稻瘟菌效应蛋白的筛选与鉴定

稻瘟病菌Magnaporthe oryzae (sDocetaxel溶解度yn.Pyricularia oryzae)通过分泌大量的效应蛋白促进自身在水稻体内的增殖,但大多数效应蛋白未被鉴定。本研究从稻瘟菌田间小种P131的基因组中筛选并克隆了69个候选效应蛋白的编码基因。利用水稻原生质体瞬时表达系统,作者筛选出4个诱导水稻细胞死亡的候选基因,即GAS1、BAS2、MoCEP1和MoCEP2。通过农杆菌介导的瞬时表达体系,发现MoCEP2也诱导烟草细胞死亡,另外有6个候选基因可以抑制由flg22激发的烟草细胞活性氧积累,命名为MoCEP3至MoCEP8。以上10个基因在稻瘟菌侵染初期不同阶段均特异表达。稻瘟菌外泌液蛋白检测结果表明,MoCEP1、MoCEP2、MoCEP3、MoCEP5和MoCEP7均编码外泌蛋白。在P131菌株背景下GSK126,利用PEG介导的遗传转化分别获得了MoCEP1、MoCEP2、MoCEP3、MoCEP5和MoCEP7的单基因敲除突变体。致病力分析表明,基因MoCEP2、MoCEP3和MoCEPcost-related medication underuse5的缺失降低了稻瘟菌对水稻和大麦的毒力,因此这些基因在稻瘟菌致病力方面发挥重要作用。