目的 探究从矿区构树组织分离的2株内生真菌葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothiade,P-L12)和燕麦镰刀菌(Fusariu avenacmeum,C-J1)的抗肿瘤活性并分析其代谢产物的化学成分。方法 体外培养指数增长期的5种肿瘤细胞,以噻唑蓝(MTT)法测定2株内生真菌次生代谢产物的抗肿瘤活性。在药物处理48 h后,测定不同条件下细胞的增殖情况,计算受试2种次生代谢产物的半抑制浓度(IC_(50))并进行趋势分析。用液相色谱-质谱联用(LC-MS)法分析2株内生Imidazole ketone erastin核磁真菌代谢产物的化学成分,明确其物质基础。结果 2株内生真菌发酵产物乙酸乙酯部位提取物对5种肿瘤细胞均具有抑制作用。作用48 h后C-J1有较强的细胞毒性作用,对人肝癌细胞HepG2的抑制作用最强,IC_(50)为(14.21±1.56)μg·mL~(-1),对其余4种肿瘤细胞也有较强的细胞毒活性。P-L12的次生代谢产物仅对人前列腺癌细胞DU-145具有较强的抑制作用,其IC_(50)为(9.96±3.00)μg·mL~(-1)。LC-MS分析结果表明,C-J1与P-L12次生代谢产物组成中有部分产物R428纯度相同,两者的差异物质主要有杨梅素、甘松新酮和2,6-二甲氧基苯酚等。结论 2株逆境构树内生真菌P-L12和C-J1具有体外抑制肿瘤细胞活性,尤其是C-J1对肿瘤细胞的抑制作用较强,可作为潜在的抗肿瘤微生probiotic supplementation物药物资源。