目的:探讨JAK-STAT通路介导下茵陈四苓颗粒对急性肝衰竭小鼠肝巨噬细胞极化的调控机制。方法:通过建立ALF(Acute liver failure,急性肝衰竭)小鼠模型,研究茵陈四苓颗粒干预后小鼠肝巨噬细胞极化趋势与JAK-STAT(蛋白酪氨酸激酶-信号转导和转录激活因子)相关通路蛋白表达,探讨基于JAK-STAT通路介导下茵陈四苓颗粒对急性肝衰竭小鼠肝巨噬细胞极化的调控机制。首先,将60只雄性C57BL/6小鼠随机编号,按照每组10只,分为6组,即正常组(等体积生理盐水)、模型组(等体积生理盐水)、对照组(地塞米松)、茵陈低剂量组、茵陈中剂量组、茵陈高剂量组,适应性喂养7天。造模前5天,分别予以等体积生理盐水灌胃提前干预正常组、模型组小鼠(一日两次);地塞米松0.22mg/kg灌胃提前干预对照组(一日两次);中药分别予以2.25g/kg、4.5g/kg、9g/kg灌胃提前干预茵陈SAHA配制低剂量组、SAG采购茵陈中剂量组、茵陈高剂量组(一日两次)。建立ALF小鼠模型,除正常组以外,各组均采取腹腔注射D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-Gal N,500mg/kg)/脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS,20μg/kg)一次成模,8h后可建立急性肝衰竭模型,观察各组小鼠24h后存活率。检测:24h后对各组存活的小鼠进行肝组织、血液标本收集(n=3)。肝功试剂盒检测小鼠血清中肝功ALT,AST。HE染色观察肝组织病理形态改变。ELISA检测组织液血清中TNF-α,TGF-β细胞因子的表达情况。免疫荧光法检测巨噬细胞M1,M2表面标志物INOS(Inducible Nitric Oxide Synthase,诱导型一氧化氮合酶)基因,Arg-1(Arginase-1,精氨酸酶1)基因表达水平。Western Blot检测相关JAK-STAT通路media richness theory上JAK2,STAT3蛋白表达水平。结果:1.小鼠肝功结果示:24h后中药组、对照组肝功谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase,AST)均较模型组有不同程度的改善。茵陈四苓组内:AST随中药浓度升高呈浓度依赖性下降,以茵陈四苓高剂量组改善最明显(P<0.05);2.小鼠肝脏病理形态:模型组小鼠肝组织发生大量炎性细胞浸润,伴肝细胞出血、坏死,肝小叶结构破坏程度重;各干预组小鼠肝组织病理损伤均较模型组小鼠均有不同程度的改善,茵陈四苓组内,随着中药浓度增加,肝组织病理损伤程度逐渐减轻,其中茵陈高剂量组炎性浸润、出血、坏死程度最轻,肝组织结构相对完整。3.ELISA:茵陈四苓组内,TNF-α浓度随着茵陈四苓颗粒浓度升高呈浓度依赖性下降,其中茵陈高剂量组对TNF-α抑制最明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。4.免疫荧光检测肝巨噬细胞M1,M2表面标志物:INOS基因表达随中药浓度升高呈浓度依赖性递减,Arg-1基因表达随中药浓度升高而呈浓度依赖性递增,均以茵陈高剂量组作用显著,差异有统计学意义(P<0.05);5.Western Blot检测相关JAK-STAT通路JAK2,STAT3蛋白表达:茵陈四苓颗粒干预后,JAK2,STAT3蛋白表达呈升高趋势,其中以高剂量组升高显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.茵陈四苓颗粒能改善急性肝衰竭小鼠肝功能、炎性损伤、肝脏组织病理损伤;2.茵陈四苓颗粒可能通过抑制肝巨噬细胞向M1型巨噬极化,抑制TNF-α细胞因子分泌,减轻D-氨基半乳糖/脂多糖诱导的急性肝衰竭小鼠肝损伤。3.茵陈四苓颗粒减轻D-氨基半乳糖/脂多糖诱导的小鼠急性肝衰竭损伤机制可能是通过上调JAK-STAT通路中JAK2、STAT3蛋白表达,促进巨噬细胞向M2型极化,恢复M1/M2平衡相关。