPT的表达下降,又会使脂肪酸氧化途径受阻,由此产生了脂毒性,使机体氧化损伤程度加深。而进行米糠活性肽干预后,能使其相应基因和蛋白的表达水平恢复正常,促使代谢正常最终改善脂毒性。通过研究,本文得出以下结论:(1)米糠活性肽KE-7和KF-8具有良好的抗氧化效果;(2)相较于不饱和脂肪酸,棕榈酸更易形成脂毒性;(3)米糠活性肽KE-7和KF-8可以缓解棕榈酸引起的脂毒性;(4)米糠活性肽KE-7和KF-8通过调节DGAT-PPARα-CPT通路,使秀丽隐杆线虫和HepG2细胞恢复正常的脂质代谢水平,延缓毒性作用。本课题为米糠活性肽抗脂毒性相关研究提供了新的理论依据,为以米糠活性肽为代表的副产物的综合利用提供了理论参考。