漆姑草粗多糖对力竭运动小鼠抗疲劳作用的研究

研究目的:运动疲劳指因为运动引起的肌肉收缩功能暂时下降的现象,通常表现为最大肌力、爆发力和肌肉耐力下降等。不过从某种程度上说,运动产生的疲劳是机体的一种保护性机制,可有效预防机体过度衰竭。疲劳的产生,会使运动员机体感到不适,并导致运动成绩下降;而普通人如果长时间处于疲劳状态,会产生一系列疲劳综合症,如焦虑、狂躁、精神涣散等症状。全世界有许多人有疲劳综合症,其导致很多人不能正常学习和生活。我国也有越来越多的此类人群,为了保证此类人群正常工作和学习,缓解机体疲劳相关食品药品的研发有重要意义。当前,已有许多药物缓解疲劳的研究,但长期服用药物会使机体产生不同程度的负面影响。所以,目前更倾向于开发天然材料中的抗疲劳成分,如人参提取物、辣椒提取物、芦丁、枸杞提取物、红景天苷、杜仲叶提取物等。查阅文献,发现有许多天然植物提取多糖对小鼠运动抗疲劳作用的研究,有文献报道漆姑草内含的粗多糖具有疲劳通路中的积极作用,但是漆姑草粗多糖对运动性疲劳具有改善作用的具体机制尚不清楚。通过前期大量的文献检索,及多种材料粗多糖预实验的筛选,确定将漆姑草粗多糖用于此次实验。此实验通过测试力竭运动后小鼠的各项生理生化指标,判断漆姑草粗多糖对运动抗疲劳的作用效果。研究方法:漆姑草粗多糖的获取:称取干燥后的漆姑草2752g,以料液比1∶5的比例加入乙醇浸泡5h后,采用超声波处理,加速漆姑草细胞的破壁,处理时间4h;过滤掉酒精,将残渣按料液比1:20加水,煮沸2h后,冷却24h;过滤残渣vaccine immunogenicity,浓缩滤液,在浓缩selleckchem Dinaciclib后的滤液中按1:4加入乙醇,逐渐出现沉淀,24h后过滤沉淀物,将沉淀物离心后自然风干,再经冷冻干燥得到固体粗多糖。动物实验:将40只健康雄性昆明小鼠(清洁级,8周龄,体重40±2g)适应性饲养一周后,进行力竭运动筛选试验,筛选出运动能力相当的20只小鼠(平均力竭跑台时间:1307.9±111.55s)。将筛选后得到的20只小鼠按体重随机分为空白对照组和漆姑草粗多糖组,每组10只。空白对照组给予正常饮用水自由喂养,漆姑草粗多糖组以漆姑草粗多糖水溶液自由喂养,浓度为1.2mg/ml,连续给药30天。喂养30天后,将小鼠放在速度约12m/min的跑台进行力竭跑台实验,并人工刺激,直至小鼠力竭,并记录跑步时间。力竭跑台实验后,使小鼠休息一周恢复后,进行力竭游泳实验,在每只小鼠的尾部系上1.5克铅条,放入水池中开展力竭游泳实验。游泳池长40cm,水深35cm,水温(25±1.0)℃。入水进入水即开始计时,同时不断驱赶小鼠强迫其游泳。当小鼠力竭时,头部会沉入水中,经历6s后头部仍不浮出水面及时捞出小鼠,记下每只小鼠的力竭游泳时间。力竭游泳运动试验结束后,继续饲养一周,待小鼠恢复后,进行10min跑台速度为12m/min的急性运动,运动后即刻将小鼠眼球采血,在5℃下3500r·min-1离心10 min,用移液枪取上层血清。根据试剂盒说明书使用多功能酶标仪测定血清乳酸和血清尿素氮的含量。采血后立即进行小鼠股骨肌和肝DS-3201溶解度脏的取材,用0.9%浓度的氯化钠溶液对组织进行漂洗,随后用滤纸将多余溶液吸收,并快速称重。根据试剂盒说明书使用多功能酶标仪测定小鼠肌糖原和肝糖原的含量。统计方法:采用SPSS 20.0软件进行数据处理,数据结果都以平均数±标准差的形式表示,组间差异采用t检验来进行分析,当P<0.05时数据有统计意义。研究结果:(1)漆姑草粗多糖对小鼠力竭运动时间的影响。在漆姑草粗多糖组与空白对照组力竭运动实验中发现,漆姑草粗多糖组小鼠力竭跑台时间相对于空白对照组有明显延长(P<0.05),漆姑草粗多糖组小鼠力竭游泳时间也明显长于空白对照组(P<0.05)。(2)漆姑草粗多糖对小鼠血清乳酸(BLA)和血清尿素氮(BUN)指标的影响。在定量急性运动后即刻,漆姑草粗多糖组小鼠血清乳酸BLA浓度明显低于空白对照组(P<0.05),漆姑草粗多糖组血清尿素氮BUN浓度也明显低于对照组(P<0.05)。(3)漆姑草粗多糖对小鼠肝糖原(HG)、肌糖原(MG)的影响。与对照组相比,漆姑草粗多糖组小鼠在定量急性运动后机体肝糖原HG含量明显高于空白对照组(P<0.05),急性运动后肌糖原MG含量也明显高于空白对照组(P<0.05)。研究结论:(1)漆姑草粗多糖溶液的喂养增加了小鼠机体肌糖原和肝糖原的贮备含量,同时使机体在运动期间加快清除致疲物质,如血清乳酸、血清尿素氮等。并且有效延长了小鼠力竭跑步时间和力竭游泳时间,表明漆姑草粗多糖溶液能提高小鼠运动时机体抗疲劳的能力。(2)漆姑草粗多糖溶液增加机体运动抗疲劳能力的可能机制是通过在运动期间加快机体对血清乳酸和血清尿素氮等致疲物质的清除,或者减少机体血清乳酸、血清尿素氮的生成的方式缓解机体疲劳产生的速度;也可能是增加机体供能物质如肌糖原、肝糖原等在机体的贮备含量,或是加快机肌糖原、肝糖原等能源物质在机体运动时的恢复速度来增强机体运动时的能量供应。从而延长机体力竭运动的时间,继而提高机体运动时抗疲劳的能力。