灵芝β-葡寡糖的分离纯化、结构表征及其活性研究

灵芝(Ganoderma lucidum)是我国传统的药食兼用真菌,β-葡聚Fixed and Fluidized bed bioreactors糖作为灵芝中主要的活性成分之一,在免疫调节、抗肿瘤、抗炎、抗氧化等方面活性显著。实验室前期从灵芝子实体中纯化出一种β-葡聚糖组分GLP20,研究发现该葡聚糖具有较好的生物活性,然而由于其分子量大、溶解性差、黏度大等特点影响了其进一步的开发利用。且相关研究表明多糖降解为低聚糖不仅可以降低多糖的分子量,提高其水溶性,还可以保留甚至提高多糖原有的生物活性,所以本实验室前期通过微波降解手段将灵芝β-葡聚糖GLP20降解为低聚糖片段,初步分离后得到具有抗炎活性的葡寡糖组分GLPW-A(聚合度为2-14)。为阐释抗炎活性与灵芝葡寡糖聚合度之间的关系,将灵芝β-葡寡糖组分GLPW-A(DP2-14)通过Bio-GelP-2凝胶色谱柱分离,从洗脱液、流速以及每管接样量三个方面优化分离条件。通过阴离子色谱和基质辅助激光解析串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析测定其聚合度,并进行体外抗炎活性点击此处评价。结果表明,当洗脱液为0.1 mol/L的NH4HCO3溶液,流速为0.1m L/min,每2m L收集一管时分离效果最佳,按出峰时间先后收集得到了八个组分(F1-F8)。聚合度分析显示,VP-16供应商F8和F7分别为DP2和DP3的葡寡糖组分,其余六个组分F6-F1均主要含有2-3种聚合度的葡寡糖。体外抗炎活性表明,主要含有DP4-6的F5和F6组分在实验范围内无明显抗炎活性,而其余各组分均在一定浓度下表现出不同程度的抗炎作用,且活性优于GLPW-A组分,推测灵芝β-葡寡糖的抗炎活性与寡糖片段的聚合度有关,本研究为灵芝β-葡寡糖的构效关系研究奠定基础。