米曲霉磷酸甲羟戊酸激酶功能研究

磷酸甲羟戊酸激酶（PMK）是甲羟戊酸（MVA）途径的关键酶。在真菌中，MVA途径是麦角甾醇生物合成的上游，因此PMK也被称为Erg8。为了研究磷酸甲羟戊酸激酶在米曲霉（Aspergillus oryzae）麦PF-6463922小鼠角甾醇合成通路中的作用，对米曲霉AoErg8基因功能进行研究。采用生物信息学方法鉴定米曲霉中的该基因，通过系统发育树和酵母异源互补Bafilomycin A1化学结构分析其是否保守，利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测其表达模式，同时通过荧光蛋白标记对其亚细胞定位进行分析，最后测定AoErg8基因过表达对米曲霉生长和麦角甾醇含量的影响。结果表明，AoErg8进化保守，其表达量在不同生长时间和不同非生物胁迫下均发生了改变；AoErg8能恢复酿酒酵母erg8突变体的温度敏感表型；AoErg8定位于细胞质中；米曲霉中AoErg8过表达导致麦角甾醇含量降低，并且影响米曲霉生长和孢子形成。因此，米曲霉Ao Erg8的功能相hospital medicine对保守，其过表达可以降低麦角甾醇含量并影响菌落生长和孢子形成。该研究进一步揭示丝状真菌米曲霉麦角甾醇生物合成和调控机理，为米曲霉或其他真菌脂质代谢的基因工程奠定基础。